Введение к работе
t.
1.1. Актуальность темы. Ускорение экономического и социального развития страны во многом зависит от селекции и воспроизводства крупного рогатого скота путем осеменения глубокозамороженпьш семенем высокоценных производителей.
В настоящее время в СССР применяют несколько технологии криоконсервнрования семени в облицованных и нсоб-лпцованых гранулах, соломинках.
Наиболее широкое распространение получил французский способ замораживания семени в соломинках, разработанный R. Cassou (1950). Другие варианты замораживания семени в синтетических соломинках разработаны R. Jondent (1972), L. Simmet (1972), I. Masphcrson (1972), I. Almquist (1973), А. И. Успенским (1965), В. Ф. Турбиным (1966), И. X. Хабибулиным (1972), А. Д. Бугровым (1976).
Крнконссрвпрование в тонких соломинках позволяет равномерно замораживать весь объем семени, обеспечить лучшее сохранение санитарной и биологической полноценности сперматозоидов, более экономичное использование дорогих сосудов и хладоагептов при хранении в жидком азоте и более удобное идентифицирование замороженного семени.
П. Пакенас в 1973—1976 гг. разработал литовскую технологию криоконсервнрования семени быков в тонкостенных полипропиленовых соломинках, состоящую из 39 устройств, автоматов, инструментов, включающую также кормление, содержание, подготовку быков к взятию семени и се замораживание.
Пластмассовые рамки для криоконсервнрования семени в соломинках, применяемые в указанной технологии, при замораживании изгибаются, и в результате этого создастся неодинаковый температурный режим в отдельных соломинках замораживаемого семени. Кроме этого, пластмассовые рамки непрочные, часто ломаются. Для охлаждения семени рамки помещаются в коробку, что влечет за собой дополнительные затраты времени и труда. Для разбавления ссмснн используются три водяных термостата: для синтетической
рнемников и
вм#ШМшк>рорых н>'жно
Мое:;. ...-.;»., .,>. . чадвмки
Инв Ш -
Ї-ЩШ
среды, для одноразовы^. полп;дп^подадпе<'_оті для охлаждения разб.
поддерживать различную температуру. Возникла необходимость и в разработке более эффективной среды для разбавления семени быков при замораживании его в соломинках, так как ЛГЖ среда предназначена для замораживания в гранулах, в ЛФРМГЖ среде применяются дорогостоющис компоненты.
В связнс вышесказанным онедостатках литовской технологии крпоконсервнрования семени быков в соломинках стало необходимым усовершенствование отдельных технологических ее приемов.
1.2. Цель и задачи исследований. Цель работы — повы
сить биологическую полноценность оттаянных сперматозои
дов путем усовершенствования отдельных технологических
процессов крпоконсервнрования семени быков в тонкостен
ных соломинках.
При выполнении работы были поставлены следующие задачи:
-
Разработать среду для замораживания семени быков в соломинках,
-
Исследовать влияние режимов разбавления на физиологические показатели сперматозоидов после замораживания-оттаивания.
-
Разработать универсальные рамки для замораживания семени в соломинках.
-
Изучить влияние скорости и продолжительности охлаждения на физиологические показатели семени.
-
Разработать замораживающее устройство и способ замораживания семени в хранилище ХБ-0,5.
-
Определить оптимальный режим замораживания семени.
-
Результаты исследований и разработанные устройства проверить в производственных условиях.
1.3. Научная новизна. Исследовано влияние различного
количества лактозы, натрия цитрата и санирующего пре
парата спермосана ППК, в среде для разбавления на ка
чество семени после оттаивания при замораживании в со
ломинках. Разработаны новые рамки (а. с* № 1370008),
позволяющие замораживать семя в соломинках, располо
женных как вертикально, так и горизонтально к поверхнос
ти жидкого азота. Сконструировано замораживающее
устройство УЗС-12 для работы совместно с биохранилищем
ХБ-0,5 и цистерной типа ЦТК взамен устройства УЗС-8,
вмонтируемого в биохранилище KB 6202, производство кото
рого прекращено. Исследовано влияние режимов разбавле
ния, охлаждения и замораживания на физиологические по
казатели семени,
-
Практическая значимость работы состоит в том, что разработанные технологические приемы и устройства для замораживания семени в соломинках на 30,8% повышают физиологические показатели сперматозоидов после замораживания-оттаивания, производительность труда и на 4,5и/о стельность норов, что способствует повышению эффективности использования крноконсервнрованного семени.
-
Апробация работы. По материалам исследовании опубликовано 6 печатных работ, оформлено 2 рационализаторских предложения и получено 1 авторское свидетельство.
Материалы диссертации были доложены на научной конференции «Молодых ученых и научно-исследовательских учреждений сельского хозяйства республики», посвященной 70-летию Октябрьской . социалистической революции (Каунас, 1987 г,), а также на научных конференциях «Вклад молодых ученых и специалистов при интенсификации животноводства в республике» (Байсогала, 1988 г.), «Научно-исследовательская работа молодых ученых в животноводстве» (Байсогала, 1989 г.). Материалы диссертации экспонировались на Всесоюзной конференции «Физиология продуктивных животных» (Тарту, 1989 г.).
1.6. Объем работы. Диссертация изложена на 1)7 стра
ницах машинописного текста и состоит из введения, обзор 1
литературы, методики л результатов исследований, выводов,
практических предложений и списка литературы, который
включает 183 работы, в том числе 101 — иностранных ав
торов. Диссертация иллюстрированна 24 таблицами, 17 фо
тографиями и 5 рисунками.
Исследования проведены в Лаборатории технологии осеменения животных Литовского научно-исследовательского института животноводства и ветеринарии, на Капсукском межрайонном племпредприятии Литовской ССР, Щучинском госплемпредприятин Белорусской ССР.
Для исследований использовалось семя быков с подвижностью сперматозоидов не менее 7 баллов и их концентрацией не менее 0,8 млрд. в 1 мл.
В научно-производственном опыте искусственно осеменено 380 коров семенем быков, разбавленным ЛГЦЖ и ЛГЖ средами с добавлением комплексного санирующего препарата спермосана-ППК и* замороженным по разработанной методике.
Кормление и содержание животных соответствовало «Инструкции по организации и технологии работы станций
и предприятий по искусственному осеменению сельскохозяйственных животных» МСХ СССР, 1981 г.
Семя по подвижности оценивали под микроскопом на электрическом обогревательном столике и выражали ее в баллах (10 баллов—100% сперматозоидов с прямолинейно-поступательным движением — ГОСТ 20909.4-75). В опытах применяли смешанные и разделенные эякуляты.
Концентрацию сперматозоидов определяли методом подсчета в счетной камере Горяева либо при помощи фотоэлек-троколориметра (ГОСТ 20909.5-75).
Показатель абсолютной выживаемости (S) и выживаемости сперматозоидов в часах (ч) определяли по ускоренной методике при 38±0,5 С.
При сравнительном исследовании сред применяли препараты одной серии, отвечающие требованиям Государственной фармакопеи X издания и требованиям, отвечающим НТД.
В опытах по разработке среды количество легкогндролн-зуемого фосфора АТФ + АДФ в замороженном-оттаянном семени определяли по ГОСТ 20909.6-75.
Физиологическую резистентность семени определяли по устойчивости сперматозоидов к гипотоническим растворам хлорида натрия; устойчивость к холодовому шоку — по выживаемости сперматозоидов после их быстрого охлаждения до температуры 1—3 С, дегидрогеназную активность — по скорости обесцвечивания метиленовой сини, добавленной к семени по ГОСТ 20909.4-75.
Количество живых сперматозоидов определяли методом дифференциального окрашивания (ГОСТ 20909.3-75). Число, сперматозоидов с поврежденной акросомои оценивали с помощью акроскопического метода (И. И. Соколовская и др., 1981).
Температуру в хранилищах и соломинках в процессе замораживания измеряли электронными термометрами ТЭ-200М и ST-200.
Оплодотворяющую способность семени, криоконсервиро-ванного в оптимальных режимах с применением разработанной среды, проверяли в производственных условиях при осеменении коров.
Оценку оплодотворяющей способности семени проводили по фактической стельности, которую устанавливали при ректальном исследовании животных через 3 месяца после осеменения.
Результаты исследований обрабатывали биометрически по Н. А. Плохинскому (1961),
\