Введение к работе
В рубце, где происходит интенсивный синтез микробного белка, нуклеиновые кислоты составляют качественно.важную часть рубцового содержимого..'.
Еще в 1954 году Мак Дональд и Блэкстер обратили на это
внимание, однако, несмотря на большое количество работ, по
священных изучению физиологии и биохимии рубца, вопрос
об обмене в нем нуклеиновых кислот изучен мало. '
В работах,Я. Л. Германюка, проведенных в 1964 году, отмечается, что содержание Р,НК в рубцовой жидкости подверг*; нуто довольно большим колебаниям от 20,4 до 32,9 мг на 100 мл рубцовой жидкости. Учитывая большую массу содер-, жимого рубца и его стенки, авторлрншел к выводу, что рубец имеет большой удельный вес в общем обмене рибонуклеиновой кислоты в организме КРС
Последующие исследования (Topps I; Н. a. Elliott - R. С,
1965; Радии И;' Д., 1965) дали основание считать, что синтез
нуклеиновых кислот в рубце весьма,значительный, поскольку
концентрация их в- рубцовой жидкости овец достигает 54 мг
на 100 мл. '
Еще более высокую концентрацию нуклеиновых кислот
. в рубцовой жидкости (максимальную) отметил в своих рабо
тах Смит (Smith R. Н„ 1969) —до 250 мг%. *
В опытах Госсера.и Факонно (Gausseres В. a. Fauconneati G., 1965) посвященных изучению происхождения нуклеиновых кислот в рубце жвачных, отмечено значительное повышение концентрации нуклеиновых кислот в связи с развитием'рубцовой микрофлоры в послемолочный период. Было установлено, что отношение РНК: ДНК в рубцовой жидкости сходно^ с таковым у бактерий и простейших. Сравнив содержание нуклеиновых кислот в кормах и микроорганизмах, авторы обнаружили значительные различия,
Проведенные Смитом и Мак Алланом (Smith R. Н. а. Мс
АІГап.А. В., 1971) опыты in vitro с добавлением в инкубируе
мую рубцовую жидкость чистых нуклеиновых кислот показа
ли, что нуклеиновые кислоты разрушаются в течение незна
чительного времени. ' ;-
Цеягргяка' tij--vj іл*,~-,тзя I J
В опытах in vivo были получены сходные результаты. На
основании этого авторами был сделан вывод, что нуклеино
вые кислоты в пробах рубцовой жидкости, взятой через 1 час
после кормления, имеют в' основном микробное происхожде
ние и могут служить - косвенным показателем микробного
белка. * * .
Значимость нуклеиновых кислот в питании жвачных как
источника азота была впервые продемонстрирована Эллнсом
и Пфандером (Ellis W. С. a. Pfander W. Н., 1965). Авторы по:
казали, что в пробах рубцовой жидкости/инкубируемой in
vitro, нуклеиновые кислоты составляют около 15% азотистых
соединений микробного происхождения. Рядом других иссле
дователей (Weller R, А., 1957; Purser D. В. a. Beuchler S, М;.
1966) также отмечается, что рубцовые бактерии содержат
около-75—85% своего азота в форме белков, пептидов или
свободных аминокислот и 15—25% в форме нуклеиновых кис
лоте '
Все это дало возможность полагать, что на каждые 4 части
«кормового азота, превращенного в бактериальный белок и аминокислоты, примерно 1 часть превращается в нукленно-ные кислоты, а пробы рубцовой жидкости, взятые через 4 часа после кормления, обычно содержат І0—16% общего количества азота в форме нуклеиновых кислот. Мак Аллан, Смит, Блэкстер (Мс. Allan А. В. a. Smith R. PI., 1969; Blaxter К. L., 1961) утверждают, что голодание обуславливает меньшее снижение экскреции аллонтоина с мочой у жвачных, чем у нежвачных живбтных.
. Топпс и Эллиот (Topps I. Н. a. Elliott R. С, 1965) обнаружили значительную корреляцию между концентрацией нуклеиновых кислот в рубце и выделение аллонтоина в моче овец. Это обстоятельство позволило предположить, что большая часть аллантонна в моче жвачных пищевого происхождения. Исследования Смита, Мак Аллана, Хила (Smith R. Н., Ліс.
* Allan А. В. a.. Hill W. В., 1969) дали основание считать, что большая часть азота нуклеиновых кислот не имеет питательной ценности для животного и синтез значительного количества нуклеиновых кислот в рубце ведет к потере' азота. Величина этнх-.потерь зависит от размера микробной популяции в рубце.
Исходя из этого, с целью углубления представления об азо
тистом обмене, нами была поставлена задача — изучить осо
бенности динамики содержания азотистых^ фракции и нуклеи
новых кислот в рубцовой жидкости телок при скармливании
нм4 летних и зимних рационов с различным протенново-угле-
водным отношением, с тем чтобы выяснить следующие во
просы: ' .
1) как меняется концентрация нуклеиновых кислот в руб
цовой жидкости в зависимости от рациона-и времени взятия
проб; " »
2), какова зависимость между содержанием в рубцовой жидкости азотистых фракций и нуклеиновых кислот;
3) в каких пределах изменяется отношение РНК/ДНК.
Рационы подопытных животных были составлены исходя из соображении выяснить вопрос о влиянии уровня поступле-ленпи азота с кормом и количества концентратов в рационе на развитие рубцовой микрофлоры.
В качестве косвенного показателя плотности микробной
популяции в рубце предполагалось использовать концентра
цию нуклеиновых кислот. 1 'г
Работа является частью общей проблемы «Пищеварение и обмен веществ у сельскохозяйственных животных и птиц в онтогенезе», разрабатываемой на кафедре физиологии и био-химии ТСХЛ под руководством профессора П. И. Жеребцова,
Экспериментальные исследования проводились на трех чи-стшюродпых телках холмогорской породы, которым в 4-месячном возрасте были наложены фистулы рубиа по Басову. Всего методом периодов было проведено 5,опытов на животных с 7- до 13-месячного возраста.
Из них три опыта на летних рационах, которые включали траву вико-овсяной смеси и концентраты в разных соотношениях, и два на зимних рационах с разным соотношением вико-овсяного сена и концентратов (табл. 1). -
Каждому опыту предшествовал предварительный период продолжительностью 1*4—30 дней, в течение которого изучалась поедаемость кормов. Кормление животных трехразовое (8, 14, 20 часов).
После окончания предварительного периода, с целью вы-
. явлении использования азота корма, на каждом рационе про
водили балансовый опыт. В отобранной среднесуточной пробе
мочи определяли концентрацию^ мочевннного азота. Затем
в течение 2-х.дней брали пробы рубцовой жидкости до корм
ления, через 3 и 6 часов после утреннего кормления'с тем,
чтобы изучить содержание в ней азотистых фракций и нуклеи
новых кислот в динамике. Анализ кормов, кала и мочи осуще
ствлялся общепринятыми методами зоотехнического анализа.
Определение в рубцовой жидкости общего и небелкового, азо
та — методом полумакро-Кьельдаля, белкового — по разни
це между обшнм и небелковым, аммиачного азота — по Ферд-
мапу, РНК н ДНК — по методу Спирина с некоторыми моди
фикациями. .
Таблица I
Рационы кормления подопытных телок для выращивания коров _ живым весом 500—550 кг