Механизмы регуляции адренореактивности миометрия человека и животных Шушканова, Елена Геннадьевна

Введение к работе

Актуальность темы. Проблема изменения адренореактивности различных органов и тканей в настоящее время привлекает к себе все юльшее внимание (Сергеев П.В. .и соавт., 1989; Перцева М.Н., 1989; u-аджанян Н.А. и соавт., 1992; Розен В.Б., 1994). Стало очевидным, что ффективность адренергической регуляции зависит не только от уровня атехоламинов в крови, но и от адренореактивности органа. Вместе с тем, онкретные механизмы, регулирующие адренореактивность, во многом 1стаются неясными. Эта проблема имеет непосредственное отношение и к юпросам акушерства, так как адренергические механизмы играют важную юль в регуляции сократительной деятельности матки (Михайленко Е.Т. и оавт.. 1988; Дуда И.В., 1989; Кулаков В.И., 1995; Абрамченко В.В., 1996). ? частности, согласно концепции о р-адренорецепторном ингнбирующем 1еханизме (р-АРИМ), при беременности торможение спонтанной и 1_Ь1званной сократительной активности (СА) миоцитов матки происходит а счет взаимодействия катехоламинов и эндогенного Р-адреномиметика с їх В-атоенопеиептопами ffl-API а попы возникают пои обязательном Lx^^u^l^^L(S^^lTT^ 1986 1996) СГло^гоштюїГ ппопесс пгГедоодового" снижения Р-щТеноое^тивности миомотия женшин "Кче^недостаточно Мы реХлагали что прост^диньГ ZmauZи другиевшможныё частникГГндукши SoSb нашду с JtSSSivLdSim деГствГм

^рмударов^ от^щїе цмьїїїїт ^СКаза^НН0Є позволило

Цель исследования. В экспериментах с изолированным миометрием оучить способность возможных участников индукции спонтанных родов :нижать его р-адренореактивность.

Задачи исследования.

1 .Охарактеризовать адренореактивность изолированного миометрия продольный слой) небеременных крыс как тест-объекта для моделирования Р-АРИМ в том числе с учетом сезона года, фазы карального цикла, температурь, средь, скорости и длительности перфузии 1 других факторов!

2,Оценить адренореактивность изолированного миометрия 5еременных женщин с учетом срока гестации.

3.Изучить влияние гипоксии на адренореактивность изолированного .шометрия крысы и человека.

4.Исследовать влияние простагландина Fact, окситоцина и "иперкалиевого раствора на р-адренореактивность изолированного .шометрия крысы.

З.Оценить способность сыворотки крови неберемеиных, беременн; и рожающих женщин, сыворотки пуповинной крови новорожденных околоплодных вод изменять р-адренореактивность изолированно миометрия крысы при длительном (до 120 минут) воздействии.

Научная новизна. Установлено, что продольная мускулатура рс матки небеременных крыс обладает высокой БАР; она содержит л популяции Р-АР; высоко- и низкоаффикную. Их активация происход при действии адреналина в концентрациях Ю'ЧО * г/мл и 10-"-10-^r/i соответственно. Обнаружен отрицательный хронотропный эффе последействия адреналина, свидетельствующий о возможное функционирования р-АРИМ в "импульсном" режиме. Показано, ч изолированный миометрий женщин в отличие от миометрия крь обладает невысокой адренореактивностью. Миометрий, полученный середине беременности (19 20 над), под влиянием адреналина концентрации Ю⁷ г/мл угнетает свою СА, в то время как миометри иссеченный в конце беременности (38-40 нед.), наоборот, повышает ее. Э данные служат прямым доказательством предродового снижения БАР, следовательно, силы р-АРИМ Показано, что гипоксия уменьшает Б/ изолированного миометрия крысы (при даительной гипоксии этот проце необратим) и а-адренореактивность (ААР) миометрия беременн1 женщин иссеченного перед родами Это дает основание утверждать ч гипоксия уменьшает домширующую адренореактивность (БАР или АА и, следовательно у женщин она имеет прямое отношение к предродoво» снижению БАР миометрия и к индукции родов Экшерименталы подтверждено предположение WikiandМ et al (1985) и Циркина В.И соавт. (1986) о связи родоиндуцирующего действия простагландинов ( отчасти, окситоцина) с их способностью снижать БАР миометрия, то ее уменьшать силу р-АРИМ.

Впервые, с помощью разработанного нами биометода, в которс тест-объектом служили продольные полоски рога матки небеременнь крыс, установлена способность сыворотки крови и околоплодных вс изменять адренореактивность миометрия не только путем прямо! влияния на адренорецепторы, как это было показано недавно (Ци кинВ.И. и соавт., 1996, 1997; Братухина СВ. и соавт., 1996; Дворя; скийС.А. и соавт., 1997), но и за счет пролонгированного (косвенноп воздействия на них. В частности, обнаружено, что при длительном (60-1; минут) воздействии на тест-объект сыворотка крови небеременнь женщин и околоплодные воды, полученные на 19-20 и 36-40 не беременности, повышают его БАР, сыворотка крови беременных жени» (28-30 нед.) и рожениц, наоборот, снижает БАР, а сыворотка крон новорожденных и околоплодные воды, полученные в 1-м периоде родо не влияют на нее. Эти данные позволили предположить, что в организи человека помимо адреномодуляторов прямого действия - эндогенног сенсибилизатора Э-АР (ЭСБАР) и эндогенного блокатора р-АР (ЭББАР)

имеются адреномодуляторы замедленного (непрямого) действия - так называемые эндогенный БАР-повышающий фактор и эндогенный БАР-снижающий фактор, которые (возможно, за счет изменения синтеза простагландинов) совместно с ЭСБАР и ЭББАР регулируют силу р-АРИМ. Кроме того, они послужили основой для классификации адреномодулирующих факторов и воздействий. С помощью этого же биометода впервые установлена способность сыворотки крови беременных и рожающих женщин а также сыворотки пуповинной крови при длительном (60-120 минут) воздействии повышать степень аптоматии тест-объекта что объясняется наличием в крови так называемого эндогенного регулятора степени автомат (ЭРСА) Эндогенные адреномодуляторы непрямого и прямого действия ЭРСА а также простагландиньГ окситоцин и гипоксия рассматриваются 'нами к^^м^нентьТсистемы'модуляции свойств миометрия имеющие непосредствеЗГотн^шение к реализации

Практическая значимость. Определены адекватные модели для изучения Р-АРИМ. Ими могут служить полоски миометрия женщин, иссеченные при малом или плановом кесаревом сечении (в последнем случае миометрий должен находиться в среде, содержащей фактор, препятствующий падению БАР, например, в околоплодных водах или сыворотке крови небеременных женщин), а также продольные полоски рога матки неберемеиных крыс, взятых в фазы метаэструс или диэструс 1. Разработаны четыре новых метода исследования, в том числе, метод активации адренергических волокон миометрия крысы и истощения в них запасов медиатора, основанный на использовании гиперкалиевого (20 мМ KCI и выше) раствора Кребса; метод создания гипоксии изолированного миометрия за счет снижения аэрации и/или скорости перфузируемого раствора, либо применения утеростимуляторов; способ скрининга антигипоксических веществ, основанный на использовании указанного выше метода; метод биодетекции содержащихся в крови, околоплодных водах и других жидких средах организма эндогенных адреномодуляторов замедленного (непрямого) действия и ЭРСА (принцип, лежащий в основе данного метода, может быть использован при изучении механизмов регуляции хемореактивности различных органов и тканей). Оформлено два рацпредложения. На основе открытого нами явления последействия адреналина дано теоретическое обоснование для разработки метода дробного применения р-адреномиметиков при лечении угрозы невынашивания.

Результаты исследования могут служить теоретической основой для дальнейшей разработки вопросов регуляции СДМ, в том числе р-АРИМ. Данные о влиянии длительной гипоксии на адренореактивность. возбудимость и другие свойства миометрия рекомендуется учитывать при изучении вопросов этиологии и патогенеза слабости родовой

деятельности, угрозы преждевременных родов и других форм акушерско! патологии.

Внедрение. Результаты исследования используются в научной i учебной работе кафедры анатомии и физиологии человека Вятскоп государственного педагогического университета и кафедры акушерства i гинекологии Кировского государственного медицинского института.

Апробация работы. Результаты исследования доложены и обсуждень на 3-м (16) съезде Российского общества физиологов им. И.П. Павлов! {Пущино, 1993), на 7-м Всероссийском симпозиуме "Эколого физиологические проблемы адаптации" {Москва, 1994), на конференция; "Актуальные вопросы клинической педиатрии, акушерства и гинекологии (Киров, 1993, 1994), "Кислотно-основной и температурный гомеостаз Сыктывкар, 1994), "Артериальная гипертензия: экспериментальные i клинические аспекты" (Санкт-Петербург, 1995), "Женщина и социально! развитие региона: проблемы и перспективы" (Киров, 1996), "Актуальны! проблемы современной биохимии" (Киров, 1996), на научны; конференциях Вятского госпедуниверситета (1995,1996,1997).

Положения, выносимые на защиту.

1. Продольные полоски рога матки небеременной крысы обладают высокой Р-адренореактивностью, которая зависит от фазы эстральногс цикла и сезона года. Она снижается при длительной изоляции периодическом тестировании адреналином, длительной гипоксии повышении температуры сред.!! при воздействии окситоцина простагландина и гиперкалиевого раствора, при длительной экспозиции i сыворотке крови беременных и рожающих женщин. Изолированны? миометрий беременных женщин обладает низкой 3-адренореактивностью накануне родов доминирующей является а-адренореактивность которая снижайся при ТительнГ изоляции периодическом тестировани адреналином а такїе под вл^н"Гмксии тестирование

2. В организме человека и животных имеются адреномодуляторы быстрого (прямого) и замедленного (косвенного) действия, в том числе адреносенсибилизаторы и адреноблокаторы, направленность действия которых по отношению к миометрию определяется его доминирующей (схили Р-) адренопеактивностыо У женшин лля вынашивания плотя имеют значение адршомодГяторы увел^чив^ши^^ Талоено^актавнос^ миометоия Г том числе эндогенный БАР nLlT^S ZSot ГолопТошых вод а для иГшии подоі ГршсГодулЇЇоІЇ

Снижающие ЄЄ В TOM H»CS^KC₁!S^L^Zw_lH^^T^^AP.

снижающий ^^сы^^кн^^Л^^^!^: ^{ЗНДГЄННЬШ Ь}

Структура и объем диссертации. Диссертация представлена на 244 страницах машинописного текста и состоит из введения, пяти глав,

заключения, выводов и библиографического указателя (286 источников), иллюстрирована 46 таблицами и 28 рисунками.