Введение к работе
АКТУАЛЬНОСТЬ ПРОБЛЕМЫ. Патогенетическая роль антител класса igE в развитии аллергических заболеваний человека является общеизвестной. Достаточно хорошо разработаны иммунологические и патофизиологические механизмы 1дЕ-опосредован-ной аллергической реакции (Адо А.Д., 1978, Гущин И.С, 1976). в последние годы исследования синтеза igE у человека проводились в основном в модельных системах in vitro и имели целью изучение молекулярных механизмов активации Т и В лимфоцитов и их взаимодействия, ведущего к индукции синтеза IgE, а также выяснение роли различных цитокинов на этапах активации, пролиферации и дифференцировки лимфоцитов и в реализации эффекторной стадии иммунного ответа (Arai к. et. al, 1992, Kips J.С. et al, 1992, Romagtiani S., 1990).
Однако, несмотря на значительный прогресс в понимании молекулярных и клеточных механизмов индукции синтеза IgE, очевидно, что полноценное представление об иммунном ответе невозможно без его изучения на уровне целостного организма. Это предполагает, в частности, исследование заболеваний человека, сопровождающихся повышенной выработкой TgE, и использование методов, позволяющих оценивать активность различных лимфоидных популяций, участвующих в реализации иммунного ответа in vivo. Определение igE-продуцирующей активности мононуклеарных клеток периферической крови (МПК) больных атопическими заболеваниями позволяет приблизиться к решению этой задачи. Однако, до сих пор данный метод использовался в основном для изучения механизмов регуляции синтеза TgE как ТаКОВОГО (Romagnani S. et al, 1982, Saxon X. et al, 1980, Yanagihara Y. et al, 1981). ТОЛЬКО некоторые исследователи пытались установить соответствие данных, получаемых in
vitro, IgE ОТВЄТУ, ИДУІДЄМУ in vivo у бОЛЬНЫХ ПОЛЛИН03ОМ (Turner К.Л. et лі, 1988).
Вместе с тем, изучение различных заболеваний человека, сопровождающихся гиперпродукцией IgE, требует нового подхода, дифференцирующего IgE ответ как форму гуморального иммунного ответа к антигенам окружающей среды (в , частности, аллергенам), и гиперпродукцию igE под влиянием других активирующих стимулов, возможно, антиген-неспецифических. Это может быть существенным для понимания патогенеза этих заболеваний и разработки методов их лечения.
Актуальность работы определяется вышеизложенными теоретическими и прикладными аспектами изучения IgE ответа у человека .
ЦЕЛЬ И ЗАДАЧИ ИССЛЕДОВАНИЯ. Целью работы было изучение IgE ответа к разным группам пыльцевых аллергенов у больных поллинозом в зависимости от.путей контакта с аллергенами в условиях in vivo, и в сравнительном аспекте - гиперпродукции IgE при некоторых иммунодефицитных состояниях (НДС).
В соответствии с этой целью были определены следующие задачи исследования:
1 - Изучить спонтанную продукцию IgE МПК больных поллинозом в периоды различной активности выработки igE - при отсутствии или наличии контакта с причинно-значимыми (релевантными) аллергенами in vivo.
2. Охарактеризовать субпопуляции клеток, которые обеспечива
ют спонтанную продукцию IgE в культуре МПК в периоды различ
ной активности выработки ГдЕ в организме.
3. Установить, какие характеристики igE ответа, идущего in
vivo, находят свое отражение в изменении показателей спон
танной продукции igE МПК in vitro.
4. у больных поллиноэом изучить особенности igE ответа к
разным группам пыльцевых аллергенов и в зависимости от путей
их поступления в организм: парентерального при проведении
иммунотерапии (ИТ) или через слизистые оболочки дыхательных
путей при естественном контакте.
5. У больных некоторыми формами ИДС определить взаимоотноше
ние между igE-продуцирующей активностью МПК in vitro и ак
тивностью выработки IgE in vivo. ,
НАУЧНАЯ НОВИЗНА. РАБОТЫ. Впервые определение спонтанной
продукции ТдЕ МПК больных in vitro было использовано как
критерий для оценки характера иммунного ответа (IgE ответа)
in vivo. Установлено, что увеличение IgE-продуцирующей ак
тивности МПК у больных поллиноэом в периоды стимуляции реле
вантными аллергенами in vivo связано с транзиторной циркуля
цией в русле крови пролиферируюиих В клеток-продуцентов. Об
наружение существенного синтеза IgE de novo данной субпопу
ляцией клеток является показателем активации IgE ответа in
vivo и может быть использовано для изучения особенностей igE
ответа у больных поллиноэом.
Впервые определение спонтанной продукции ТдЕ и аллерген-специфических IgE антител МПК было проведено у больных поллиноэом в процессе специфической ИТ и сопоставлено с наблюдениями в сезоны пыления. Это позволило выявить индивидуальные особенности реагирования больных на разные группы пыльцевых аллергенов - пыльцы деревьев (ІШ и злаковых трав (ПЗТ), а также зависимость выраженности igE ответа от путей поступления аллергенов в организм больного.
- -і -ПРАКТИЧЕСКАЯ ЗНАЧИМОСТЬ- Результаты проведенных исследования служат научным обоснованием использования метода определения спонтанной продукции IgE МПК in vitro для изучения ряда- вопросов, имеющих отношение к патогенезу аллергических и неаллергических заболеваний, протекающих с повышением выработки igE или развитием специфического igE ответа. При аллергических заболеваниях они могут быть основой для изучения особенностей TgE ответа к аллергенам различной степени имму-ногенности и иммунологических аспектов специфической ИТ. При неаллергических заболеваниях, включая, некоторые ИДС, - для изучения патогенетической значимости IgE и установления тех стимулов, которые вызнают его повышенную выработку при отсутствии igE-опосредованной аллергии.
Основные положения, выносимые на защиту:
-
У больных поллинозом появление пролиферирующих В клеток ^продуцентов igE в циркулирующем пуле лимфоцитов свидетельствует: об активизации IgE ответа к релевантным пыльцевым аллергенам in vivo.
-
Определение igE-продуцирующей активности МПК в динамике наблюдения больных поллинозом позволяет выявить особенности igE ответа к разным группам пыльцевых аллергенов в зависимости от путей поступления их в организм.
-
У больных некоторыми формами ИДС igE-продуцирующая активность МПК отражает активность выработки TgE в организме.
Настоящая работа выполнена в рамках государственной научно-технической программы 0.69.07, "Иммунология", задание 02.03, темы "Изучение субпопуляций лимфоидных клеток при формировании аллергии немедленного типа", номер гос. регистрации от. 86.о 10286?..
Работа выполнена в ИБХ РАН (лаборатория клеточных взаимодействий, руководитель - профессор И.М.Дозморов) и Институте иммунологии Минздрава РФ - совместно со ст.н.с. к-м.н. В.Ф.Савельевой (лаборатория иммунологии аллергических реакций, руководитель - профессор А.А.Польнер). Обследованные больные наблюдались з клинике Института иммунологии врачами Н.И.Ильиной (зав. поликлинический отделением), И.В-Данилыче-вой и В.Л.Присяжнюк (отделение "Общая аллергия", зав. к.и.н- Ю.А.Порошина), С.А-Польнером (отделение "Бронхиальная астма", зав. - к-м.н. Т.А.Червинская), и в отделении "Имму-нодефициты детей" - ведущим научным сотрудником д.м.н. М.Н.Ярцевым и зав. отделением д.м.н. Л-А.Гомес
АПРОБАЦИЯ РАБОТЫ. Материалы диссертации были представлены на международном симпозиуме по аллергологии и клинической иммунологии (Москва, декабрь 1990 г.), международном патофизиологическом конгрессе (Москва, май 1991 г.), доложены и обсуждены на объединенной научной конференции отдела иммунологии ИБХ РАБ и подразделения Института иммунологии Минздрава РФ (Декабрь 1492 г.).
ПУБЛИКАЦИИ. Основные результаты исследований по теме диссертации изложены в з научных публикациях.
ОБЪЕМ И СТРУКТУРА ДИССЕРТАЦИИ. Диссертация состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов, 3-х глав собственных исследований, обсуждения полученных результатов, выводов и списка литературы. Изложена на 176 страницах машинописного текста, иллюстрирована 1"> рисунками и 18 таблицами. Список цитируемой литературы включает 91 источников-
- б -