Введение к работе
Акт^альность^ггцдблемд. Изучение аллергических заболеваний - одна га актуальных проблем современной медицины. О социальном значении борьбы с аллергическими заболеваниями свидетельствуют данные о росте числа обращений за медицинской помощью, уровня госпитализации и смертности от этих болезней как за рубежом, так и в нашей стране (Адо А.Д., 1978, 1980; Адо В.А. с соавт., 1991; Астафьева Н.Г. с соавт., 1986; Богова А.В., 1990; Пылкий В.И., 1984; Пылкий В.И. с соавт., 1991; Сидоренко Е.Н., 1986; Фрадкин В.А., 1978, 1990; Horak F. , 1990).
Известно, что среди аллергозов достаточно высокий'удельный вес занимают аллергические заболевания атопического характера, при которых одной из основных этиологических причин является пыльца растений (Астафьева Н.Г. с соавт., 1986; Бекле-ыкшев Н.Д. с соавт., 1985; Ермекова Р.К. с сбавт., 1986, 1988, 1989; Порядин Г.В., 1984; Фрадкин В.А., 1990; Jager $., 1990). Зоны наивысшей распространенности таких заболеваний тесным образом связаны с климато-географическими особенностями местности (Кобзарь В.Н. с соавт., 1990; Коваленко Н.Н. с соавт., 199I; Муминов А.И. с соавт., 1984; Садовничая Л.Т., 1979; Садовничая Л.Т. с соавт., 1991; Cerceaa- LarnvaE \\,, 1991).
Среди разнообразных этиологических факторов, вызывающих поллийозы, помимо пыльцы амброзии, луговых и злаковых трав, значительное место занимает пыльца деревьев - платан, карагач, сосна, ольха, береза, лещина, вяз и т.д. (Гургенидзе Г .В. с соавт., 1983; Ермекова Р.К. с соавт., 1983, 1986, 1988; Купенко P.P., 1990; Остроумова А.И. с соавт., 1991; Хакбердыев М.М. с соавт., 1975, 1982; Spiekman Р. , 1990; Wattin J.-E. , 1991).
Патогенетически обоснованным и аффективный методом лечения при поллиноэах является специфическая иммунотерапия, успепно применяемая с I9II года (L.Noon ). Однако, существующий уже более 80 лет способ лечения аллергических заболеваний водно-еоле-выыи экстрактами аллергенов, имеет ряд недостатков: большая продолжительность курса иммунотерапии, нестойкая супрессия иыиун-иого ответа, опасность возникновения обоих и мізстнзх аллергических реакций в процессе лечения (Новиков Д.К. с соавт., 1991; Порошина Ю.А. с соавт., 1985; Райкис Б.Н. с соавт., 1974-1994; Patterson R. , 1981; Marsh D. , 1981; QuesterbulE 0. , 1982; Frost ad A.etaE., 1983).
Исходя из этих позиций, проводятся целенаправленные поиски новых форм лечебных аллергенов. С этой целью водно-солевые экстракты пыльцы растений химически модифицировали полизткленглико-лем ( Sehon Н., 1978), мочевиной ( Hing Р. . 1974), глютараль-дзгидом (Patterson R., 1973), галоформатами ( Over&Pi Н. , 1971). Наиболее изученными в экспериментальных и клинических условиях являются аллергоиды - аллергены, подвергнутые воздействию формальдегида ( Marsh D. et al. , 1970).
Эти препараты обладают сниженной аллергенностью и выраженной способностью индуцировать синтез защитных антител, что позволяет уменьшить количество инъекций и сократить курс предсезонной иммунотерапии при условии безопасного применения более высоких доз препарата (Нартенко Т.М., 1990; Петрунов Б., 1980; Порошина Ю.А. с соавт., 1985, 1991; Фрадкин В.A.t Ї990;Norman P. etoi. , 1981; Maascfl H.etaL, 1982).
Научная разработка таких препаратов на основе приыэкения модифицированной одноэтапной технологии формалинизации их изготовления была начата в нашей стране в 1974 году (Райкис В.Н. с
5 с соавт., I974-I99I). Ко времени начала настоящей работы, были завершены исследования, оформлена соответствующая нормативно-техничесная документация и внедрена технология изготовления в производство аллергоидов из пыльцы отдельных видов сорных трав (амброзия, полынь) и луговых трав (тимофеевка, ежа, овсянница). С целью распіфения номенклатуры указанных препаратов необходимо было изучить возможность использования такого одноэтапного модифицированного метода формалинизации для изготовления аллергоидов из пальцы деревьев. В связи с этим предстояло решить вопрос о влиянии однозтапной формалинизации на физическое состояние, аллергенность, антигенность и иммунохимические свойства таких аллергенов.
Кеобходико было выяснить, сохраняется ли з аллергоидах специфичность исходного аллергена и безвреден ли он при введении животным?
Конечные результаты таких исследований должны были обосновать возможность оформления соответствующих документов, тэегла-иентирующих промышленный выпуск указанных препаратов и, следовательно, расширить номенклатуру выпускаемых аллергоидов в напей стране.
Цль,.иесле5дван.ия - научно обосновать применение одноэтап-ной отечественной технологии формалинизации для изготовления аллергоидов из пыльцы деревьев.
Задачи^исследования - изготовить и изучить по:
фіізико-хішическии свойствам,
антигенности,
перекрестной антигенной реактивности,
результатам клинического изучения (аллергенность и те-рапечтичвекая эффективность)
ионо-аллергенн и гхжо-аллергоиды из пыльцы березы, ольхи и ле-
шины, и аллергоиды, изготовленные из смеси пыльцы (микст-аллер-гоиды) указанных наименований. Научдая_новизца:
-
Полученные одноэтапной формалинизацией препараты из пыльцы березы, ольхи и лещины, а также из смеси пыльцы этих видов растений, обладают сходными физико-химическими, антигенными и аллергенными свойствами, характерными для аллергоидов, что является результатом однотипного влияния избранного способа на аллергены, экстрагированных из пыльцы указанных видов растений.
-
Сохранение в значительной степени антигенов в аллергои-дах из пыльцы деревьев (береза, ольха, лещина), перекрестно-реагирующих между собой в исходных аллергенах, связано с их относительной устойчивостью к воздействию формалина.
-
Экспериментально установлено сохранение в аллергоидах из пыльцы деревьев их иммуногенных свойств - способности индуцировать синтез антител, комплементарных исходному аллергену.
4.'>Метод Si оказался более информативным длл оценки остаточной аллергенности аллергоидов из пыльцы деревьев, чем обычный метод, основанный на сравнении размеров диаметров волдырей при тестировании аллергеном и аллергоидоы, что связано с учетом индивидуальной неспецифической реактивности кожи (на гистамян^ при использовании метода Si .
5. Терапевтическая активность аллергоидов из пыльцы дерзвь-ев обеспечивается их сниженной аллергенностью и высокой иммуно-генностью.
Практическая_цедность^)абдты|
I. Впервые на основе отечественной технологии получены аллергоиды из пыльцы березы, ольхи и лещины и ыикст-ачлергоиды из смеси пыльцы березы, ольхи и лещины.
-
Для оцзнки аллергенности и специфичности аллергоидов прик-тест является более стандартным и менее травматичным, чем скарификационный, и позволяет проведение исследований одновременно большим количеством аллергенных препаратов.
-
Предложенный метод Sf ( sKin index ) для опенки аллергенной активности формалинизированных аллергенов из пыльны деревьев - определение реакции кожи на аллерген с учетом такой реакции на гистамин - позволяет повысить чувствительность и стандартность прик-теста.
-
Аллгргоидотерапия поллиноза, вызванного пыльцой деревьев, является более эффективным методом специфической иммунотерапии, чем аллергекотерапия.
Материалы диссертации были-представлены и доложены на научных межлабораторных конференциях НПО "Аллерген" (1991, 199?) и Ставропольского научно-исследовательского противочумного института (1995), на Международных симпозиумах по аллергологии и иммунологии в г.Алма-Ата (1992), Дагомысе (1992), на Всесоюзных конференциях по актуальным вопросам медицинской биотехнологии в г.Перми (1988) и г.Томске (1991).
Публикации. Основное содержание отражено в 5 опубликованных работах.
Положения,, ^выносимые ^на_защитх:
-
Метод опноотапной Формалинизаиии аллергена позволяет изготавливать моно- и микст-аллергоиды из пыльцы деревьев (береза, ольха, лещина) со сниженной аллергзнностью и высокой иммуноген-ностьга.
-
Оце::ка аллергоидов из пыльцы деревьев по их аллергенности методом Si ( sKin index ) дает объективную характеристику од-
8 ноцу из основных свойств этих препаратов.
3. Аллергоиды из пыльцы деревьев (береза, ольха, лешина) являются эффективными препаратами для специфической иммунотерапии поллиноза.
СтЕУ_кту:ра работы. Диссертация состоит из введения, I главы обзора литературы, 4 глав собственных исследований, заключения, выводов, списка литературы. Работа изложена на 129 страницах машинописи, иллюстрирована 32 рисунками и б таблицами. Библиографический указатель содержит 194литературных источника, в том числе 99 работ отечественных и 95 зарубежных авторов.