Содержание к диссертации
Введение
1. Обзор литературы .8
1.1. Физиолого-биохимические аспекты становления репродуктивного цикла у коров .8
1.2 Методы стимуляции воспроизводительной функции 17
1.3 Регуляция обменных процессов при восстановлении воспроизводительной функции 27
1.4. Свойства пептидных биокорректоров 40
Заключение 47
2. Материал и методы исследований .47
3. Результаты исследований
3.1 Гормональные изменения 55
3.2 Содержание белков .56
3.3 Динамика азотсодержащих и липидных веществ в крови 60
3.4 Показатели активности ферментов 64
3.5 Динамика изменений гематологических показателей 68
3.6 Динамика показателей лейкограммы 70
3.7 Изменения показателей естественной резистентности 73
3.8 Гистоморфологические изменения 74
3.9 Эффективность стимуляции воспроизводительной функции и профилактика мастита у коров 85
4. Расчет экономической эффективности 89
5. Обсуждение полученных результатов 93
Выводы 115
Практические предложения 117
Список литературы
- Методы стимуляции воспроизводительной функции
- Свойства пептидных биокорректоров
- Динамика азотсодержащих и липидных веществ в крови
- Эффективность стимуляции воспроизводительной функции и профилактика мастита у коров
Методы стимуляции воспроизводительной функции
В течение всего репродуктивного цикла у молочных коров преобладает наличие полового гормона прогестерона (Падучева А.Л., 1974; Hunter A.,1977; Gortner R.,Haen E., 2001; Loose–Mitchell D.S., Stancel G.M., 2001; Lucy M.C., 1992, 2003; Hess B.W., Lake S.L., Scholljegerdes E.J. et al., 2005). Его концентрация в крови повышается уже с момента образования (через 3-4 сут) желтого тела в яичнике. Далее к 8-м сут полового цикла концентрация прогестерона возрастает до постоянного уровня. Содержание прогестерона в периферической крови в период охоты небольшое и составляет 0,1 – 0,8 нг/мл (Rajamahendran R., Walton J.S., 1988; Spicer L.J., Vernon R.K., Tuker W.B. et al., 1993,2006; Sakaguchi M., Sasamoto Y., Suzuki T. et al., 2004). Снижение концентрации гормона прогестерона наблюдается в течение нескольких дней перед его подъемом (Soroff J.R., 1984; Stanczyk F.Z. ,1996; Silvia W.J., 1999; Stewart P.M., 2003). Это свидетельствует о низкой функциональной активности желтого тела в переходный период. Установлено, что уровень прогестерона повышается в фазу желтого тела яичника до 5 нг/мл, достигая максимального значения в 6-7 нг/мл к завершению этой фазы. Исследователями отмечено также, что только в начальной стадии полового цикла появляющееся желтое тело яичника будет чувствительно к действию окситоцина, который приводит к его регрессии и будет нечувствительно к влиянию простагландина F2-. Было установлено, что концентрация прогестерона в периферической крови в фазу желтого тела влияет на оплодотворяемость в следующую охоту. Отмечено, что на эти показатели оказывает влияние также кормление и сезон года. Данные исследований показывают резкое падение уровня прогестерона в крови за 1-4 сут до начала охоты. Это падение начинается между 16 и 19 сутками цикла. Установлено, что у некоторых коров уровень прогестерона в крови снижается с 10 до менее 1 нг/мл в течение 6 часов, а у некоторых животных этот процесс длится до 2-х суток. Независимо от механизма рассасывания желтого тела к концу полового цикла концентрация гормона резко снижается в течение 2-х суток и сохраняется на том же уровне в период охоты до формирования нового желтого тела яичника во время овуляции. Исследования показали, что продолжительность периода от минимального уровня прогестерона до начала охоты может колебаться под влиянием нескольких факторов: упитанности, стресса, сезона года, возраста (Таов И.Х., 2004); лактации (Перфилов А. А., 2009; Баймишев Х.Б., 2010); уровня кормления (Пензева М.Н., 2006; Кижаев М.Ф., 2012) и содержания (Логинов P.O., 2007; Попов С.А., 2010). Отмечено и влияние породы (Паращенко И.В., 2003; Каюмов Ф.Г., 2005; Родина Н.Д., 2005; Костромицкий В.Н., 2009; Лумбунов С.Г., 2009; Крупин Е.О., 2010; Лободин К.А., 2010) на некоторые особенности протекания половой цикличности (Клинский Ю.Д., 2007). Изучение факторов, которые могут оказывать влияние на степень снижения уровня прогестерона в крови у нормальных коров, дает возможность объяснить их реакции на контроль охоты независимо от вида химических соединений (Fowden A.L., 1993). Быстрое рассасывание желтого тела – ключевое событие в половом цикле. Оно проявляется в резком уменьшении образования прогестерона. Главным действующим фактором является простагландин F2-, который в основном синтезируется в тканях матки. Поступление его из матки в яичник и желтое тело происходит местно непосредственно в тканях органов. Исследования показали, что простагландин выделяется пульсообразно в первые 2-3 дня. Рассасывание желтого тела происходит в течение 24-48 часов от начала увеличения выделения простагландина. Считают, что это происходит под влиянием эстрогенов яичников. Один раз начавшись, образование простагландина поддерживается эстрогенами и прогестероном (Lammoglia M.A., Willard S.T., Hallford D.M., Randel R.D., 1997; Сергеев П.В., 1999). Кроме того, когда концентрация прогестерона достигает основного уровня выделение простагландина прекращается.
Помимо этого, исследователии отметели, что иногда наблюдаемые и у коров аномалии в образовании и выделении простагландина могут повлечь за собой частичное возобновление функции желтого тела до тех пор, пока следующее выделение простагландина не вызовет его рассасывание. Процесс рассасывания желтого тела яичника может затянуться и продолжительность полового цикла увеличивается, что может быть причиной нарушения оплодотворяю 12
щей способности самки (Ratnayake R.T.G., Berghend B., Bertilsson J. et al., 1998; Parker K.L., Schimmer B.P., 2001; Reist M., Erdin D.K., von Euw D. et al., 2003). Замедление рассасывания желтого тела яичника после родов может происходить в течение нескольких месяцев. Такое явление может быть причиной недостаточной инволюции матки в послеродовом периоде и соответственно несвоевременного поступления простагландина F2- (Печкарев В.Н., 2000).
Содержание эстрогенов в периферической крови коров колеблется в среднем от 3,6 пг/мл в течение полового цикла, до 2,0 пг/мл в фазу желтого тела яичника. Фолликул яичника является главным источником синтеза эстрогенов, среди которых основное место занимает эстрадиол-17. По результатам исследований ряда авторов, секреция гормонов имеет три пика в течение полового цикла: на 3-7; 7-10 дни и перед овуляцией. Это обуславливается выделением ФСГ для созревания фолликула. Основное выделение эстрогенов происходит в последний день цикла и в первые часы охоты, совпадая по времени с предову-ляторным выбросом лютеинизирующего гормона. Уровень эстрогенов при этом достигает 7,4 пг/мл, потом он снижается наполовину за несколько часов, возвращаясь к исходному уровню в течение 4-х часов после начала охоты и к моменту овуляции. Увеличение выработки эстрогенов в конце полового цикла до максимума может продолжаться сутки у одних коров и до 4-х дней у других, в результате чего наступает состояние половой охоты (Дегай В. Ф., 2000; Еремин С.П., 2004 ).
Свойства пептидных биокорректоров
В пред варительно проведенных опытах на лабораторных животных было установлено, что тимозин, например, повышает иммунологическую реактивность и способ ствует устойчивой активизации сопротивляемости организма к неблагоприят ным факторам внешней и внутренней среды организма. В дальнейшем был вы делен пентапептидный фрагмент молекулы тимуса – тимопентин (Arg-Lys-Asp Valyr), обладающий хорошей биологической активностью. В дальнейшем из экстракта селезенки животных был произведен еще один пептидный иммуноре гулятор, состоящий также из пяти аминокислотных остатков – спленопентин, который отличался от тимопентина тем, что вместо остатка аргинина в нем присутствовал остаток глутаминовой кислоты (Arg-Lys-Glu-Valyr). Была от мечена разница и в их биологической роли по регуляции иммунных процессов в организме, а именно тимопентин индуцировал дифференцировку Т лимфоцитов, в то время как спленин – способствовал созреванию в основном В-лимфоцитов. В дальнейшем, при углубленных исследованиях данного направления, был осуществлен синтез тетрапептида (Arg-Lys-Asp-Val) и три пептида (Arg-Lys-Asp). Проведенная исследователями работа впоследствие по казала, что эти укороченные олигопептиды имели более выраженную иммуно модулирующую активность, чем тимопентин и тимозин. Исследования, прово димые в этой области, свидетельствуют о том, что биологическая активность большой молекулы, состоящей из многих десятков аминокислотных остатков, может быть воспроизведена искусственным путем в процессе сочетания корот ких пептидных последовательностей, протяженностью в 2-4 аминокислотных остатка. Такие короткие пептидные цепочки, которые обладают свойствами больших молекул тимического происхождения, были названы тимомиметика ми. Тимомиметики были впервые предложены в 1985 году и первоначально это название относилось к пуриновым иммуномодуляторам, которые содержали инозин и гипоксантин. Позже было установлено, что эти вещества влияли на процессы пролиферации и дифференцировки предшественников Т лимфоцитов, а также стимулировали клеточный и гуморальный иммунный от 44 вет. Исследованиями также было показано, что аналогичными свойствами по организации факторов клеточного и гуморального иммунитетов обладают пептидные соединения левамизол, изопринозин и 2-4-членные пептидные соединения.
Установлено, что в тимусе происходит дифференциация и созревание поступающих туда стволовых клеток костного мозга в субпопуляцию Т-лимфоцитов, которые обладают хелперной, супрессорной и киллерной активностью (Воронин И.И.. 2002). Из тимуса выделены пять биологически активных полипептидных соединений: тимозин; гомеостатический тимусный гормон; тимопоэтин 1; тимопоэтин 2 и тимусный гуморальный фактор. Установлено, что продуцируемые тимусом гормональные соединения влияют на скорость развития и созревания димфоидных клеток. Кроме того исследованиями установлено, выработка тимусом гормонов контролируется гипофизом и косвенное участие в этом принимают гормоны щитовидной железы, коры надпочечников и половые гормоны (Gortner R., 2001; Loose – Mitchell D.S., 2001; Hebel S.C., 2003).
Одним из первых тимометиков, имеющих короткую пептидную цепочку был дипептид тимоген (Glurp – глутаминовая кислота и триптофан). Это соединение содержится в различных биологических структурах организма (цито-кинах, сывороточных иммуноглобулинах и др.). Отмечено, что иммуномодули-рующие свойства дипептида тимогена осуществляются путем передачи, содержащейся в нем информации через ряд вторичных посредников, в том числе и имеющих также пептидную природу. Таким образом, у тимогена имеется достаточно широкий спектр биологического действия и область применения (Машковский М.Д., 1993). Применение 0,01% раствора тимогена в оптимальной дозе 2 мл (на одно животное в течение 3-х суток ежемесячно на протяжении всей беременности до родов), способствует стимуляции естественных факторов защиты организма, начиная с 25 - 30 суток после инъекции препарата, увеличивает количество белка в крови на 1,6 %, альбуминов - на 7,7 %, а 45 глобулинов - на 1,8 %, -глобулинов - на 0,8 %, -глобулинов - на 3,34 %, Т-лимфоцитов - на 4,6 %, В-лимфоцитов - на 1,1 % (Козлова В. А., 2002).
Доказано (Трутаев И.В., 2009), что тимоген, неоген, седатин на фоне низкой токсичности и относительно низкой органо-системной специфичности проявляют высокую защитную активность при изменяющихся условиях и неблагоприятных воздействиях внешней среды. Установлено, что препараты проявляют стресс-корректорное, лактопротекторное, антигипоксическое и антитоксическое действие, стимулируют гемопоэз, гуморальный и клеточный иммунитет при их угнетении, что связано с нормализацией процессов пероксида-ции липидов, активизацией антиоксидантной защиты, сохраняют гомеостаз глюкозы в экстремальных условиях.
Впервые, например, было обращено внимание и выяснено положительное влияние тимогена и элеутерококка на повышение функции размножения и резистентности нарождающегося молодняка опосредовано через иммунную систему стельных коров. Тимоген и элеутерококк оказывают положительное влияние не только на функцию организма коров-матерей, но и на внутриутробное развитие телят и повышение их общей резистентности в постнатальный период жизни (Козлова В.А., 2002).
Динамика азотсодержащих и липидных веществ в крови
Показатели общего клинического анализа крови характеризуют ее важные свойства, одним из которых является способность устойчивого поддержания гемостаза при постоянной динамической его изменчивости связанной с постоянным обеспечением и доставкой кислорода и питательных веществ к клеткам тканей, что в совокупности с другими процессами в организме способствует поддержанию его гомеостаза. (Конопатов Ю,В., 1997; Липунова Е.А., с со-авт., 2007).
В 1-й группе животных (Табл.17) отмечено постепенное снижение количества гемоглобина к 90-м сут (на 7,0%) при достоверных значениях его снижения (на 14,5%) на 45-е сут исследований. Отмечена так же тенденция снижения к концу исследований эритроцитов на 18,1% и лейкоцитов на 2,3%. СОЭ к 90-м сут наоборот, имела тенденцию повышения в 2,6 раза.
Во 2-й группе коров динамика изменений показателей была более эффективной. На 45-е сут количество гемоглобина достоверно повышалось на 4,3%, затем на 60-е сут отмечено еще достоверное повышение уже до нижней границы физиологически нормального значения - 96,3± 3,58г/л, р 0,01, эритроцитов – на 23,0%, лейкоцитов – 2,3%, СОЭ – достоверно повысилось к 60-м сут (на 20,0%, р 0,05) от первоначального уровня. У животных 3-й группы изменения в содержании гемоглобина носили переменный недостоверный характер изменений и к 90-м сут оставались равными первоначальному значению. Количество эритроцитов имело тенденцию снижения от первоначального уровня на 15,9%, а лейкоцитов наоборот
В 4-й группе коров снижение количества гемоглобина к 90-м сут составило 12,9%. Количество эритроцитов – без изменений, а лейкоцитов имело тенденцию повышения к этому времени на 31,5%. В СОЭ не было особых изменений.
У коров 5-й (контроль) группы отмечена тенденция кратковременного снижения количества гемоглобина в середине исследований и в дальнейшем повышения до исходного уровня. Количество эритроцитов не имело значимых изменений. Содержание лейкоцитов достоверно повысилось к 45-м сут (в 1,9 раза, р 0,001) и оставалось практически на этом уровне до 90-х сут. СОЭ имело тенденцию незначительного подъема к 45-60-м сут, но оставалось без особых изменений к концу исследований.
Полученные результаты изменений в показателях общего гематологического анализа показали, что наиболее выраженными были изменения во 2-й группе коров. Повышение от первоначального уровня на 4,6% содержания гемоглобина в крови (до 96,3± 3,58 г/л, р 0,01) и повышение СОЭ до 1,0 мм/ч, свидетельствует о стимулирующей обменные процессы и гомеостаз роли применяемых пептидных биокорректоров на 45-е сут после родов.
Содержание отдельных видов лейкоцитов в крови дает представление о морфофункциональных изменениях многих органов и систем организма, а также является информативным показателем его физиологического состояния в различные периоды репродуктивного цикла.
До начала исследований содержание отдельных видов лейкоцитов у коров не соответствовало нормальным физиологическим значениям. Отмечено пониженное содержание от нормы эозинофилов в 1-й, 2-й, 4-й группах, соответственно на: 26,7; 73,4; 53,4%, повышенное нейтрофилов палочкоядерных в группах 2, 3, и 4, соответственно: на 32,0%; в 2,2 раза; на 44,0%; моноцитов в 4-й группе на 42,8%. В 4-й группе содержание нейтрофилов сегментоядерных было ниже нормы в 2 раза.
У коров 1-й группы (Табл.18) отмечена тенденция повышения нейтрофилов палочкоядерных к 60-м сут в 2,7 раза, достоверное повышение нейтрофилов сегментоядерных к 90-м сут на 27,6% , р 0,05, эозинофилов в 3,6 раза, базофилы - без изменений, тенденция кратковременного повышения количества моноцитов и снижение их в дальнейшем к 90-м сут в 2 раза от первоначального уров ня, а так же снижения содержания лимфоцитов на 23,5% от
Во 2-й группе животных изменения изначально низкий уровень от нормы нейтрофилов палочкоядерных в дальнейшем характеризовался достоверным снижением к 45-м сут до нормы (в 5,5 раза). Количество нейтрофилов сегментоядерных наоборот, достоверно увеличилось к 45-м сут в 4 раза и соответствовало норме. Отмечено достоверное повышение (в 4,7 раза, р 0,05) содержания эозинофилов, а так же базофилов (на 50,0%. р 0,05). Содержание моноцитов достоверно повышалось к 60-м сут почти в два раза, что очевидно связано с повышенным уровнем прогестерона у животных к этому времени (Ширшиев С.В., с соавт., 2008). В дальнейшем, количество моноцитов и лимфоцитов недостоверно снизилось к 90-м сут, соответственно в 1,5 и на 7,0%.
У коров 3-й группы отмечены малозначимые изменения нейтрофилов палочкоядерных, уровень которых оставался до 90-х сут практически без изменений в пределах нормы. Уровень нейтрофилов сегментоядерных достоверно повысился к концу исследований по сравнению с первоначальным на 25,0%, р 0,05. Количество эозинофилов и базофилов не имело значимых изменений за период исследований. Содержание моноцитов к 60-м сут исследований достоверно повысилось в 2 раза, р 0,05, но к 90-м сут оставалось равным первоначальному показателю. Количество лимфоцитов за период исследований практически не менялось и к 90-м сут имело достоверные показатели равные первоначальным.
В целом, содержание отдельных видов лейкоцитов в периферической крови коров изменялось незначительно и оставалось в пределах физиологически нормальных значений к 90-м сут исследований. 3.7 Изменения показателей естественной резистентности
Исследования показателей естественной резистентности в крови коров показали, что после применения биокорректоров гамавита и гипофизина ее факторы активизируются во всех исследуемых группах (табл.19) неоднозначно. Во всех группах коров до применения препаратов уровень бактерицидной активности находился в переделах нижних физиологически нормальных значений и к 60-90-м суткам исследований во всех группах повышался неравномерно по отношению к первоначальному уровню.
Эффективность стимуляции воспроизводительной функции и профилактика мастита у коров
Воспроизводительная способность коров в послеродовом периоде зависит от своевременного становления и полноценности протекания половой цикличности. Максимальным сроком восстановления половых циклов и оплодотворя-емости коров считается 90 сут после родов. Оплодотворение животных после этих сроков ведет к снижению рентабельности молочного скотоводства, так как каждый последующий день до оплодотворения будет свидетельствовать о бесплодии. Таким образом, воспроизводительная способность коров во многом зависит от уровня возникающих нарушений в послеродовом периоде влияющих на физиологически нормальное протекание стадий и феноменов полового цикла у коров.
Полученные результаты исследований по определению эффективности применения гамавита и гипофизина в первые 60 сут после отела для стимуляции воспроизводительной функции у молочных коров, отражают степень коррекции ими процессов метаболизма в различные физиологические периоды становления репродуктивной функции после родов (период инволюции репродуктивных органов – до 30-х суток и период после его завершения).
В течение максимального сервис-периода, который может быть у коров (90 сут), были отмечены следующие изменения в показателях воспроизводительной функции животных исследуемых групп (табл. 20).
У коров исследуемых групп (n=25) время появления половой цикличности после применения биокорректоров гамавита и гипофизина, характеризовалось тенденцией уменьшения по мере отдаления от периода родов. Так у животных 1-й и 2-й групп (введение препаратов на 2-е и 21-е сут), половая цикличность появилась в среднем, соответственно на 67-е и 25-е сутки, а у коров 3 86
й и 4-й групп (введение препаратов на 45-е и 60-е сут) – на 44-е и 32-е сутки. При этом разброс половых циклов по времени составил: 1-я группа – 9 сут; 2-я – 10 сут; 3-я – 26 сут; 4-я – 9 сут; 5-я – 26 суток. Таким образом, наилучший синхронизирующий эффект появления половой цикличности отмечен у животных 1-й и 2-й групп, который был лучше показателя в контроле, соответственно на 61,6 и 65,4%.
Наибольшее количество животных у которых были отмечены полноценные половые циклы было во 2-й группе – 22 коровы, что составило 88,0% от числа животных в группе и превышало этот показатель в контрольной группе на 36,0%. При этом отмеченное у коров 2-й группы наибольше количество полноценных половых циклов, соответствовало и наилучшему эффекту их синхронизации по времени (10 сут) после применения биокорректоров.
В 1-й группе коров после однократного применения препаратов на 2-е сут после родов, по одному разу осеменили 15 голов (60,0%), по два раза – 5 (20,0%), по три раза – 3 (12,0%) животных. Всего на группу затрачено 34 осеменения. Индекс осеменения в группе составил 2,8. Оплодотворилось 12 коров (48,0%).
Во 2-й группе животных, где биокорректоры применяли на 21-е сут после родов, по одному разу осеменили 13 коров (52,0%), по два раза – 8 (32,0%), по три раза – 3 (12,0%) коровы. Всего на группу затрачено 38 осеменений. Индекс осеменения составил 1,8. Оплодотворилось 21 (84,0%) животных.
В 3-й группе коров после применения гамавита и гипофизина на 45-е сут после родов, по одному разу осеменили 13 (52,0%), по два раза – 5 (20,0%), по три раза – 2 (8,0%) головы. Всего на группу затрачено 29 осеменений. Индекс осеменения в группе составил 1,9. Оплодотворилась 15 (60,0%) корова.
В 4-й группе животных, где препараты применяли на 60-е сут после родов, по одному разу осеменяли 10 (40,0%), по два раза – 2 (8,0%), по три раза – 1 (4,0%) корову. Всего на группу коров затрачено 17 осеменений. Индекс осеменения составил 1,2. Оплодотворилось 14 (56,0%) животных.
В 5-й (контрольной) группе коров, где препараты не применяли, на протяжении всего периода исследований (90 сут) по одному разу осеменяли 10 (40,0%) коров, по два раза – 5 (20,0%), по три раза – 5 (20,0%) животных. Всего на группу затрачено 35 осеменений. Индекс осеменения в группе составил 2,9. Оплодотворилось 12 (48,0%) коров.
Полученные результаты эффективности стимуляции воспроизводительной функции у коров в послеродовом периоде биокорректорами гамавит и ги-пофизин Ла Вейкс показали, что наилучшим вариантом будет их совместное применение на 21-е сут послеродового периода (2-я группа коров). Применение биокорректоров гамавита и гипофизина способствовало предупреждению возникновения послеродовых заболеваний яичников (перси 88 стентное желтое тело, киста желтого тела и фолликулярная киста, гипофункция) и матки (эндометриты), соответственно: 1-я группа – 28,0 и 24,0; 2-я –4,0 и 12,0; 3-я – 28,0 и 12,0; 4-я – 36,0 и 8,0 и 5-я – 52,0%.
Исследования эффективности различных схем применения биокорректоров гамавита и гипофизина для профилактики скрытого мастита в послеродовом периоде показали (табл. 21), что к концу исследований были отмечены поражения разного количества долей вымени. но во всех группах отмечено снижение количества пораженных долей вымени. Наилучшая эффективность отмечена после применения биокорректоров в 1-й и 3-й группах, где из 25 голов в группе к 90-м суткам сервис-периода у 68,0 и 72,0% животных исследованиями на МКП-2 подтверждено отсутствие наличия признаков скрытого мастита.
У животных 5-й (контроль) группы к 90-м сут отсутствие признаков скрытого мастита установлено только у 36% коров, что меньше от 1-й группы в 1,8, 2-й – 1,6, 3-й – 2,0 и 4-й – 1,6 раз. Таким образом, полученные данные по применению биокорректоров га-мавита и гипофизина для предупреждения развития мастита показывают, что наиболее эффективным следует считать варианты (1-я и 3-я группы) применения препаратов на 2-е и 45-е сут после родов.
Определенной закономерности в преимущественном поражении передних или задних долей вымени, как до применения препаратов, так и к концу исследований (на 90-е сут) не установлено. Проведенные исследования по определению эффективности применения гамавита и гипофизина с целью стимуляции обменных процессов, воспроизво дительной функции и профилактики послеродовых заболеваний и заболеваний молочной железы в теченгие 90 сут после родов показали, что наиболее эффек тивной является схема применения стимулирующих половую цикличность препаратов начиная с 21-х суток после родов одним курсом. Полученные дан ные свидетельствуют о том, что в течение максимально возможного сервис периода для молочных коров, который составляет 90 сут (Студенцов А.П., 1980; Нежданов А.Г.,1991; Reist M., Erdin D.K., von Euw D. et al.,2003) сов местное применение гамавита и гипофизина на 21-е сутки (2-я группа), способ ствовало максимальной оплодотворяемости (84,0%) животных, при мини мальном индексе осеменения (1,8) и количестве послеродовых заболеваний (16,0%). Эффективность профилактики скрытого мастита составила 60,0 про тив 36,0% в контроле.