Введение к работе
Актуальность проблемы. Муковисцидоз /MB/ - универсальная наследственно обусловленная экзокринопатия, является самым распространенным тяжелым, хроническим, летальным, мзкогонным заболеванием, которое наследуется по аутосомно-рецессивному типу, с частотой около I на 2000, I на 2500 новорожденных и частотой носителей I из 20. I из 25 / Капранов Н.И., 1970, 1974, 1985, 1986., Бочкова Д.Н. 1974, Taussig. L. 1984, оа± Т. f 1989/.
Крупным достижением в изучении муковнсцкдопа является молеку-лярно-генетический прорыв: изоляция "неуловимого" гена и точная его локализация в длинном плече 7 хромосомы с помощь» молекулярных зондов, осуществленная группой ученных из CL!A, Канады, Англии I/слси?е1 &«.&., и др. 1905, 7W L,-C.t и др. І985, и9а-ілЛЧі& & * и др. 1985, u?Lt-e-' Л-, и др. 1985/.
Изоляция и секвенирование гена мукоЕисцидоза позволила идентифицировать делоцию 3-х нуклеотидов, которые кодируют молекулу фенилаланина п позиции 508 внутри CFTR, названш<я дельта Г-500 / Якг,п- . ., и др. 1989, /UobcUisi. -?/, и др. 1989/. Таким образом, была выявлена одна из самых распространенных мутаций в гене муко-» висцидоза и около 70 хромосом несут данную мутацию IU-C Тт . и др. 1990/. По данным отечественных автров половина славянских * муковисцидозных хромосом несут данную мутацию / Баранов Р.С. и др. 1991, Калинин В.Н. и др. 1991/.
Частота д Р 508 делеции весьма вариабельна в различных, популяциях, с минимальным значением в Турции - 2W и максимальной в Дании - 8&І / V/U*stxj>sei.u ДР- 1991, &/luuiJx. >А и др. 1991/.
Мутация д F 508 в 10-м экзсне гена муковисцидоза оказывазт влияние на неполную работу CFTR и отсюда нарушается правильная локализация его в клетке, что водет к серьезніїм изменениям в апикальной части клеток желез внешней секреции. Исследования йі і&і-го предполагают, что относительнал непроницаомость мембран апикаль-
ных клеток для хлоридов является молекулярным дефектом при муко-висцидозе. Более того, ДНК трансфекция показывает, что СРТР. является хлоридным каналом, регулирующимся с-АМР I' ttycU . и др# jg
К настоящему моменту идентифицировано более 160 мутаций и многое из них редкие / 4 - /ft**. и др# jggj ( Конгресс анализа гена муковисцидоза 1992 /персональное сообщение//.
Многие зарубежные авторы считают, что каждый генотип ассоци ирован либо с PI /недостаточностью поджелудочной железы/, либо/- с сохранной ее функцией/ РЗ , но не с обоими состояниями вместе, эт согласуется с гипотезой, что недостаточность поджелудочной железы /PI/ и ее сохранность /PS/ генетически детерминированы специфи ческими мутациями в гене муковисцидоза. PS обусловлена доминантным фенотипом, зависящей от более"мягкой" мутации в соотетствую-щем локусе гена муковисцидоза, PI является результатом 2-х "тяжелых мутаций в CFTR. Появилась возможность классифицировать мутации на "тяжелые" и "мягкие". Мутации д F 508, дЯ507, 0Л93Х, R553 vvI?.c2X, 621+ 1С"* Т, 1717 - IG + А, 556 АА, 3659ДС, II48T, "520! С55ІД и R560T относятся-к тяжелым и мутации KII7H, E334V^,R347P, А455Е и R547H к мягким. Предварительные анализы показали, что мутации затрагивающие высоко-консервативные аминокислотные остатки п двух предполагаемых нуклеотид-связывагощих полях, часто ассоциированы с PI //^^^4 и др, 1990/. Два других сообщения указывают, что для больных гомозиготных по нонсенс мутациям /стоп-кодо; характерна выраженная недостаточность функции поджелудочной железы, но незначительные нарушения в легких/ви*-.*-^9 С А и ДР» 1990, Са^и/тг^і //.и др. 1990/. Другие сообщения, идентифицирующие 3 точ ковые мутации, две в 4-м и одну в 7-м экзоне гена муковисцидоза, - указывают на то, что они ассоциированы с "мягкой" клинической кар тиной / Я>.еа-//~ X* и др. 1990/.
P. V.'UittoLi's с сотр. 1991 наблюдали меконеальный у IW боль-
ных с PI и ни у одного из больных с PS. Они наблюдали меконеаль-ный илеус у больных с различными генотипами, но особенно высокая частота отмечена у больных с генотипом л F50S/G542X /50?»/.
Значительное количество мутаций в гене муковисцидоза неизбежно приводит к появлению выраженного клинического полиморфизма, затрудняющего прогнозирование тех или иных патологических признаков и характера течения болезни. Клинико-генетическая корреляция при различных типах мутаци'и в гене муковисцидоза недостаточно изучена в мировой практике. В нашей стране такие работы практически отсутствуют, что послужило поводом для изучения данного вопроса.
Следовательно, изучение особенностей клинического проявления муковисцидоза в зависимости от генотипа своевременно и актуально.
Цель работы; Изучить клинические особенности муковисцидоза 'в зависимости от генотипа.
Задачи исследования:
-
Изучить частоту мутации л F508 и других мутаций среди больных научно-клинического отдела муковисцидоза МГНЦ РАМН.
-
Изучить клинические особенности муковисцидоза у больных гомозигот по мутации д F 508.
-
Изучить клинические особенности муковисцидоза у больны* ком-паунд-гетерозигот по мутации л Р 500.
-
Изучить клинические особенности муковисцидоза у больных гомозигот по отсутствию мутации д F 508.
Научная новизна. Получены представления о соотношении больных с различными мутациями в гене муковисцидоза. Самой распространенной мутацией в CFTR у больных научно-клинического отдела муковисцидоза МГНЦ РАМН является делеция д F508 /5&Л/ и показано, что она является наиболее частой среди славянских хромосом /60%/. Впервые у нас в стране сделана попытка изучить клинические осо-
4 бенности муковисцидоза в зависимости от генотипа. Клинико-генети ческая корреляция была изучена у больных: гомозигот по мутации д F 508, компаунд-гетерозигот по мутации д F508 и гомозигот по о1 сутствию мутации д F 508. Установлено, что в случае наличия деле> ции д F508 в гомозиготном состоянии следует ожидать.более неблап риятный прогноз по сравнению с больными компаунд-гетерозиготами по данной мутации, а такле проведен анализ различных фенотипов, тлеющих другие, более редкие мутации в гене муковисцидоза.
Научно-практическая значимость работы. Полученные в работе , ние о частоте распространенной мутации д F508 и других мутаций в гене муковисцидоза среди больных научно-клинического отдела муко: цидоза МГНЦ РАЖ, дают возможность решать важные вопросы прената ной диагностики в семьях отягощенных по муковисцидозу, целесообр. пости массового скрининга на наличие носительства мутантного ген, подтверждение диагноза на молекулярном уровне. Подробное изучена особенностей муковисцидоза в зависимости от генотипа больного по волит более точно дифференцировать мутации в гене муковисцидоза і "тяжелые" и "мягкие", а следовательно для каждого больного конкр но, дать клинический прогноз и определить тактику лечения.
Результаты работы докладывались и обсуждались на Ш съезде п< диатров Таджикистана /Душанбе, 1988/, 1-й Республиканской кон([ер ции медицинских генетиков Таджикистана /Душанбе, 1989/, научно-п тической конференции педиатров Самарской области /Самара, І7/ХП-' на семинаре научно-клинического отдела муковисцидоза МГНЦ РАМН /Москва, 1992/, совместной научно-практической конференции научн клинического отдела муковисцидоза МГЩ РАМН и НИИ педиатрии РАЖ /Москва, апрель 1Э32/, сделано сообщение на XI Интернациональном - конгрессе по муковисцидозу в Ирландии /Дублин, 1932/, на научном семинаре Института клинической генетики и профилактики наследств ных заболеваний МГНЦ РА«1Н /Москва, 9/ІХ-92/.
Материалы диссертации могут быть использованы в пульмонологических центрах, стационарах, поликлиниках, медико-генетических консультациях и кабинетах, а также во вновь организованных региональных центрах по муковисцидозу.
Публикации. По теме диссертации опубликовано б научных работ.
Структура диссертации. Диссертация изложена на страницах