Введение к работе
,,^ , : ,!
Актуальность исследований. Физиологич.эское к клиническое значение медий<гйр?в и регуляторних пептидов чрезвычайно велико ( Ашмарин И.П., Каменская М.А., 1988; Замятин А.А., 1990 ). Многие формы патологий нервной системы сопровождаются изменениями естесстввнного баланса этих соединений ( Поздеев В.К., 1981 ). В связи о этим считается, что существует возможность коррекции состояния больных неврологическими заболеваниями с помощью биологически активных веществ эндогенного происхождения.
Одним из наиболее распространенных заболеваний нервной системы является эпилепсия, при развитии которой происходят изменения не только в электроэнцефалографической активности мозга, но и в даяіельности медиаторных систем ( эпилепсия может возникать при активации возбуждающих систем, при слабости и ингибировании тормозных систем и при снижении уровня обмена модулятора нейронной активности - таурина ) ( Поздаев В.К., 1981 ), а также в составе жидких сред организма ( Цветанова Е.М., IS86 ).
Для терапии эпилепсии используют препараты, способствующие повышению уровня сэротонина в крови и мозге пациентов ( Свиридова Е.И. и соавт., 1987 ). Этот подход к лечению эпилепсии основывается на представлении о серотонине как о тормозном медиаторе, способствующем подавлению эпи-припадков ( Свиридова Е.И. и соавт., 1987, Hi.ramatsu М. et. al., 1987 >, хотя по данным Yakel J.L. et. al. ( 1988 ) серотонин вызывает нэ только тормозные, но и возбудительные ответы в нейронах гиппокампа - одной из наиболее предрасположенных к эпилептической активности структур мезга ( Shen J.M. &-Kriegatein A.R., 1986 ). Рядом авторов показано, что дельта-сон-'-иядуцирунщий пептид обладает способностью подавлять эпилептиформные разряды ( Крыкановский Г.НІ и соавт., "^987; Адрианов О.С. и'^соавт., 1988; Доведова Е.Л., 1990; Шандра А.А.' и соавт., 1989). Крыжановским Г.Н. и Соавт. ( Г988 ) были описаны противосудорожные свойства дикворе язгеотных, перенесших эпилептический припадок, которые гав мнвни» авторов обусловлены аффектом эндогенных веществ. Вместе с тем клеточше механизмы указанных
явлений нэ изучены.
Внутриклеточными коррелятами этшптиформной активное являются парокоизмальные деяоляризационные сдвиги ( ЩО ), кот рые создагої в экспериментальных моделях эпилепсии, либо воздейс вием химических агентов ( пенициллин, пентилентетразол, оуОа и др. ), либо электрическим током (электрошок, алектросгимуляц в режиме раскачки ) ( Dichter М.А. and Ayala G.P., 1987 ). Раб тами ряда авторов йыла показано, что апалептиформную активное можно также вызвать устранением ионов магния из внеклеточно раствора ( Walter Н. et.al., 1986; Stanton Р.К., 1987; Mody et.al., 198Т ). Тест-системами в этих экспериментах служат только млекопитающие, но и беспозвоночные ( Эзрохи В.Л., 198 Altrup U. and Specimen E-J.f 1988 ). Доказано, что механиз действия копвульсантов на нейроны позвоночных и Оеспозвоночн аналогичны ( Ulbricht И. and Wagner Н-Н., 1976; Hermann А. а Gorman A.L.F., 1981 ).
Очевидную теоретическую и практическую зна-шмоегь приобр тает перспектива использования простых нервных систем для иссл дования клеточных механизмов действия биологически активных в ществ на эпилептиформную активность, в также для поиска и апроб ции эффективности препаратов, обладающих противосудорожннм дейс вием.
Цель исследования. - Целью данной работы явилось изучен влияния препаратов, обладающих антиэпилептическими свойствами, также ликвора больных различными неврологическими заболевания на нормвльную и судорожную активность нейронов виноградной улит Helix luoorum 1.
Задачи исследования. I. Выявить нейроны винограда улитки, реагирующие на удаление магния из физиологического рас вора развитием эпилептиформной активности. 2. Изучить влияв ликвора больных эпилепсией и шизофренией на нервные клетки вине радной улитки. 3. Сопоотавиц эффекты беэмагниевого раствора ликвора больных эпилепсией на идентифицированные нейроны вине радной улитки. 4. Охарактеризовать еффекты пептида дельта-сна серотонина на судорокную активность нейронов моллюска.
Научная новизна. В работе впервые использован npenaj
рвной системы виноградной улитки для создания модели эпилепти-рмной активности с помощью удаления ионов магния из внеклеточ-й среда. Впервые сопоставлено влияние ликгоров бо-льных эпилеп-ей и шизофренией на спонтанную и вызванную активность нервных еток виноградной улитки и на спонтанный синвптичэский приток ентифицироввнных нейронов этого моллюска. Впервые описано влия-е пептида дельта-сна на синаптическул передачу в нервной систе-моллюска и на судорожную активность, вызванную удалением ионов гния. Показано, что пептид дельта-сна в концентрации Ю-8 М еныпает чаототу и продолжительность парокоизмалыш деполяри-ционных сдвигов, вызванных аппликацией безмагниевого раствора, в концентрациях ІСГ7 - Ю-4 М полностью устраняет пвроксизмаль-е разряды в нейронах виноградной улитки. Обнаружено, что серо-нил подавляет эпилептиформную активность в клетках, которые рмозятся а растворе* Б-НТ и усиливает в нейронах, которые збуадаютсч под влиянием этого медиатора.
Научно-теоретическое и практическое значение работы, зультаты проведенной работы имеют как теоретическое, так и штическоэ значение. Они вносят определенный вклад в понимание хвнизмов противосудорокного действия пептида дельта-сна и в нэ-іторнх случаях - серотошша, раскрывают клэтлчные механизмы ияния ликвора больных эгалепсией и шизофренией. Полученные Даніє позволяют применять использованную экспериментальную модель в ічвстве тест системы для изучения механизмов действия и апроба-и эффективности противосудорожных препаратов, как применяемых в істоящее время в клинике, так и вновь синтезируемых.
Внедрение результатов исследования. Материалы диссертации іпользоваїш в .отчете по теме Р0СТН-І9 и в курсе практических інятий студентов кафедры физиологии человека и учвотяых
'У?
Апробация работы. материалы Диссертации доложены и обсук-ны на конференции молодых ученых РТУ в 1988 г.; на Всесоюзной інференции " Простые нервннч системы " (Казань, 1Э88 ), на 2-й :всоюзной конференции по нейронаукам ( Киев, 1988 ), на коь^-інщш по нейрокибернетике ( Ростов-на-Донт, 1989), конференции їлоднх ученых ( Ставрополі, І9Є9 ), на 28 совещании по ВНД ( Ле-
нинград, 1989.), на региональной конференции международного общества нейроСиологии беспозвоночных " Простые нервные системы. ' ( Минск, 1991 ). По матэриалам диссертации' опубликовано 1С научных работ. Апробация диссертации состоялась на заседании кафедры физиологии человека и животных РТУ ( Ростов-на-Дону, 1930 ; Обьеы и структура диссертации. Диссертационная работа содержит 155 страниц машинописного текста? включая 27 рисунков, I таблицы. Диссертация состоит из введения, обзора литературы, методики исследований, Б глав собственных результатов, обсувдения, заключения и выводов. Список литературы включает 80 отечественных и 183 иностранные работы.