Содержание к диссертации
Введение
ГЛАВА I. Изменения микроциркуляции при стрессе и их коррекция электромагнитными волнами терагерцового диапазона частот (обзор литературы) 19
1.1. Изменение микроциркуляции в ходе стрессорной реакции 19
1.2. Электромагнитное излучение терагерцового диапазона частот в коррекции микроциркуляторных нарушений 35
1.2.1. Особенности электромагнитного излучения крайне высокочастотного и терагерцового диапазонов 35
1.2.2. Влияние электромагнитного излучения терагерцового диапазона на экспериментально вызванные нарушения внутрисосудистого компонента микроциркулягщи 40
1.2.3. Влияние электромагнитного излучения терагерцового диапазона на экспериментально вызванные изменения сосудистого тонуса 46
1.2.4. Клинические исследования влияния электромагнитного излучения терагерцового диапазона на течение различных патологических процессов 48
ГЛАВА II. Материалы и методы исследований 51
2.1. Объекты исследования 51
2.2. Методы исследования 55
2.2.1. Приготовление гистологических препаратов 55
2.2.2. Исследование концентрации эндотел ина 1 56
2.3. Статистическая обработка материала 58
ГЛАВА III. Влияние электромагнитного облучения терагерцового диапазна на частотах молекулярного спектра излучения и поглощения оксида азота 150,176-150,664 ГГЦ на микроциркуляцию в различных органах у белых крыс в состоянии острого иммобилизационного стресса 59
3.1 Изменения микроциркуляции в различных органах у белых крыс в состоянии острого иммобилизационного стресса 59
3.1.1. . Изменения микроциркуляции в головном мозге у животных в состоянии острого иммобилизационного стресса 59
3.1.2. Изменения микроциркуляции в висцеральных органах у животных в состоянии острого иммобилизационного стресса ...60
3.2 Изменения микроциркуляции в различных органах у белых крыс в состоянии острого иммобилизационного стресса под влиянием электромагнитного облучения терагерцового диапазона на частотах молекулярного спектра излучения и поглощения оксида азота 150,176-150,664 ГГц 68
3.2.1. Изменения микроциркуляции в головном мозге у животных при остром иммобилизационном стрессе под влиянием электромагнитного облучения терагерцового диапазона на частотах молекулярного спектра излучения и поглощения оксида азота 150,176-150,664 ГГц 68
3.2.2. Изменения микроциркуляции в висцеральных органах у животных в состоянии острого иммобилизационного стресса под влиянием электромагнитного облучения терагерцового диапазона на частотах молекулярного спектра излучения и поглощения оксида азота 150,176-150,664 ГГц 69
Резюме ...77
ГЛАВА IV. Влияние электромагнитного облучения терагерцового диапазона на частотах молекулярного спектра излучения и поглощения оксида азота 150,176-150,664 Ггц на микроциркуляцию в различных органах у белых крыс в состоянии длительного иммобилизационного стресса 78
4.1 Морфофункциональные изменения микроциркуляции в различных органах у белых крыс в состоянии длительного иммобилизационного стресса 78
4.1.1. Изменения микроциркуляции в головном мозге животных в состоянии длительного иммобилизационного стресса 78
4.1.2. Изменения микроциркуляции в висцеральных органах у животных в состоянии длительного иммобилизационного стресса 81
4.2 Морфофункциональные изменения микроциркуляции в различных органах у белых крыс в состоянии длительного иммобилизационного стресса под влиянием электромагнитного облучения терагерцового диапазона на частотах молекулярного спектра излучения и поглощения оксида азота 150,176-150,664 ГГц 89
4.2.1. Изменения микроциркуляции в головном мозге у животных в состоянии длительного иммобилизационного стресса под влиянием электромагнитного облучения терагерцового диапазона на частотах молекулярного спектра излучения и поглощения оксида азота 150,176-150,664ГГц 89
4.2.2. Изменения микроциркуляции в висцеральных органах у животных в состоянии длительного иммобилизационного стресса под влиянием электромагнитного облучения терагерцового диапазона на частотах молекулярного спектра излучения и поглощения оксида азота 150,176-150,664 ГГц,, 92
Резюме 96
ГЛАВА V. Влияние терагерцовых волн на частотах молекулярного спектра оксида азота 150,176-150,664 Ггц на функциональную активность эндотелия у крыс-самцов, находящихся в состоянии острого и длительного стресса 98
5.1. Изменение концентрации эндотелина І в сыворотке крови животных, находящихся в состоянии острого стресса, под влиянием электромагнитного облучения терагерцового диапазона на частотах молекулярного спектра излучения и поглощения оксида азота 150,176-150,664 ГГц 99
5.2. Роль оксида азота в регуляции.электромагнитными волнами терагерцового диапазона частотами 150,176-150,664 ГГц изменения концентрации эндотелина І в сыворотке крови животных, находящихся в состоянии острого стресса 102
5.3. Изменение концентрации эндотелина І в сыворотке крови животных, находящихся в состоянии длительного стресса, под влиянием электромагнитного облучения терагерцового диапазона на частотах молекулярного спектра излучения и поглощения оксида
азота 150,176-150,664 ГГц 104
Резюме 106
ГЛАВА VI Влияние электромагнитного облучения терагерцового диапазона на частотах молекулярного спектра излучения и поглощения оксида азота 150,176-150,664 Ггц на состояние эндокринных желез у белых крыс при остром и длительном иммобилизационном стрессе 107
Резюме 117
Заключение 118
Выводы 141
Практические рекомендации 143
Литература 144
- Особенности электромагнитного излучения крайне высокочастотного и терагерцового диапазонов
- Изменения микроциркуляции в висцеральных органах у животных в состоянии острого иммобилизационного стресса
- Изменения микроциркуляции в головном мозге животных в состоянии длительного иммобилизационного стресса
- Изменение концентрации эндотелина І в сыворотке крови животных, находящихся в состоянии острого стресса, под влиянием электромагнитного облучения терагерцового диапазона на частотах молекулярного спектра излучения и поглощения оксида азота 150,176-150,664 ГГц
Введение к работе
Стресс представляет собой неспецифический компонент физиологических и патологических нейрогум оральных реакций, возникающих в организме под действием любых условий, угрожающих нарушением гомеостаза [Селье, 1960, с. 15; Типовые реакции ... , 2002, с. 18 -37]. Стрессорная реакция развивается в ответ на действие необычных по качеству, интенсивности или продолжительности раздражителей за счет активации двух ведущих стресс-реализующих систем: гипоталамо-симпато-адреналовой и гипоталамо-гипофизарно-надпочечниковой [Меерсон, 1981, с. 120-137; Барабой, 1991, с. 923 - 931]. Стресс-реакция имеет большое значение в адаптации организма человека и животных к изменяющимся условиям окружающей среды. Однако интенсивные и длительно действующие стрессоры приводят к развитию нарушений, способствующих возникновению ряда заболеваний. В основе неблагоприятных последствий стресса лежит дисбаланс в деятельности стресс-реализующих, обусловливающих реакцию организма на действующий стрессор, и стресс-лимитирующих систем, которые способны ограничивать повреждающее действие гормонов и метаболитов, выделяющихся в ходе стресс-реакции [Малышев, Манухина, 1998, с. 992 - 1006; Манухина, Малышев, 2000; с. 1283 - 1292].
В последнее время проблема стресса, адаптации и профилактики стрессорных повреждений выдвинулась в число наиболее актуальных проблем современной биологии и медицины [Stepol, 1993, р. 76 - 77]. Интерес к этой проблеме вызван резкими изменениями условий жизни человека, обусловленными интенсификацией производственных процессов, урбанизацией, а также ростом так называемых "болезней адаптации" [Аршавский, 1976, с. 144-191; Меерсон, 1981 с. 120-137; Ziegler, 1994, р. 312 — 315.].
Особое значение среди болезней адаптации имеют заболевания сердечно-сосудистой системы, включающие целый ряд нозологических форм, среди которых наиболее серьезными являются гипер і оническая и ишемическая болезни (их доля составляет 30-35%), и такие их проявления как острый инфаркт миокарда и стенокардия. Заболевания сердечнососудистой системы лидируют среди причин инвалидности и смертности в России [Оганов, Масленикова, 2000, с. 4 - 8].
Ведущую роль в патогенезе заболеваний сердечно-сосудистой системы играет нарушение микроциркуляции [Чернух, Александров, Алексеев, 1984, с. 4-7; Stokes, Granger, 2004, p. 647 - 653].
Микроциркуляторное русло в конечном итоге реализует і ранспортную функцию сердечно-сосудистой системы и обеспечивается транскапилярный обмен, создающий необходимый для жизни тканевой гомеостаз, и именно поэтому микроциркуляторные расстройства часто становятся неотъемлемым звеном патогенеза широчайшего круга заболеваний различных органов и систем [Чернух, Александров, Алексеев, 1984, с. 14-17].
Изменения регионарного, в частности, коронарного, мозгового, почечного кровотока и системной гемодинамики, в том числе недостаточность кровообращения, связаны, прежде всего, с нарушениями микроциркуляции [Чернух, Александров, Алексеев, 1984, с. 14-17; Stokes, Granger, 2004, p. 647 - 653].
Для коррекции различных компонентов микроциркуляторных нарушений используют широкий спектр препаратов: вазодилататоров, антиагрегантов, дезагрегантов, прямых и непрямых антикоагулянтов, антиоксидантов и ряд других фармакологических групп. Кроме того, в ряде случаев требуется назначение длительной терапии с целью первичной и вторичной профилактики микроциркуляторных нарушений. Однако фармакотерапия всегда сопровождается возникновением различной степени выраженности побочных эффектов. В связи с этим в настоящее время ведутся поиски новых немедикаментозных методов коррекции указанных нарушений. Одним их таких методов является низкоинтенсивное излучение миллиметрового и субмиллиметрового диапазона частот [Киричук,
Головачёва, Чиж, 1999, с. 6 - 7; Электромагнитное излучение ... , 2000, с. 18-25, Паршина, 2006, с. 3 -5] .
Терагерцовый диапазон частот лежит на границе между электроникой и фотоникой от 100 ГГц до 10 ТГц (1 ТГц = 103 ГГц) или в длинах волн от 3 мм до 30 р,м. [Гершензон, Малов, Мансуров, 2000, с. 145-146]. Установлено, что рассматриваемый диапазон электромагнитных волн используется живыми организмами для связи и управления, при этом сами живые организмы излучают колебания миллиметрового диапазона [Информационные взаимодействия ... , 2001, с.1042-1050; Гемореология и электромагнитное ... , 2004, с 12-15]. Волны, возбуждаемые в организме при воздействии на него ТГЧ-облучения, в известной мере имитируют сигналы внутренней связи и управления (информационные связи) биологических объектов. В результате восстанавливается нормальное по спектру и мощности излучение, свойственное здоровому организму [Информационные взаимодействия ... , 2001, с.1042-1050; КВЧ - индуцированное взаимодействие ..., 2004, с. 34-39]. Таким-образом, представленный диапазон частот качественно не изменяет организм, но может отрегулировать, нормализовать его функциональное состояние в пределах, присущих данному биологическому виду [Бецкий, Девятков, Кислов, 1998, с. 13-29; Конако, Фэйтс, 2002, с. 24-27].
Есть мнение, что реакционная способность молекул, возбужденных терагерцовым квантом, будет на порядок выше, чем при возбуждении КВЧ-квантом [Биофизические эффекты ... , 2003, с. 3-6]. К особенностям терагерцовых волн (ТГВ) относится также и то, что ТГЧ-излучение свободно проникает сквозь одежду и кожу до мышц человека [Конако, Фэйтс, 2002, с. 24-27].
С другой стороны, терагерцовый диапазон частот все больше обращает на себя внимание, поскольку в этом диапазоне в основном сосредоточены частотные спектры излучения и поглощения важнейших активных клеточных метаболитов (NO, СЬ СОг, СО, ОН- и др.) [Панарамно-спектрометрический комплекс ..., 2001, с. 35-37; Молекулярные HITRAN-спектры ... , 2007, с. 5 -9; The HITRAN molecular ... , 2003, p. 5 - 44]. Биофизические эффекты волн терагерцового диапазона дают основания и открывают перспективы развития новых направлений в биомедицинской технологии: «терагерцовая терапия» и «терагерцовая диагностика» [Биофизические эффекты ... , 2003, с. 3-6].
Совершенно закономерно, что наибольший интерес вызывают электромагнитные волны молекулярного спектра излучения и поглощения оксида азота. Оксид азота является одним из важнейших биологических медиаторов, вовлеченный во множество физиологических и патофизиологических процессов. Он представляет собой уникальный по своей природе и механизмам действия вторичный мессенджер в большинстве клеток организма. В частности, оксид азота участвует в реализации многих важных физиологических функций, таких как вазодилатация, бронходилатация, нейротрансмиссия, агрегация тромбоцитов, реакции иммунной системы, регуляция тонуса гладких мышц, состояние памяти, является важным регулятором почечной гемодинамики и гломерулярной фильтрации, а также некоторых патологических процессов [Голиков, 2004, с. 9-15; Киричук, Андронов, Иванов, Мамонтова, 2008, с. 83 - 91; Ignarro, Buga, Wood, 1987, p. 160 - 170; Lowenstein, 1994, p. 227-237; Snyder, Bredt, 1995, p. 125 - 128; Lloyd-Jones, 1996, p. 365-375; Hart, 1999, p. 1407-1417; Michel J.B., 1999, p. 5-7; Nitric oxide ..., 2000, p. 11609-11613; Battinelli E., Loscalzo, 2000, p. 3451-3459; Davis, Cai, Drummond, Harrison, 2001, p. 25-30; Davis, Cai, Drummond, 2003, p. 1449-1453; Murad, 2003, p. 299-307; Regulation of nitric ... , 2003, p. 12504-12509; Nitric oxide suppresses ... , 2007, p. 61-67; Effect of effective ..., 2007, p. 66 - 69].
Регуляторное действие оксида азота во всех этих системах реализуется генерацией его из гуанидинового атома азота L-аргинина семейством уникальных цитохром-Р-450-подобных гемопротеидов-NOS, которые присоединяют молекулярный кислород к конечному атому азота в гуанидиновой группе L-аргинина [Ignarro, 1990, р. 535 - 560; Clement, Shultze-Mosgau, Wohlers, 1994, p. 7; Interaction of the endothelial ... , 2005, p. 567-574].
Исследование и разработка методов регулирования секреции, поддержания уровня физиологической концентрации и реакционной способности эндогенного оксида азота в клетках, органах и в организме в целом представляет несомненный научный и практический интерес для теоретической и клинической медицины. В связи с этим, в настоящее время постоянно ведутся интенсивные поиски методов по созданию фармакологических препаратов, регулирующих секрецию и функциональную активность молекул оксида азота в клетках, органах и в организме в целом.
Проведенные в 2000-2002 г.г. эксперименты по исследованию влияния ЭМИ ММД-NO в условиях in vitro показали, что данный вид излучения оказывает ингибирующее воздействие на функциональную активность тромбоцитов у больных нестабильной стенокардией [Информационное взаимодействие ... , 2000, с. 91-93; Информационные взаимодействия ... , 2001, с. 1042-1050; Тромбоциты в реакциях ... , 2002]. Вместе с тем при изучении влияния ЭМИ КВЧ-NO на реологические параметры крови больных стабильной стенокардией в условиях in vitro было обнаружено статистически достоверное повышение вязкости цельной крови [Гемореология и электромагнитное ..., 2003, с. 25 - 103].
Экспериментальные исследования показали, что на модели нарушений коагуляционных свойств крови при иммобилизационном стрессе под влиянием ТГЧ - электромагнитного излучения на частотах молекулярного спектра оксида азота 150,176-150,664 ГГц наблюдается восстановление основных показателей коагуляционного звена гемостаза [Гемокоагуляция и электромагнитное ..., 2004, с. 28 — 34].
А.Н. Ивановым [Иванов, 2006, 51-57] установлено, что в условиях эксперимента in vivo воздействие ТГЧ-излучения на частотах оксида азота 150,176-150,664 ГГц на животных, находящихся в состоянии острого иммобилизационного стресса, вызывает восстановление нарушенной функциональной активности тромбоцитов, что проявляется в уменьшении максимального размера тромбоцитарных агрегатов, максимальной скорости образования наибольших тромбоцитарных агрегатов, максимальной степени и скорости агрегации.
Кроме того, доказано, что ТГЧ-облучение на частотах МСИП оксида азота 150,176 - 150,664 ГГц обладает выраженным восстанавливающим влиянием на нарушенные реологические свойства крови у белых крыс в состоянии острого иммобилизационного стресса. Также отмечено, что ТГЧ-облучение на указанных частотах способно восстанавливать нарушения качественного и количественного состава эритроцитов, вызванные иммобилизацией [Антистрессорное действие ... , 2004, с. 12-20; Влияние электромагнитного ... , 2004, с. 21-27].
Однако в доступной литературе представлены только исследования влияния ТГЧ-излучения на частотах оксида азота 150,176-150,664 ГГц на отдельные функциональные показатели различных составляющих микроциркуляции, в частности ее внутрисосудистого компонента: функциональную ативность тромбоцитов, реологию крови, гем о коагуляцию. Однако нет комплексных сведений о морфофункциональных изменениях в системе микроциркуляторного русла под влиянием волн терагерцового диапазона на частотах молекулярного спектра излучения и поглощения оксида азота 150,176-150,664 ГГц, и их роли в гистофизиологии тканей. Это и послужило целью настоящего исследования.
ЦЕЛЬ ИССЛЕДОВАНИЯ Установить влияние электромагнитного облучения терагерцового диапазона частотой молекулярного спектра излучения и поглощения оксида азота 150,176 - 150,664 ГГц на морфофункциональные нарушения микроциркуляции в различных органах белых крыс, находящихся в состоянии острого и длительного стресса; роль оксида азота и эндокринных желез в реализации эффектов электромагнитных волн данного диапазона.
ЗАДАЧИ ИССЛЕДОВАНИЯ
Установить морфологические изменения микроциркуляции в различных органах белых крыс, находящихся в состоянии острого иммобилизационного стресса.
Изучить влияние электромагнитного облучения і ерагерцового диапазона на частотах молекулярного спектра излучения и поглощения оксида азота 150,176 - 150,664 ГГц на морфологические изменения микроциркуляции в различных органах белых крыс на фоне острого иммобилизационного стресса.
Исследовать морфологические изменения микроциркуляции в различных органах белых крыс, находящихся в состоянии длительного иммобилизационного стресса.
Выявить влияние курсового воздействия электромагнитного облучения терагерцового диапазона на частотах молекулярного спектра излучения и поглощения оксида азота 150,176 — 150,664 ГГц на морфологические нарушения микроцируляции в различных органах белых крыс, находящихся в состоянии длительного иммобилизационного стресса.
Определить изменение концентрации в сыворотке крови маркера эндотелиальной дисфункции - эндотелина І у животных, находящихся в состоянии острого и длительного иммобилизационного стресса. Изучить влияние электромагнитного облучения терагерцового диапазона на частотах молекулярного спектра излучения и поглощения оксида азота 150,176 — 150,664 ГГц на концентрацию эндотелина І в сыворотке крови белых крыс, находящихся в состоянии острого и длительного иммобилизационного стресса.
Установить роль оксида азота в реализации эффектов волн терагерцового диапазона на частотах молекулярного спектра излучения и поглощения оксида азота 150,176 - 150,664 ГГц на функциональное состояние эндотелия сосудов.
Определить значение желез внутренней секреции в опосредовании нормализующих эффектов электромагнитных волн терагерцового диапазона на частотах 150,176 - 150,664 ГГц на микроциркуляцию у животных в состоянии острого и длительного стресса.
ПОЛОЖЕНИЯ, ВЫНОСИМЫЕ НА ЗАЩИТУ
При остром иммобилизационном стрессе у животных возникают нарушения внутрисосудистого, сосудистого и внесосудистого компонентов микроциркуляции, которые проявляются развитием сладжирования крови, фибриноидным набуханием стенок сосудов, отеками.
Терагерцовые волны на частотах МСИП оксида азота 150,176 - 150,664 ГГц частично восстанавливают нарушения микроциркуляции, характерные для острого иммобилизационного стресса.
При длительном иммобилизационном стрессе у белых крыс-самцов отмечается значительное изменение микроциркуляции во всех органах и тканях, сопровождающееся сепарацией крови и тромбообразованием, фибриноидным набуханием сосудов, кровоизлияниями и отеками.
Курсовое воздействие ЭМИ ТГЧ диапазона на частотах МСИП оксида азота 150,176 - 150,664 ГГц на животных, находящихся в состоянии длительного иммобилизационного стресса, частично восстанавливает внутрисосудистые, сосудистые и внесосудистые нарушения микроциркуляции: отсутствуют признаки сладжа, восстанавливается нормальное кровенаполнение органов, уменьшаются отеки.
В состоянии острого и длительного стресса происходит увеличение концентрации эндотелина І в сыворотке крови крыс-самцов. При длительном стрессе происходит более выраженное увеличение концентрации эндотелина І в сыворотке крови, что свидетельствует о развитии эндотелиальной дисфункции. У белых крыс-самцов, находящихся в состоянии острого иммобилизационного стресса, ЭМИ ТГЧ диапазона на частотах МСИП оксида азота 150,176 — 150,664 ГГц вызывает тенденцию к снижению в сыворотке крови концентрации эндотелина I. Ежедневное ТГЧ-облучение животных в течение 5 дней после каждого сеанса иммобилизации вызывает статистически достоверное снижение концентрации эндотелина І в сыворотке крови.
Ингибитор продукции оксида азота L-NAME обусловливает повышение концентрации эндотелина І в плазме крови. Терагерцовое облучение на частотах молекулярного спектра излучения и поглощения оксида азота 150,176 - 150,664 ГГц снижает концентрацию эндотелина I при участии системы генерации оксида азота.
В реализации нормализующих эффектов электромагнитных волн терагерцового диапазона на частотах 150,176 - 150,664 ГГц на микроциркуляцию у животных в состоянии острого и длительного стресса большое значение принадлежит изменениям морфофункционального состояния желез внутренней секреции.
НАУЧНАЯ НОВИЗНА
Впервые изучено влияние электромагнитного излучения терагерцового диапазона на частотах молекулярного спектра излучения и поглощения оксида азота 150,176 - 150,664 ГГц на морфофункциональные нарушения микроциркуляции в различных органах у белых крыс, находящихся в состоянии острого и длительного стресса.
Обнаружено, что ТГЧ-облучение способно восстанавливать характерные для острого и длительного иммобилизационного стресса нарушения микроциркуляции. Это проявляется частичной нормализацией ее внутрисосудистого — отсутствие признаков сладж-синдрома, уменьшение явлений стаза, сосудистого - нормализация проницаемости и снижение ломкости капилляров и внесосудистого компонентов — уменьшение выраженности отеков. Выявлено, что при действии излучения указанной частоты у животных в состоянии острого иммобилизационного стресса отмечаются значительное уменьшение явлений ишемии многих внутренних органов (печени, почек, легких), а также нормализация кровотока в головном мозге.
ЭМИ ТГЧ диапазона на частотах МСИП оксида азота 150,176 -150,664 ГГц вызывает тенденцию к снижению повышенной концентрации эндотелина I в сыворотке крови у белых крыс-самцов, находящихся в состоянии острого иммобилизационного стресса. Ежедневное ТГЧ-облучение в течение 5 дней после каждого сеанса иммобилизации вызывает статистически достоверное снижение повышенной концентрации эндотелина I в сыворотке крови у крыс-самцов, находящихся в состоянии длительного стресса. Реализация эффекта ТГЧ-волн терагерцового диапазона на частотах молекулярного спектра излучения и поглощения оксида азота 150,176 -150,664 ГГц на концентрацию эндотелина I осуществляется при участии системы оксида зота: блокада стресс-лимитирующей системы оксида азота способствует выработке эндотелина I.
Нормализующие эффекты электромагнитного облучения терагерцового диапазона на частотах молекулярного спектра излучения и поглощения оксида азота 150,176 - 150,664 ГГц на микроциркуляцию у животных в состоянии острого и длительного иммобилизационного стресса реализуются посредством изменения активности гипофиза, надпочечников и щитовидной железы. ТГЧ-воздействие на указанных частотах умеренно снижает повышенную активность гипофизарно-надпочечниковой и тиреоидной осей стрессорной реакции, что проявляется отсутствием или уменьшением выраженности характерных для острой и длительной стресс-реакции морфологических изменений в гипофизе, надпочечниках и щитовидной железе.
ПРАКТИЧЕСКАЯ ЗНАЧИМОСТЬ
Получены новые данные о характере воздействия электромагнитного излучения терагерцового диапазона на частотах молекулярного спектра оксида азота 150,176 - 150,664 ГГц на морфофункциональные нарушения микроциркуляции в различных органах белых крыс, находящихся в состоянии острого и длительного стресса. Проведенные исследования позволили выявить ряд положительных эффектов данного облучения на клеточном, тканевом и системном уровнях.
Обнаруженный у белых крыс-самцов, находящихся в состоянии острого и длительного иммобилизационного стресса, ангиопротекториый эффект электромагнитного излучения терагерцового диапазона на частотах МСИП оксида азота 150,176 — 150,664 ГГц может быть использован в клинической практике у больных с эндотелиальной дисфункцией, расстройствами микроциркуляции.
Работа является фрагментом отраслевой научно — исследовательской программы № 9 «Этиопатогенез, диагностика и лечение заболеваний крови» на тему: «Исследование влияния на сложные биологические системы электромагнитных колебаний на частотах молекулярных спектров излучения и поглощения веществ, участвующих в метаболических процессах» согласно договору № 005/037/002 от 25 сентября 2001 г. с МЗиСР РФ и программе РАМН «Научные медицинские исследования Поволжского региона» на 2008-2010 гг. «Изучение особенностей поведенческих реакций, характера изменений кровотока в магистральных сосудах, реологии крови, микроциркуляторного и коагуляционного механизмов гемостаза у биообъектов, находящихся в состоянии острого и хронического иммобилизационного стресса под влиянием радиоимпульсного излучения высокой мощности и различных частот (135-250) ГГц (ТГЧ)».
ВНЕДРЕНИЕ
Полученные результаты используются в процессе преподавания на кафедрах гистологии и нормальной физиологии ГОУ ВПО Саратовский ГМУ им. В.И. Разумовского Росздрава.
АПРОБАЦИЯ ДИССЕРТАЦИИ
Основные положения работы доложены на: 69 научно- практической конференции студентов и молодых ученых ГОУ ВПО Саратовский государственный медицинский университет Росздрава «Молодые ученые — здравоохранению региона» (Саратов 2008), VI Международной научно- практической конференции «Окружающая среда и здоровье (Пенза, 2009); VI съезде анатомов, гистологов и эмбриологов РФ (Саратов, 2009); всероссийской научно-практической конференции с международным участием, посвященной 85-летию со дня рождения доктора медицинских наук, профессора П.Ф. Степанова (Смоленск; 2009).
По материалам диссертации опубликовано 10 работ, в том числе 3 в журналах, рекомендованных ВАК Минобразования и науки РФ.
Особенности электромагнитного излучения крайне высокочастотного и терагерцового диапазонов
Среди множества факторов окружающей среды, вызывающих значимые изменения функционального состояния биологических систем различного уровня организации, особая роль принадлежит электромагнитным излучениям [Grundler, Kaiser, 1992, p. 551-559].
Естественные и искусственные источники электромагнитной энергии разного диапазона оказывают выраженное воздействия на живые организмы. Некоторые электромагнитные излучения (ЭМИ) хорошо известны и давно используются в промышленности, быту, клинической практике, например, инфракрасное, ультрафиолетовое, ультравысокочастотное, классическое крайневысокочастотное (КВЧ). Электромагнитные КВЧ колебания достаточно широко вошли в медицинскую практику и показали свою эффективность в лечении широкого круга заболеваний, оказывая нормализующее (восстанавливающее) действие на основные механизмы развития общепатологических процессов, лежащих в основе многочисленных заболеваний [Киричук, Головачева, Чиж, 1999, с. 311-320; Бецкий, Лебедева, 2001, с. 5-19].
Этот аспект их применения получил название КВЧ- терапии, которая, в частности, применяется в комплексном лечении заболеваний сердечнососудистой системы - острого инфаркта миокарда и нестабильной стенокардии [Головачева, 1991, с. 54-57; Паршина, 1994, с. 13-40; Семенова, 1994, с. 10-21; Киричук, Паршина, Головачева, 1997, с. 20-22]. Так, многочисленными исследованиями показано благоприятное влияние ЭМИ КВЧ на динамику показателей гемостаза и фибринолиза, что может играть важную роль в профилактике нарушений функционального состояния тромбоцитов и гиперкоагуляции у больных инфарктом миокарда [Семенова, 1994, с. 10-21], стенокардией [Паршина, 1994, с 14-20].
Экспериментальными и клиническими исследованиями доказано, что под влиянием ЭМИ КВЧ происходит нормализация процессов микроциркуляции, выражающаяся в уменьшении периваскулярных нарушений и неравномерности диаметра венул и артериол [Жуков, 1995, с. 129-130].
Выявлена эффективность КВЧ-воздействия на процессы репарации и регенерации [Каменев, 1999, с. 20-25]. Имеется информация о том, что воздействие ЭМИ КВЧ ослабляет или даже полностью купирует болевой синдром [Самосюк, Куликович, Тамарова З.С., 2000, с. 7-11]. КВЧ-терапия успешно применяется и в педиатрической практике: она оказалась эффективной при лечении заболеваний гастродуоденальной области, детского церебрального паралича, эпилепсии, нейродермита, диатеза [Латышева, 1997, с. 58-59]. КВЧ-терапия продемонстрировала свою выраженную эффективность в комплексном лечении широкого ряда перечисленных и других заболеваний. Изучение эффектов КВЧ-влияния на организм больного человека позволило выделить ряд характерных черт КВЧ-терапии [Киричук, Головачева, Чиж, 1999, с. 311-320]: подтвержденное практикой отсутствие побочных эффектов и отдаленных неблагоприятных результатов КВЧ - терапии; хорошая сочетаемость КВЧ-терапии с другими видами лечебного воздействия; высокая эффективность при использовании в качестве монотерапии; невысокая стоимость данного вида лечебного воздействия и удобство применения в условиях стационара; нормализация системы иммунитета; купирование болевого синдрома; нормализация всех звеньев системы гемостаза; стимуляция микроциркуляции; стимуляция репарации; седативное и антистрессорное действие и другие. Как видно, перечень болезней, при которых отмечается положительный терапевтический эффект при лечении ЭМИ КВЧ, довольно обширен [Родштат, 2007, с. 233-239; Родштат, 2008, с. 34-41]. При всем разнообразии их тщательный анализ позволяет выделить некоторое сходство в их этиологии. Этим сходством является наличие в анамнезе больных указаний на частые психические и физические перегрузки, эмоциональные напряжения, стрессы. Как известно, все эти факторы следует отнести к стрессорным, вызывающим в организме развитие общего адаптационного синдрома или стресс-реакции, что сопровождается развитием комплекса симптомов, в частности, гипертонии, гиперкоагуляции, гиперагрегации форменных элементов крови, гиперлипидемии, развитием возбуждения или, наоборот, депрессии, нарушением функции сердечно- сосудистой системы, иммунодефицитом [Пшенникова, 1991, с. 54-58; Родштат, 2005, с. 28-33; Родштат, 2007, с. 233-239; Родштат, 2008, с. 34-41]. Исследуя феномен паракоагуляции у больных с инсультным ДВС -синдромом на курсовое лечение миллиметровыми волнами низкой интенсивности было установлено, что при КВЧ - терапии происходит нормализация этого объективного показателя [Родштат, 2008, с. 34-41]. Биохимическая рецепция миллиметровых волн низкой интенсивности сопровождается выбросом в тканевую жидкость и микроцциркуляторное русло физиологически активных веществ (эндогенных лекарств), сенсорная рецепция на уровне целого организма сопровождается оптимизацией активности головного мозга за счет достижения адекватного соотношения между микроциркуляцией и метаболизмом в мозговой ткани [Родштат, 2008, с. 34-41]. За лечебными эффектами сочетанной КВЧ - терапии прежде всего стоит обратное развитие диссеминированного внутри сосудистого свертывания крови, являющегося неспецифическим патофизиологическим процессом [Родштат, 2008, с. 34-41]. Сравнительно недавно применяются в медицинской практике и вызывают большой интерес низкоинтенсивные излучения терагерцового диапазона частот [Первый опыт ... , 2004, с. 46-54; Комплексное лечение ... , 2004, с. 55-61]. Электромагнитное излучение терагерцового диапазона частот (ЭМИ ТГЧ) - это распространяющееся в пространстве, в средах и тканях электромагнитное поле сверхвысокой частоты.
Изменения микроциркуляции в висцеральных органах у животных в состоянии острого иммобилизационного стресса
Структура молекулярного ТГЧ-спектра ЭМИ на частотах МСИП оксида азота формируется этим генератором в соответствии с методами, предложенными и реализованными в квазиоптическом КВЧ генераторном комплексе моделирования детерминированных шумов для биофизических исследований, разработанным в ОАО ЦНИИИА [Биофизические эффекты ... , 2003, с. 3-6].
Облучалась поверхность кожи площадью 3 см" над областью мечевидного отростка грудины. Облучатель располагался на расстоянии 1,5 см над поверхностью тела животного. Мощность излучения генератора составляла 0,7 мВт, а плотность мощности, падающей на участок кожи размером 3 см2, составляла 0,2 мВт/см . Продолжительность однократного облучения составляла 30 минут. Доза облучения определялась плотностью мощности, падающей на кожу, и заданным временем облучения, и основывалась на эксперементальных данных об эффективности волн указанно и частоты в коррекции нарушенных функциональных показателей состояния внутрисосудистого компонента микроциркуляции [Электромагнитное излучение ..., 2007, с. 484 - 490; Влияние КВЧ-облучения ... , 2005, с. 64 -70].
Блокаду продукции оксида азота осуществляли неспецифическим ингибитором NO-синтазы L-NAME (фирма «Sigma», Швейцария) в дозе 4 мг/кг, введенным за 24 часа до начала эксперимента [Горрен А.К.Ф., Майер Б., 1998, с. 870 - 880]. Исследование морфофункциональных изменений в тканях проведено на 5 группах животных: I группа — контрольная (15 интактных крыс-самцов); II группа - 15 крыс-самцов, находящиеся в состоянии острого иммобилизационного стресса; III группа включала 15 животных, подвергнутых облучению терагерцовыми волнами на частотах молекулярного спектра излучения и поглощения оксида азота 150,176-150,664 ГГц в течение 30 минут на фоне острого стресса; IV группа - 15 крыс-самцов, находящиеся в состоянии длительного иммобилизационного стресса; V группа включала 15 животных, подвергнутых ежедневному 30-минутному облучению терагерцовыми волнами на частотах молекулярного спектра излучения и поглощения оксида азота 150,176-150,664 ГГц в течение 5 дней, на фоне длительного стресса (облучение животных проводили после каждого сеанса иммобилизации). Исследование концентации эндотелина І в сыворотке крови у крыс-самцов проведено на 8-й группах животных по 10 особей в каждой: I группа — контрольная, включала интактных животных; II группа - сравнительная, содержала крыс-самцов, находящихся в состоянии острого иммобилизационного стресса; III группа - опытная, включала животных, находящихся в состоянии острого иммобилизационного стресса, подвергнутых ТГЧ-облучению на частотах молекулярного спектра излучения и поглощения оксида азота 150,176-150,664 ГГц; IV группа включала крыс-самцов, которым был введен L-NAME; V группа - крысы-самцы, подвергнутые 3-х часовой иммобилизации на фоне введения L-NAME; VI группа - опытная, включала животных, находящихся в состоянии острого иммобилизационного стресса и подвергнутых ТГЧ-облучению на частотах молекулярного спектра излучения и поглощения оксида азота 150,176-150,664 ГГц на фоне введения L-NAME; VII группа - сравнительная, содержала животных, находящихся в состоянии длительного иммобилизационного стресса; VIII группа включала крыс-самцов, подвергнутых курсовому ТГЧ воздействию на фоне длительного иммобилизационного стресса. Материал для гистологического исследования забирался после декапитации животных. В остром стрессе животных декапитировали через 24 часа от начала действия стрессора, а при длительном стрессе - через 24 часа после 5-й иммобилизации (на 6-е сутки эксперимента). Для морфологического исследования образцы головного мозга, эндокринных желез и внутренних органов фиксировались в 10% - м растворе нейтрального формалина, подвергались стандартной спиртовой и ацетоновой проводке, после чего доводились до парафиновых блоков. Срезы толщиной 6-8 мкм окрашивались гематоксилином и эозином. Срезы надпочечников, изготовленные с помощью замораживающего микротома МЗ-2 («Точмедприбор», Россия), окрашивали Суданом III для выявления липидов. Для изучения агрегатного состояния крови и дезорганизации соединительной ткани в работе использовался гистохимический метод ОКГ (оранжевый Ж, красный 2С, водный голубой), предложенный Марциусом и адаптированный Д.Д. Зербино и Л.Л. Лукасевич [Зербило, Лукасевич, 1988, с. 15 — 16] к отечественным красителям. Морфометрический анализ препаратов осуществлялся с помощью системы цифрового анализа изображения ScopePhoto версии 2.0.4. Определялось процентное отношение сосудов с сепарацией крови к общему количеству сосудов данного типа в 10 полях зрения. Проводили определение внутреннего диаметра фолликулов и высоты интрафолликулярного эпителия щитовидной железы, а также соотношения между зонами коры надпочечников. Определение концентрации энотелина I проводили в сыворотке крови, полученной пункцией правых отделов сердца. Забор крови у животных в состоянии острого стресса и подвергнутых ТГЧ-облучению на фоне острого стресса производили сразу после окончания эксперимента. Забор крови у животных в состоянии длительного стресса производили на 6-е сутки после начала действия стрессора. Определение уровня эндотелина І в сыворотке крови у крыс проводили иммуноферментным методом с использованием набора Endotelin (1-21), фирмы «Biomedica» (Австрия). Реагенты, входящие в состав набора представлены в таблице 2. Приготовление реагентов проводили следующим образом: 1. STD (стандарты) растворяли в 0,5 мл дистиллированной воды и оставляли при комнатной температуре на 30 минут, тщательно перемешивая; 2. CTRL (контроли) растворяли в 0,5 мл дистиллированной воды и оставляли при комнатной температуре на 30 минут, после чего тщательно перемешивали; 3. WASHBUF (буфер для промывок) разводили концентрат буфера в соотношении 1:20 дистиллированной водой (50 мл концентрата и 950 мл дистиллированной воды).
Изменения микроциркуляции в головном мозге животных в состоянии длительного иммобилизационного стресса
У животных данной группы возникали единичные мелкоочаговые внутриальвеолярные кровоизлияния 20% случаев, а также инфильтрация лимфоцитами и макрофагами межальвеолярных перегородок (в 13,4 % случаев). Указанные изменения можно расценить как проявление реперфузии легких, поскольку у животных группы сравнения отмечалось малокровие. В отличие от группы животных, находящихся в состоянии острого иммобилизационного стресса и не подвергнутых ТГЧ-воздействию, сепарация крови в венах легких слабо выражена, отмечаются лишь единичные сосуды малого диаметра с явлениями сладжа (табл. 5).
Таким образом, в легких животных, подвергнутых ТГЧ-воздействию на фоне острого стресса, отмечается частичное восстановление кровенаполнения и микроциркуляции, положительное влияние на внутрисосудистыи компонент микроциркуляции, снижение проявлений сладжирования крови.
При исследовании гистологических препаратов печени животных, подвергнутых ТГЧ-воздействию на фоне острого стресса, отмечалось полнокровие (в 60% случаев) или неравномерное кровенаполнение сосудов портальных трактов и малокровие центральных вен (в 40% случаев).
При исследовании гистологических препаратов почек животных, подвергнутых ТГЧ-воздействию на фоне острого стресса, в отличие от животных, не подвергнутых ТГЧ воздействию, в 73,4 % выявлено умеренное кровенаполнение (Рис. 14), в 26,6% случаях — сниженное кровенаполнение артерий. Обнаружены единичные коллабированные клубочки в среднем 5% от общего числа клубочков. Сепарация крови отмечалась только в отдельных венах малого диаметра (3,4 % от общего количества вен). Таким образом, ТГЧ-облучение животных, находящихся в состоянии острого иммобилизационного стресса, способно коррегировать нарушения микроциркуляции в почках.
При исследовании гистологических препаратов желудка крыс-самцов, подвергнутых ТГЧ-облучению на фоне острого стресса, также, как и у животных, не подвергавшихся ТГЧ-воздействию, отмечалось малокровие артерий во всех оболочках стенки желудка. В собственной пластинке слизистой оболочки выявлена рассеянная лейкоцитарная инфильтрация (Рис. 15).
В брыжейке тонкого кишечника животных, подвергнутых ТГЧ-воздействию на фоне острого стресса, отмечается неравномерное кровенаполнение артерий, что свидетельствует о лишь частичном снятии ангиоспазма ТГЧ-волнами в сосудах желудочно-кишечного тракта.
Таким образом, ТГЧ-облучение нормализует кровенаполнение эндокринных желез, что отражает изменение сосудистого компонента микроциркуляции, и является одним из критерием снижения их активности. Под влиянием ТГЧ-облучения отмечается нормализация кровенаполнения многих висцеральных органов (печени, почек, легких), также происходит нормализация кровотока в головном мозге. Также следует отметить, что на фоне ТГЧ-воздействия нормализуется внутрисосудистый компонент микроциркуляции - у животных, подвергнутых ТГЧ-облучению на фоне острого стресса, препятствует сладжированию крови. Резюме
Полученные данные свидетельствуют о том, что у белых крыс-самцов, находящихся в состоянии острого стресса, происходит значительное нарушение микроциркуляции во всех органах и тканях. Нарушения внутрисосудистого компонента микроциркуляции морфологически проявляются в виде сладжирования и сепарации крови, сосудистого компонента - изменением тонуса сосудов, которое морфологически проявляется изменением кровенаполнения органов. Следует отметить, что во многих органах (печень, почки, желудок) наблюдаются явления ишемии, что в целом организме отражает явления централизации кровотока. Нарушения сосудистого компонента также проявляются увеличением проницаемости сосудов и грубыми нарушениями целостности микрососудов. Виесосудистые нарушения микроциркуляции, проявляющиеся отеками, еще больше усугубляют нарушения в других ее компонентах.
Установлено, что электромагнитное облучение терагерцового диапазона на частотах молекулярного спектра излучения и поглощения оксида азота 150,176-150,664 ГГц способно восстанавливать характерные для острого иммобилизационного стресса нарушения микроциркуляции. Прежде всего, отмечается значительное уменьшение явлений ишемии многих висцеральных органов (печени, почек, легких), нормализация кровотока в головном мозге. Вышеуказанные факты свидетельствуют в пользу значительного влияния электромагнитных волн указанной частоты на сосудистый компонент микроциркуляции, в частности, на тонус сосудов. Также следует отметить, что на фоне ТГЧ-воздействия нормализуется внутрисосудистый компонент микроциркуляции- у животных, подвергнутых ТГЧ-облучению на фоне острого стресса, не выражено сладжирование крови.
Изменение концентрации эндотелина І в сыворотке крови животных, находящихся в состоянии острого стресса, под влиянием электромагнитного облучения терагерцового диапазона на частотах молекулярного спектра излучения и поглощения оксида азота 150,176-150,664 ГГц
Ключевое значение в регуляции микроциркуляции принадлежит эндотелию сосудов [Киричук, Глыбочко, Пономарева, 2008, с. 12-15]. Повреждение эндотелия сосудов и обнажение субэндотелиальных слоев запускает реакции агрегации тромбоцитов, процесса свертывания крови, препятствующие кровопотере, вызывает спазм сосуда, прекращается образование антиагрегантов [Лупинская, 2003, с. 57-62; Киричук, Глыбочко, Пономарева, 2008, с. 12-15]. При кратковременном действии повреждающих агентов эндотелий продолжает выполнять защитную функцию, препятствуя кровопотере [Лупинская, 2003, с. 57-62]. При продолжительном повреждении эндотелий начинает играть ключевую роль в патогенезе ряда системных патологий [Киричук, Глыбочко, Пономарева, 2008, с. 12-15]. Это объясняется участием эндотелия в активации ренин-ангиотензиновой и симпатической стресс-реализующих систем, переключением активности эндотелия на синтез оксидантов, вазоконстрикторов, агрегантов и тромбогенных факторов [Гомазков, 2001, с. 50-58].
В настоящее время под дисфункцией эндотелия понимают дисбаланс между медиаторами, обеспечивающими в норме оптимальное течение всех эндотелийзависимых процессов [Киричук, Глыбочко, Пономарева, 2008, с. 30-35]. Важным прогностическим фактором, непосредственно связанным с функциональным состоянием эндотелия, являются эндотелиальпые пептиды - эндотелины, обладающие мощным вазоактивным действием. Самый изученный представитель этого класса - эндотелин-1 - полипептид с комбинацией 21 аминокислоты. В физиологических условиях эндотелины образуются в небольшом количестве. Реагируя с В-1-рецепторами, они расширяют сосуды. Однако поврежденный эндотелий синтезирует большое количество эндотелинов, вызывающих вазоконстрикцию [Killy, Baffigand, Smith, 1996, p. 363-380]. Большие дозы эндотелинов, введенные добровольцам [Killy, Baffigand, Smith, 1996, p. 363-380], приводят к значительным изменениям системной гемодинамики: снижению ЧСС и ударного объема сердца, увеличению сосудистого сопротивления. Эндотелин-I имеет большое значение в патогенезе ишемической болезни сердца, острого инфаркта миокарда, нарушений ритма сердца, легочной и системной гипертензии, атеросклеротических повреждениях сосудов, специфических сосудистых нарушений (рестеноз вследствие коронарной ангиопластики), постродовых сосудистых осложнениях, почечной патологии (васкулярном гломерулонефрите), ишемическом повреждении мозга (субарахноидальная геморрагия), сахарном диабете и др. [Лупинская, 2003, с. 57-62].
В связи с этим нами проводилось изучение влияния электромагнитного излучения терагерцового диапазона на частотах молекулярного спектра излучения и поглощения оксида азота 150,176 - 150,664 ГГц на концентрацию эндотелина І в сыворотке крови белых крыс-самцов в условиях острого и длительного стресса, а также механизмов регуляции его продукции.
Изменение концентрации эндотелина І в сыворотке крови животных, находящихся в состоянии острого стресса, под влиянием электромагнитного облучения терагерцового диапазона на частотах молекулярного спектра излучения и поглощения оксида азота 150,176-150,664 ГГц В результате проведенных исследований обнаружено, что у крыс-самцов, подвергнутых 3-х часовой иммобилизации, происходит статистически достоверное по сравнению с группой контроля увеличение концентрации (примерно в 1,5 раза) эндотелина І в сыворотке крови (табл. 7). Это может характеризовать как нормальную ангиоспастическую стрессорную реакцию, обеспечивающую подъем артериального давления и защиту от кровопотери, так и начальный этап повреждения эндотелия. Полученные данные коррелируют с картиной морфологических изменений в органах при остром иммобилизационном стрессе. В предыдущих главах показано, что при остром стрессе преобладает ишемия многих органов. Одним из механизмов реализации данного эффекта и является повышение концентрации в крови эндотелина I. Следовательно, в данном случае чрезмерное повышение продукции эндотелина I свидетельствует о нарушении нормальной функциональной активности эндотелия сосудов. Установлено, что облучение белых крыс-самцов, находящихся в состоянии острого иммобилизационного стресса, электромагнитными волнами терагерцового диапазона на частотах молекулярного спектра излучения и поглощения оксида азота вызывает тенденцию к снижению в сыворотке крови концентрации эндотелина I (табл. 7). Это свидетельствует в пользу частичного сохранения нормальных функциональных реакций эндотелия у крыс-самцов в состоянии острого стресса, так как доказано, что ТГЧ-облучение данной частоты способствует быстрому увеличению пониженной продукции оксида азога [Способ восстановления ... , 2009, URL: http://www.fips.ru] до нормальной концентрации, что, возможно, и поддерживает уровень эндотелина в крови. Подобная реакция может быть частью механизма саморегуляции вазадилатирующей активности оксида азота, так как известно, что его гиперпродукция в условиях in vitro способствует повышению количества и сродства рецепторов к эндотелину на гладкомышечных клетках сосудов крысы [Regulation of endothelin ..., 1996, p. 469-479]. Таким образом можно полагать, что ТГЧ-облучение на частотах молекулярного спектра излучения и поглощения оксида азота не блокирует протекание нормальной стрессорной реакции, а лишь модулирует ее, осуществляя нормализацию баланса вазодилатирющих и вазоконстрикторных агентов. Это согласуется с данными, которые представленны в главе III, и свидетельствуют о нормализации микроциркуляторных процессов в органах, и отражается на их морфологических изменениях. . Роль оксида азота в регуляции электромагнитными волнами терагерцового диапазона частотами 150,176-150,664 ГГц изменения концентрации эндотелина І в сыворотке крови животных, находящихся в состоянии острого стресса Для установления роли оксида азота в реализации эффекта ТГЧ-волн проводили блокаду NO-синтазной компоненты цикла оксида азота у интактных животных, а также животных подвергавшихся иммобилизации и ТГЧ-облучению на фоне иммобилизации, путем введения за сутки до забора крови неселективного блокатора NO-синтазы L-NAME [Горрен, Майер, 1998, с. 870-880]. В результате проведенных исследований установлено, что введение блокатора NO-синтазы L-NAME интактным животным вызывает статистически достоверное увеличение концентрации эндотелина І в сыворотке крови (табл. 8).
