Введение к работе
Актуальность темы. Скорость оседания эритроцитов (СОЭ) и гематокрит являются одними из важных гематологических показателей, свидетельствующих о физиологическом состоянии организма животных. СОЭ при одних ваболеваниях ( разные формы анемии, туберкулёз, злокачественные образования и др.) повышается, а при других ( гастроэнтерит, недостаточность кровообращения и др.) - понижается ( Кудрявцев А.А., Кудрявцева Л.А., 1974; Голиков А.Н., Базанова Н.У. и соавт., 1980; Смирнов A.M., Конопелько О.Я.. Уразаев Н.А. и соавт., 1988; и др.).
Значительному изменению подвержен и гематокрит: при крово-потерях, гипергидрозе и дегидратации организма, врождённых пороках сердца ( Тодоров Й., 1969; Мидлишвили Г.Н., .1982; Асламов В.М., Беляев В.Н. и соавт., 1992; и др.). На основе его величины можно судить о количестве гемоглобина и вязкости крови, определять средний объем одного эритроцита и объёмный профиль крови (Шахов А.Г., Положенко Э.Г. и соавт., 1992; Лысов В.Ф., 1994; Pries A., Newhous D., 1992; Wiener К., 1993; Green A., Hickton М., 1994; Stephen Е.,1994; И др.).
В связи с большой ролью этих показателей при проведении клинико-гематологических исследований имеется необходимость повышения их достоверности и информативности с учетом видовых особенностей продуктивных животных. Здесь имеется прежде всего 3 виду установление закономерности изменения СОЭ в зависимости от ряда факторов, дальнейшая разработка и соверсенствованке методов анализа и их метрологическое обеспечение.
Необходимо отметить, что во многих работах осуцгсгвляэг измерение пути оседания эритроцитов (ПОЭ) по высоте надосадочпой плазмы, именуя при этом ее скоростью (СОЭ). Поэтому реальная динамика СОЭ крови и её видовые особенности остаются неизученными. Кроме того, приводимые нормативные значения ПОЭ ісрови по Панчеп-кову для многих видов животных настолько малы (на уровне 0,3-0,8 км), что соизмеримы с погреппостья метода и этим суг.тетвенно ограничивают его применение в ветершіаріш.
Значительный научно-практический интерес представляет более глубоїсое изучение влияния ряда экзогенных факторов па ПОЭ ( Пирогов Л. С, 1952; Маршалкович Д.Б., 1957; Подрабипек П.А., 1958; Бурчинский Г.И., 1962; Головацкий А.С., Головацкая Л.Л., 1973;
Тукшаитов Р.Х., Латыпов М.М., 1984-1990; Hung W., 1988; Hawkins D.. Lamwort Т.. 1994; и др. ).
Из эндогенных факторов особо следует выделить гематокрит. Многие авторы полагают наличие зависимости СОЭ от гематокрита (Маточкин М.И.. Мясникова Л.Е.. 1969; Морозова В.Т.. 1976; Чижевский А.Л., 1980; и др. ). Между тем получение убедительных данных о высокой корреляционной связи между этими показателями может способствовать определению СОЭ с более высоким уровнем достоверности.
Вышеизложенное свидетельствует о необходимости проведения работ по изысканию более совершенных и ускоренных методов определения СОЭ и гематокрита на основе сравнительного изучения влияния на них разных экзогенных и эндогенных факторов.
Цель исследований. Разработать простые и ускоренные методы определения СОЭ и гематокрита, пригодные для широкой ветеринарной практики и обеспечивающие получение достоверных результатов.
Задачи исследований: 1. Усовершенствовать метод определения СОЭ крови у продуктивных животных - повысить точность измерения и сопоставимость результатов исследования при одновременном уменьшении времени его проведения.
-
Выявить видовые закономерности изменения во времени показателя СОЭ крови крупного рогатого скота, лошадей, овец и свиней, используя усовершенствованный метод.
-
Разработать экспресс-микрометод определения СОЭ крови на основе ее центрифугирования.
-
Разработать метод определения гематокрита в наклонных пипетках.
б. Повысить воспроизводимость показателя СОЭ крови при одновременном измерении его и гематокрита.
Научная новизна. Впервые установлена динамика СОЭ крови по Панченкову у различных видов животных и выявлена ее полифаз-ность; определено максимально-достигаемое значение этого показателя у каждого вида животного и время его проявления.
Выявлены условия повышения воспроизводимости результатов измерения ПОЭ, СОЭ и гематокрита, оптимальные режимы их определения различными методами. Показано, что проведение вышеуказанных гематологических анализов в наклонных пипетках позволяет нормировать результаты измерения, выражая их непосредственно через СОЭ.
Дано научно-практическое обоснование возможности определе-
ния ПОЭ крови на основе ее центрифугирования, обеспечивающего экспресс-анализ микрообъёмов крови.
Впервые показана возможность определения в наклонных пипетках (ф = 60) наряду с СОЭ гематокрита и использования его значений для нормирования СОЭ крови животных.
Практическая ценность. Усовершенствовано и разработано 3 метода определения ПОЭ и СОЭ крови сельскохозяйственных животных, которые обеспечивают большую воспроизводимость, а следовательно, более высокую их информативность при значительном сокращении времени анализа.
Разработанный метод определения гематокрита отличается простотой, доступностью и возможностью применения результатов анализа для широкого нормирования показаний СОЭ.
Все предложенные методы не требуют специального оборудования и вполне применимы в ветеринарной практике.
На основе материалов диссертации составлены и утверждены методические уїсазания " Определение ПОЭ, СОЭ и гематокрита с использованием новых и усовершенствованных методов" (Казань, 1995).
Отдельные результаты вошли в "Рекомендации по математической обработке экспериментального материала при использовании в опытах ограниченного количества животных" (Тукпаитов Р.Х., 1995). Данные, представленные в наших публикациях, используются при проведении занятий со студентами на кафедрах Физиологии и диагностики внутренних болезней животных Казанской государственной академии ветеринарной медицины, а также при выполнении НИР во Всероссийском научно - исследовательском ветеринарном институте.
Научные положения, выносимые на защиту :
проведённое усовершенствование существующих и разработка новых методов дают возможность получения достоверных данных анализа СОЭ, ПОЭ и гематокрита и выявления закономерностей изменения этих показателей у различных видов животных ;
раэработанные методы анализа крови єффектизіш, просты и пригодны для широкой лабораторной практики.
Апробация работы. Основные результаты доложены и одобрены на Республиканских научно-производственных конференциях ( Казань, 1991, 1992, 1994, 1995 ) и на межлабораторном совещании ВНИВИ ( 1996 ).
Публикации. Основные данные исследований приведены в 7 научных работах.
Структура и объём диссертации. Работа состоит ив следующих разделов: введение, обвор литературы, материал и методы исследований, собственные исследования, обсуждение ревультатов, выводы, практические предложения и список литературы.
Диссертация изложена на 167 машинописных страницах, содержит 43 таблицы и 17 рисунков. Список литературы включает 173 источника, в тем числе 42 зарубежных.