Введение к работе
Актуальность темы. К числу проблем современной вакцинологии относится возникновение неиммунных контингентов в популяции вакцинированного населения (Лямперт И.М., 1983; Покровский В.И., Болотов-ский В.М.. Литвинов С.К.. 1993; Покровский В.И., Литвинов С.К., Болотовский В.М.. 1990; Петров Р.В., Хаитов P.M., 1988; Hinman Alan R., Orenstein Walter A., 1990; Ruiz Contreras J., 1990 и др).
Неиммунные контингенти образуются под воздействием трех механизмов: иммунологического, который обусловлен гетерогенностью популяции по иммунному ответу; технологического, который связан с громоздкой системой прививочного дела, - и социального, в основе которого лежит негативное отношение определенной части населения к вакцинации.
Совершенно очевидно, что наиболее сложной является проблема гетерогенности популяции по иммунному ответу (Петров Р.В., Хаитов P.M., 1988; Медуницын Н.В., 1982; Медуницын Н.В., 1990). Отсюда следует, что развитие вакцинологии исключительно по пути совершенствования существующих технологий вакцинного дела, направленного на устранение остаточной реактогенности современных вакцин (Наркевич М.И. и др., 1990; Girard М., 1992) в целом малоперспективно.
Применяемые практическом здравоохранении современные вакцины являются достаточно эффективными (Ляшенко В.А., Воробьев А.А., 1982; Ляшенко В.А., 1991; Сохин А.А. и др., 1984), однако не следует забывать о том, что эта эффективность достигается за счет многократных ревакцинаций и достаточно часто сопровождается поствакциными осложнениями (Наркевич М.И. и др., 1990). Поэтому приоритетным направлением современной вакцинологии следует считать поиск новых, более эффективных и менее реактогенных иммуногенов (Мертвецов Н.П., 1987; Lussow A.R. et al., 1990; Robbins A., 1990).
К таковым следует отнести бактериальные рибосомы, иммуногенные свойства которых являются объектом пристального изучения на протяжении последних 30 лет (Youmans A.S., Youmans G.P., 1965; Eisenstein Т.К. et al., 1976; Dussourd d'Hinterland L. et al., 1980; Gregory R.L., 1986; Segal
E.. 1989: Nicolaeva L.V.. Savel'ev E.P., 1991; Normier G. et al., 1992; Левен-coh В.И.. Хазанова В.В.. 1991 и др.).
Вакцинные препараты на основе бактериальных рибосом имеют ряд преимуществ перед корпускулярными вакцинами:
-
они не обладают токсичностью и практически не реактогеины;
-
их иммуногенность значительно выше, чем у корпускулярных вакцин:
-
они способны создавать перекрестный иммунитет к различным серотипам возбудителей в пределах вида.
Создание рибосомных вакцин намечает новый путь к получению эффективных средств для специфической профилактики инфекционных болезней. Однако, механизмы иммунной протекции рибосомных вакцин окончательно не расшифрованы, что требует осуществления дополнительных исследований.
Цель и задачи исследования
Целью данной работы являлось выяснение роли 30S и. 50S субъединиц в обеспечении иммунопротективного эффекта 70S рибосом бактерий, а также разработка рекомендаций по конструированию вакцинных препаратов на основе бактериальных рибосом.
Для достижения поставленной цели требовалось решить перечисленные ниже задачи. Используя две различные экспериментальные модели: стафилококковой и клебсиеллезной генерализованной инфекции,- необходимо было установить:
1) зависимость формирования протективного иммунитета от дозы
- рибосом при однократной иммунизации и выбрать оптимальную
иммунопротективную дозу;
-
особенности иммунопротективных свойств бактериальных рибосом из различных субклеточных фракций;
-
различия в иммунопротективных свойствах рибосом, выделенные разными методами;
-
особенности иммунопротективных свойств 30s и 50s субъедини1 рибосом;
5) возможность приготовления-рибосомных аутовакцин и эффективность их применения.
Новизна результатов
Установлена зависимость формирования протективного иммунитета от дозы рибосом S.aureus 209-Р и К.pneumoniae Г-13 при однократной иммунизации/ Проведена комплексная оценка влияния способов выделения рибосом на их иммунопротективные свойства.
Впервые изучены иммунопротективные свойства рибосом К.pneumoniae Г-13 из различных субклеточных фракций, а также иммунопротективные свойства отдельных субъединиц рибосом S.aureus 209-Р и К.pneumoniae Г-13.
Разработаны принципы конструирования вакцинных препаратов на основе бактериальных рибосом, а также предложения по усовершенствованию технологии приготовления аутовакцин.
Впервые проведена рибосомная вакцинотерапия резидентных носителей патогенных стафилококков и показана эффективность этого способа лечения.
Сформулированы гипотеза, консервативных общих антигенов рибосомы и антигенно-амплифайерная гипотеза механизма действия рибосом-ных вакцин.
Научно-практическое значение работы
Полученные сведения о роли 30S и 50S субъединиц в обеспечении иммунопротективного эффекта 70S рибосом бактерий позволят более детально осмыслить природу протективных свойств бактериальных рибосом, а следовательно, создавать более иммуногенные и менее реактогенные вакцины. Это будет способствовать сокращению неиммунных контингентов в вакцинированной популяции.
Применение рибосомных аутовакцин позволит повысить эффективность аутовакцинотерапии и расширить показания для этого способа лечения больных с хроническими гнойно-воспалительными заболеваниями.
Полученные данные могут быть использованы также для лечения и реабилитации больных с различными иммунодефицитными состояниями, прежде всего по системе нейтрофильных гранулоцитов.
Апробация работы
Материалы диссертации доложены на:
I Международном конгрессе по иммунореабилитации (Сочи-Дагомыс, 7-Ю июля 1994г.):
Международной научной конференции студентов и молодых ученых по актуальным проблемам медицины (Бишкек, 19-21 апреля 1994г.);
научно-практической конференции "Актуальные эколого-гигиенические проблемы Северного Кавказа" (Краснодар, 6 апреля 1995 г.);
III Международном симпозиуме врачей "Адаптация организма при стрессовых ситуациях" (Геленджик, 11-14 октября 1995г.);
55 научной студенческой конференции с участием молодых ученых Кубанского медицинского института им.Красной Армии (Краснодар, 12 мая 1994г.);
56 научной конференции студентов и молодых ученых КГМА с международным участием (Краснодар, 18-19 мая 1995г).
Результаты исследования внедрены в лечебную работу Краснодарской краевой клинической больницы им.С.В.Очаповского, краснодарской межвузовской поликлиники, в работу бактериологической лаборатории Краснодарского краевого центра Госсанэпиднадзора, в учебные процессы кафедры микробиологии, иммунологии и вирусологии Кубанской медицинской академии и кафедры генетики и микробиологии Кубанского государственного университета.
По материалам диссертации опубликовано 12 работ. Структура работы
Диссертация изложена на 183 стр., состоит из введения; 2 глав литературного обзора; 7 глав собственных исследований, включая описание методов; заключения, выводов и списка литературы.
Процитировано 230 источников, из них 116 - отечественных и 114 - зарубежных.
Работа иллюстрирована 18 таблицами и 22 рисунками.