Введение к работе
АКТУАЛЬНОСТЬ ПРОБЛЕМЫ Разработка и внедрение надежных краткосрочных тестов для нормирования или выявления специфических эффектов химических веществ является одним из важных направлений гигиенической науки (Г. И.Сидоренко, 1985). Это особенно актуально для изучения отдаленных эффектов. В настоящее время разработана и внедрена в практику система оценки канцерогеннос-ти химических загрязнителей при их гигиеническом регламентировании. Однако объем, длительность и стоимость опытов на млекопитающих значительны, поэтому интенсивно ведутся разработки по предсказанию канцерогенного эффекта с применением краткосрочных тестов оценки генотоксичности (WHO, 1985; Г. А.Белицкий, RRXy-долей, 1986). Ввиду низкой информативности генотоксических тестов in vjtro представляется перспективным развитие краткосрочных тестов выявления канцерогенов в опытах на млекопитающих. Такие исследования позволяют учитывать не только пути введения и особенности токсикокинетики, но и видовую, половую и органную специфичность действия соединений.
Внедрение в практику этих методов позволит увеличить прогностическую ценность результатов для выявления канцерогенов, установить возможную органную специфичность канцерогенной активности веществ непосредственно на тех видах млекопитающих, которые используются в классических исследованиях.
Из онтогенетических тестов наиболее перспективен учет клеток с микроядрами в разных тканях млекопитающих. Разработанные в лаборатории отдаленных эффектов НИИ экологии человека и гигиены окружающей среды им. А. Е Сысина РАмй модификации методов учета микроядер в клетках костного мозга (Методические рекомендации, 1984), эпителиоцитах желудка и толстой кишки (Выскубенко И.Ф. и Шеренешева Н. И. , 1990), а также испытания трех модельных канцерогенов, показали перспективность метода для выявления ор-ганоспецифичности действия химических канцерогенов. На данном этапе возникла необходимость дальнейшего изучения возможности микроядерного теста в исследованиях с различными канцерогенами при пероральном пути поступления.
ЦЕЛЬ РАБОТЫ - обоснование использования метода учета микро-
- 4 -ядер в эпителиоцитах желудочно-кишечного тракта (ЖКТ; млекопитающих для прогнозирования канцерогенной активности химических загрязнителей окружающей среды и оценка связи органоспецифич-ности цитогенетического и канцерогенного действия химических веществ.
-
Усовершенствование метода оценки микроядер в клетках разных отделов ЖКТ млекопитающих и характеристика спонтаного уровня микроядер.
-
Анализ органной специфичности цитогенетического действия известных канцерогенов и веществ с неизвестной канцерогенной активностью в опытах на мышах и крысах.
-
Изучение количественных зависимостей "доза канцерогена --эффект", индукции канцерогеном микроядер в эпителиальных клетках тех органов, в которых отмечается цитогенетический эффект воздействующего соединения.
-
Сравнение видовой, половой и органной специфичности, мутагенного и канцерогенного действия химических соединений.
Разработана модификация методики приготовления препаратов эпителиальных клеток разных отделов ЖКТ млекопитающих для анализа микроядер, позволяющая внедрить ее в токсикологическую практику.
Даны характеристики спонтанного уровня клеток с микроядрами в разных отделах ЮТ крыс и мышей.
Выявлено совпадение органоспецифичности канцерогенного и цитогенетического эффектов химических веществ в органах ЖКТ млекопитающих.
Показана линейная зависимость частоты клеток с микроядрами от дозы канцерогена и обоснована возможность использования микроядерного теста для оценки видовой, половой и органной чувствительности к эффекту мутагенов.
В опытах на клетках различных отделов ЖКТ мышей и крыс выявлено качественное и количественное различие цитогенетического эффекта галопропанов в зависимости от химического строения.
На основании полученных данных, показана возможность приме-
нения микроядерного теста на клетках разных отделов ЖКТ млекопитающих для качественной и количественной характеристики орга-носпецифичности цитогенетического действия химических веществ, оценки видовой и половой специфичности.
Совпадение органоспецифичности канцерогенного и цитогенетического действия веществ позволяет рекомендовать'включить метод оценки частоты клеток с микроядрами в разных отделах ЖКТ в систему краткосрочных тестов выявления канцерогенов. Результаты цитогенетического анализа можно использовать при регламентировании веществ в воде водоемов.
Результаты исследований, проведенных с применением микроядерного теста, учтены при обосновании ОДУ Реалона и цинкового комплекса ИОМС-1 в воде водных объектов хозяйственно-питьевого и культурно-бытового водопользования (утверждены ЫЗ СССР 21 октября 1991 г. N 6025-91).
На защиту выносятся следующие положения:
-
Гигиеническое обоснование учета ьшкроядер в клетках ЖКТ млекопитающих для прогнозирования канцерогенной активности химических соединений.
-
Характеристика показателей нормы микроядерного теста в разных тканях ЖКТ мышей и крыс.
-
Установление количественных закономерностей цитогенетического эффекта и сравнение (качественное и количественное) органоспецифичности мутагенного и канцерогенного эффекта
-
Гигиеническая оценка мутагенной активности веществ (Реалона и цинкового комплекса ИОМС-1) и использование полученных данных при их регламентировании в воде водных объектов.
Материалы диссертации доложены на конференции молодых ученых и специалистов Института (Москва, 1990, 1991). Всесоюзном координационном совещании "Генетические последствия загрязнения окружающей среды мутагенными факторами" (Самарканд, 1990), XXI ежегодной конференции Европейского общества по мутагенам окружающей среды (Прага. 1991), межотделенческой комиссии НИИ экологии человека и гигиены окружающей' среды им. А. Н. Сысина РАМН по апробации кандидатских диссертаций (октябрь 1992 г.).
По теме диссертации опубликовано 5 научных работ.
СТРУКТУРА И ОБЪЕМ ДИССЕРТАЦИИ