Введение к работе
Актуальность проблемы. В современной гепатологии проблема расшифровки механизмов становления и прогрессировать хронических заболеваний печени (ХЗП) крайне актуальна и требует целенап-равленных экспериментально-клинических исследований, теоретической разработки и развития.
Такое пристальное внимание к решению данной проблемы объясняется постоянным возрастанием числа больных с ХЗП как в связи с неблагоприятными эпидемиологическими условиями, так и в результате роста хронических алкогольных поражений, аллергических заболеваний, лекарственной непереносимости и ряда других причин (А.С. Логинов, 1979, 1989; А.Ф. Блюгер с соавт., 1988, A. Zuckerman, 1988 и др.). Лекарственная терапия при лечении больных с подобными заболеваниями, многообразными по этиологическим факторам и сложности патогенеза недостаточно эффективна без понимания закономерностей развития патологического процесса.
При формировании хронических поражений печени значительное место занимают метаболические факторы: избыточное образование соединительной ткани (СТ), прогрессирующая недостаточность функции паренхимы, энергообеспеченность обменных реакций. Ведущим механизмом изменения нормального обмена СТ служит нарушение координированной деятельности ферментов синтеза и распада, при этом особая инициирующая роль отводится системе катаболических энзимов, функциональное значение которых в формировании цирроза печени остается недостаточно ясным (F. Hutterer et al., 1966, 1974; F. Koizumi et al., 1968, 1969; G. Pott et al., 1980, 1981 и др.). Требуют более углубленного исследования как метаболические процессы в СТ, так и механизмы метаболических сдвигов на ферментном уровне в паренхиме печени при развитии данного патологического процесса, а также их коррекция антифнбротическими и гепатозащитными лекарственными средствами.
Особенно важны исследования препаратов, достаточно широко применяемых в клинике гепатологии, таких как преднизолон и Д-пе-ницилламин (ДПА). Их терапевтический эффект не всегда однозначен в связи с использованием лекарственных средств без учета стадии развития патологического процесса в каждом конкретном случае.
В исследовании механизмов патогенеза острых и хронических поражений печени большие возможности дает применение экспериментальных моделей повреждения этого органа. Одна из наиболее изученных — хроническое диффузное повреждение печени при интоксикации четыреххлористым углеродом (ССЦ). Введение данного гепатотоксина приводит к смешанным дистрофически-некротическим
изменениям печени, позволяя наблюдать картину гепатита или разных стадий цирроза печени во всем разнообразии их клинических и морфологических изменений (А.Ф, Блюгер, 1964; А.Ф. Блюгер, А.Ф. Майоре, 1973; Е.Л. Пидемский, 1976; E.Rubin etal., 1961,1963идр.). Отработанность данной экспериментальной модели, сходство с морфологической картиной постнекротических поражений печени у людей, позволяет углубленно .изучать особенности и закономерности развития патологического процесса при гепатопатиях.
Цель работы и задачи исследования. Основной целью исследования явилось изучение биохимических параметров, характеризующих состояние метаболизма основного вещества (OB) СТ и паренхимы печени в динамике формирования экспериментального ССЦ-Цирроза печени без лечения и на фоне лекарственной терапии. Для достижения указанной цели были поставлены следующие задачи:
1. Изучение биохимических параметров, характеризующих катаболизм OB СТ печени и активности ферментов-маркеров субклеточных структур гепатоцита в процессе развития экспериментального хронического поражения печени (ЭХПП) у крыс при интоксикации
сси.
1. Оценка взаимного влияния метаболизма стромы и паренхимы при прогрессировании патологического процесса в печени.
-
Определение с помощью использованных в эксперименте биохимических методов стадии развития ЭХПП.
-
Изучение и оценка продолжительного применения лекарственных препаратов антифибротического действия на метаболизм стромы и паренхимы печени у крыс при продолжающемся гепатотоксическом воздействии ССЦ.
-
Экстраполяция выводов и заключений, полученных на экспериментальном материале в клинику гепатологии для расшифровки механизмов прогрессирования ХЗП у людей.
Научная новизна и практическая значимость. Впервые проведено комплексное изучение обмена ОВ СТ и ферментных показателей метаболизма паренхимы на последовательных стадиях становления и развития экспериментального цирроза печени (ЭЦП), вызванного введением ССЦ. При исследовании катаболических механизмов регуляции метаболизма ОВ СТ получены данные, по-новому освещающие процесс прогрессирования хронического поражения печени. Показано синхронное изменение динамики ряда ферментов-маркеров субклеточных структур гепатоцита и установлена прямая закономерная связь данного изменения с динамикой направленности ферментной регуляции катаболизма ОВ СТ при длительном воздействии гепато-токенна.
Четкость и сопоставимость результатов биохимических исследо-
ваний в каждой серии опытов позволили выделить стадии развития патологического процесса при развитии ЭЦП. Повторяемость динамики метаболических процессов в печени у подопытных животных обеспечивалась однотипностью проведения экспериментальной работы: использование половозрелых крыс-самцов одной линии, учет сезонности, исключение болевого стрессового воздействия при работе с животными, тщательный подбор реагентов и доз субстратов, применение обоснованных экспериментально, общепринятых дозировок ге-патотоксина и лекарственных препаратов.
Многокомпонентный анализ позволил подойти к экспериментально-теоретическому обоснованию формирования и прогрессирования хронического диффузного поражения печени. Общность механизмов формирования и развития Патологического процесса при гепатопати-ях различной этиологии подтверждается данными, полученными при исследовании больных с разными стадиями хронической недостаточности кровообращения (ХНК), "мускатной" печенью и кардиогенным фиброзом.
Исследование эффективности терапевтического воздействия лекарственных средств на метаболизм OB СТ и паренхимы печени проводилось с учетом стадии развития ЭЦП. Применение данных препаратов, приближенное к лечению больных в клинике гепатоло-гии, дало четкие и однозначные результаты, позволяющие судить об эффективности их антифибротического и гепатозащитного действия в зависимости от продолжительности введения и стадии развития ЭХПП.
Полученные результаты в эксперименте и при клинических исследованиях позволяют рекомендовать определенные системы: глико-замингликаны (ГАГ) в сыворотке крови и в моче и ГАГ-гидролазы в сывортке крови в качестве достоверного показателя состояния метаболизма СТ при хронических диффузных поражениях печени различной этиологии. Часть биохимических методов, характеризующих состояние метаболизма стромы и паренхимы при гепатопатиях, является экспресс-методами, они достаточно просты, надежны и могут использоваться при клинических исследованиях.
Совокупность показателей, полученных в результате параллельного изучения обмена стромы и паренхимы печени при динамическом исследовании функционального состояния у людей, дает возможность определения стадии развития хронического диффузного поражения, течения и прогноза болезни.
Основные положения, вынесенные на защиту.
1. Этапы формирования ЭЦП, вызванного ССІ4 у крыс характеризуются разными механизмами избыточности синтеза ОВ СТ и зависят от стадии развития патологического процесса.
2. Стадии развития ЭХПП соответствуют пролонгированным фазам развития общего адаптационного синдрома.
Апробация работы. Диссертация апробирована на межлабораторной научной конференции ЦНИИ гастроэнтерологии ГМУ г. Москвы.
Основные положения работы доложены на заседаниях Ученого Совета и на научных,сессиях ЦНИИ гастроэнтерологии (YII, YIII, IX, X, XI, XIII, XIY, XYh III Всесоюзном симпозиуме по медицинской энзимологаи (Астрахань, 1979), II Всесоюзном симпозиуме "Структура и функции лизосом" (Новосибирск, 1980), Международном симпозиуме "Клиническое значение препарата Легален" (Москва, 1981), Московской конференции молодых ученых "Современные проблемы биохимии и физико-клинической биологии (Москва, 1983), III Всесоюзном симпозиуме "Структура и функции лизосом" (Тбилиси, 1986).
По теме диссертации опубликовано десять работ.
Структура и объем диссертации. Диссертационная работа состоит из введения, обзора литературы, 4 глав собственных исследований, обсуждения полученных результатов, выводов и указателя литературы (163 отечественных и 185 иностранных работ); изложена на 249 страницах машинописного текста, документирована 23 таблицами, иллюстрирована 55 рисунками.