Введение к работе
Актуальность темы. Среди наиболее опасных загрязнителей пищеиых про-дуктоь особое место занимают микотокснны - вторичные метаболиты микроскопических грибов. Микроскопические грибы рода Fusariuin являются широко распространенными токсинообразующими грибами, которые способны продуцировать ряд высокотоксичных метаболитов, среди которых наибольшим распространением отличаются дезоксиниваленол (ДОН или вомнтокспн) и зеараленон (ЗЛ). Алиментарные микотоксикозы, связанные с загрязнением пищевых продуктов и кормов фузариотоксннамн или их продуцентами, относятся к наиболее часто встречающимся микотоксикозам человека и сельскохозяйственных животных /Саркисов А.Х.,1954; Билай В.И.,1977; Тутельян В.А. и Кравченко Л.В., 1985; Miller J.,1995/. В последние годы резко возрос интерес к фузарнотоксннам в связи с появлением новых данных об их токсических свойствах, в частности, их способности даже в незначительных количествах нарушать процессы иммуногенеза /Blaylock B.L. et al., 1993; Holladay S.D. et al., 1995; Rotter B.A. et al., 1996/.
В связи с высокой биологической активностью ДОН и ЗЛ в ряде стран введены регламенты на их содержание в продовольственном сырье /Scott P.M.,1990; Hietaniemi V. et al., 1991; Bergstrom G.S., 1993/. В нашей стране до 1995 г. предельно допустимая концентрация (ГТДК) ДОН для продовольственного зерна пшеницы составляла 0,5 мг/кг, а с 1995 года - 0,7 мг/кг; ПДК ЗЛ для зерновых - 1,0 мг/кг /Тутельян В.А. и др., 1990; Госкомсан-эпиднадзор России, ГН 2.3.4. 034-95/.
Важной мерой профилактики попадания фузарнотоксинов в пищу человека является систематический контроль за содержанием их в зерне и зерно-продуктах. Необходимым элементом в организации такого контроля служит разработка и внедрение в практику работы органов Госсанэпиднадзора высокочувствительных, селективных, доступных и надежных методов анализа фузарнотоксинов. Несмотря на достаточное количество аналитических инструментальных методов определения ДОН и ЗЛ, остаются сложности с серийными определениями содержания фузарнотоксинов в зерновых продуктах, снизанных с малой доступностью, высокой дороговизной современного аналитического оборудования /Kuronen Р., 1989/.
ЦЕЛЬ РАБОТЫ сосі сила ь разработке высокочувствительных методой контроля, прнюдных как для серийных, так и арбитражных аналмзои зерна и зерпо-нродуктов на содержание потенциально опасных для здоровья челоиека фуза-риотоксинов (ДОН, ЗЛ) и изучение частоты и уровней загрязнения лпми токсинами отечественного и импортируемого зерна. Были ностаилены следующие задачи:
разработать высокочувствительный и достоверный метод определения ДОН и ЗЛ в зерне и зерноиродуктах, пригодный для серийных анализов;
разработать мстод выделения и очистки ДОН из зерна, искусственно зараженного в лабораторных условиях высокотоксигенным штаммом-продуцентом этого токсина;
изучить распространенность и степень контаминации ДОН и ЗЛ заготавливаемого зерна пшеницы и ячменя и изучить взаимосвязь уровней загрязнения зерна ДОН со степенью поражения его фузариозом;
изучить распространенность и степень контаминации ДОН и ЗЛ зерновых, предназначенных на продовольственные цели;
оценить реальную нагрузку ДОН на население России.
Научная новизна работы. Разработан новый метод обнаружения, идентификации к количественного определения ДОН и ЗЛ в зерне и зерноиродуктах; впервые выделен и получен в очищенном виде препарат ДОН из субстрата, искусственно зараженного высокотоксигенным штаммом-продуцентом этого токсина; изучена частота и уровни загрязнения ДОН и ЗЛ свеже-убранного (заготавливаемого) зерна пшеницы и ячменя из Северо-Кавказского региона; показано существование прямой корреляционной зависимости между концентрацией ДОН и содержанием фузарпозпых зерен; впервые изучена частота и уровни загрязнения ДОН и ЗЛ зерна пшеницы, ячменя и ржи; установлено, что наибольшее количество загрязненных ДОН партий зерна производятся и потребляются в Северо-Кавказском регионе; впервые установлена величина реальной наїрузки ДОН на население России. Практическая значимость и внедрение результатов работы.
Разработан и внедрен в практику Госсанэпиднадзора России и Минсельхозпрода России новый высокочувствительный, селективный, количественный метод определения ДОН и ЗЛ, позволяющий проводить серийные
анализы. На основании результатов настоящего исследования разработаны и утверждены "Методические указания по обнаружению, идентификации и определению содержании дезокешшваленола (иомнтоксина) и зеараленона и зерне » зернопродуктах" /Минздрав СССР, N 5177-90/.
U ы дел ем н получен в высокоочпщенном внде препарат дезокспнпвале-нола, который используется в качестве стандарта при определении ДОН центрами Госсанэпиднадзора России, Госстандарта России и при производственном контроле в системе Минсельхозпрода России.
Результаты диссертации были использованы при разработке "Инструкции по выявлению фузариоза колоса и зерна пшеницы и ячменя, контролю содержания в них дезокешшваленола и зеараленона и использованию такого зерна" /Минсельхозпрод России, Госкомсанэпнднадзор России, Главная государственная хлебная инспекция при Правительстве Российской Федерации, М., 1996/.
С 1989 г. при участии диссертанта осуществляется мониторинг за загрязнением дезокспниваленолом и зеараленоном продовольственного зерна в 32 республиканских, краевых и областных центрах Госсанэпиднадзора России.
Апробация работы. Результаты работы доложены на научной конференции с международным участием " Питание: здоровье и болезнь" /Москва, 1990/; на 1-ом Международном научном конгрессе "Традиционная медицина и питание: теоретические и практические аспекты" /Москва, 1994/; на 2-ой Всероссийской научно-практической конференции "Антропогенные воздействия и здоровье человека" /Калуга, 1995/.
ПУБЛИКАЦИИ. По результатам выполненных исследований опубликовано 10 ста і ей в научных журналах н сборниках научных трудов, а также в сборниках методических указаний.
Объем и структура диссертации. Диссертационная работа состоит из введения, обзора литературы, трех глав экспериментальной части, заключения, выводов, списка литературы и приложения. Работа*изложена на 182 страницах машинописного текста, содержит 49 таблиц и 15 рисунков. Список литературы включает 210 источников, из которых 185 - иностранных авторов.