Введение к работе
Актуальность темы» Использование достижений генетики и селекции, новых биотехнологических приемов может существенно повысить продуктивность скота, обеспечить устойчивые рост производства продукции животноводства. Важное значение в этой проблеме отводится новому биотехі-:ологическому методу - трансплантации эмбрионов.
Основным направлением трансплантации эмбрионов в животноводстве является интенсивное использование генофонда высокопродуктивных животных, создание линий и семейств.
За последние годы в технологии трансплантации эмбрионов крупного рогатого скота достигнут значительный прогресс. 1ак, хирургическое извлечение'и пересадка полностью заменены нехярурги-ческиш способами. Разработана технология глубокого ааморажяваяия эмбрионов, позволяющая сохранять их неограниченное время.
Тек не менее в технологии трансплантации остаются и нерешенные вопросы. Слабым звеном все еще остается гормональное вызывание суперовуляции у коров. Около 3056 животных не реагирует на гормональную обработку или дают эмбрионы невысокого качества, или они отсутствуй! вообще. Для повышения эффективности метода, его необходимо постоянно совершенствовать, изыскивать более эффективные гормональный препараты и схемы их применения,
Приживлкеность эмбрионов после пересадки их реципиентам остается пока нестабильной, причины этого недостаточно ясны л требуют дальнейшего детального изучения.
Цель и задачи исследований. Цель работы.заключалась в сравнительной оценке действііл гормональных препаратов на уровень суперовуляции, число, одчцц'ги^^ЗД^в^еуость вежепо дуче иных н | . АУЧИАЯ БИБЛИОТЕКА
-ЛЙ. седьскохоз академии ^
- г -
эамороженно-оттаянных эмбрионов после пересадки, определении эли-яння некоторых факторов на эти показатели.
В соответствии с этим были поставлены следующие задачи:
выявить эффективность использования гипофизарного фолли-куяостицулирукцего гормона (ЗСГ-п) и стандартного препарата СЖК (фоддигон) при вызывании суперовуляции у коров - доноров амбрйо-ноб;
определить связь концентрации прогестерона и эстрадиола в крови коров-доноров перед гормональной обработкой с уровнем су-пвровуляции и качеством эмбрионов;
изучить влияние эндогенного и экзогенного прогестерона на : прнживляеыость эмбрионов у телок-реципиентов;
установить связь морфологических отклонений свеяелолучек-:нмс и занорояенно-оттаянных эмбрионов с их приживляемостью после
пересадки.
Научная новизна заключается в определении эффективности ги-пофкзарного фолликулостимулируюцегс гормона (ХГ-п) и стандартного препарата СЖ (фолдигон) при гормональном вызывании суперову-ляции у коров, изучении взаимосвязи концентрации прогестерона и эстрадиола в крови коров перед гормональной обработкой я телок-реципиентов перед пересадкой с уровнем овуляции, ҐАЧЄСТ80М смбря-онов и их прияивляемость». Внесены новые технические и технологические усовершенствования в методику оценки качества эмбрионов перед пересадкой и замораживанием.
Практическое значение работы состоит п выявлении более эффективных гормональных препаратов для вь;зыеания суперовуляцяи у коров-доноров, определении факторов, влияющих на прнмивлр.емость сье-Евполученаых и эааароядакно-оттаяншх эмбрионов при нехкрургичее-
кой пересадке.
Материалу исследований вошли в методические рекомендации по гормональному вызыванию суперовуляции,(1963, 1988), а также использованы в инструкции по трансплантации эмбрионов крупного рогатого скота (1987).
Апробация работы. Материалы диссертации доложены:
ка еяегодных ученых советах ВИЕа;
на научной конференции молодых ученых, ВНИИРІЇ, г. Пушкин Ленинградской "области Тиюнь,"'19вб'г"');" ' w
на симпозиуме по "Трансплантации эмбрионов у крупного рогатого скота", г. Тарту, Эстонский НИИдЗ (октябрь 1986 г.).
По материалам диссертации опубликовано 4 печатных работы.
Объем работы. .Диссертация изложена на III страницах машинописи, включает 20 таблиц, I схему и 9 рисунков. Состоит из введения, обзора литературы, материала и методов, результатов собственных исследований, обсуждения, выводов и практических предложений. Слисок использованной литературы содержит 188 источников, в том числе 150 иностранных.
Исследования проводились с 1983 по 1989 гг. на коровах и телках черно-пь~ --рой породы опытного хозяйства "Щалово" и в отделе трансплантации эмбрионов сельскохозяйственных животных ВИЕа.
В опыте по определению эффективности гормональных препаратов $СГ-п и СНК (фоллигон) при трансплантации было использовано 470 коров 4-10-летнего возраста^живой массой 550-650 кг с удоем 4-6 тыс. кг молока за лактазо. Реципиентами служили телки случного возраста с живой массой около 350 кг.
_ 4 -
Коровы-доноры и телки-реципиенты были клиничеокк здоровы, с нормальной физиологией половой системы. Гормональной обработке коров подвергали не ранее, чем через 60-90 дней после отела. Перед началом гормональной обработки учитывали состояние матки и яични-жов, наличие желтого тела.
Препарат СШ-фоллнгон вводили коровам на 10-12-й день астрального алела, однократно, в дозе 2500-3000 ИЕ внутримышечно, через 2 дня инъецировали простагландин в дозе СС-- маг. Охота у доноров наступала через 46 часов после инъекции препарата.
Фолликулостимулирущиы гормоном ФСГ-п обрабатывали на 8-й день астрального цикла по 5-дневной схеме, дваяды в день по 5 мкр, с імперіалом между инъекциями 12 часов, общая доза препарата составляла 50 мкг. Ні 4-й день обработки, утром, вводили 500 мкг кростагланднна.
к. ' В стойловый период охоту у коров выявляли один раз в сутки во время прогулки по рефлексу неподвижности, в пастбищный период 2 раза: утром и вечером.
Коров-доноров осеменяли 3 раза с интервалом между осемесенн-ями 12 часов эамороженно-оттаянкым семенем. За сутки перед вымы-вашмм эмбрионов ректально у коров определяли реакцию на гормональну» обработку путем подсчета желтых тел г яичниках. Наличие 1-2 желтых тел в яичниках рассматривали как отсутствие реакции на і гонадотропин.
С целью изыскания более эффективных препаратов для взывания суперовуляции у коров и увеличения выхода нормальных эмбрионов на донора было проведено на 251 корове* -'""чтание разных препаратов КГ зарубежного и отечественного производства в сравнении с препаратом ОК.
г _ * ,J ^-
Для вияснення взккосбязи кезду концентрацией прогестерона и эстрацаола в крови с уровнем гуперовуляции, качеством и приживля-емостьа эч-Зрионов пробы крови брали у 46 коров на 6-й день спонтанного цикла перед гормональной обработкой и у 00 телок-реципиентов перед пересадкой эмбрионов.
Определение горкоксз осуществляли радиоиммунологическим методом в лаборатории ВКИИРГЖ.
Извлекали эмбрионы нехирургическим методом на 7-й день, ре-эиновым катетером фирмы "Нойштедт",.
Обнаружение и оценку качества зародышей проводили в пластмассовых чайках Петри с помощь» бинокулярной пупы при І&-20- и IQO-150-кратно:.: увеличении.
Для выявления взаимодействия кежду донором, эмбрионом и ре-ір-лиектом были проанализированы результаты практического опыта трансплантации эмбрионов, проведенного на 712 телках-реципиентах.
Оснсрные цифровые показатели статистически обработаны по .П.!Леркурьезой (1964),