Введение к работе
Актуальность проблемы. Круг проблем, связанных с методом трансплантации ткани мозга у позвоночных, имеет важное экспериментальное и в перспективе медицинское значение, поскольку у млекопитающих и человека ткань ВДС обладает низкой способностью к регенерации.
Один из путей восстановления ткани ВДС после ее повревдения -совершенствование методов трансплантации нервной ткани CBjJbxkiund, steaevi,1934; 2as et ai., 1979 ), другой -разработка методов стимуляции процессов регенерации поврежденной ткани ЩС на клеточном и тканевом уровнях (Карлсон,1986; Полежаев,1981; Lund et al.,1983; Heural Regeneration,1987} Рег1оте,1983)„Многочислешш-ми исследованиями установлена возможность приживления нервных тканей эмбрионов и новорожденных в гомо- и гетеротопических участках головного и спинного мозга как у давородяеиных, так и у взрослых животных (Александрова,Полежаев,1982; Братин,Виноградова, 1981; Виноградова, 1984; Ваз,1985; Giroan,1.991; На11аз,1982}. Показано, что клеточные элементы трансплантатов (ТП) дифференцируются, а нейроны в ТП способны формировать двусторонние связи с мозгом реципиента (Брагин,1990; Castro et а1о,1985; Cheng F.-L. P. et аі.,198б).Удается не только аллотралеплавтацкя, но и ксено-траноплантация эмбриональной ткани мозга, хотя ксенотракспланта-ты показывают меньшую жизнеспособность (Кичигтша, Виноградова, 1988; Отеллин И др,,1965,1988; Уиопе et al.,1985) И со временем отторгаются.
Установлено, что нервные ТП могут восполнять недостаточность нейромедиаторов, гормонов, специфических ферментов, нейротрофиче-склх faicTopoB в мозге животных-реципиентов, следствием чего является коррекция патологических отклонений их поведения (Братин И др.,1984; ВЗогіїІша et al.,1982; Cunningham et al.,1987; Ferry, 1984). В последнее время внимание исследователей привлечено клиническими перспективами использования метода трансплантации нервной и нервно-экдокринной ткани (Виноградова,1990),
Надо отметить, что на фоне обилия исследований, посвященных анализу различных аспектов использования Тії для реституции поражений нигро-стриатной системы на модели экспериментального паркинсонизма ( Bjorklund et al.,1985; Olsoa et al.,1985; Hioux et al», 1991), значительно меньше сделано в направлении использования ТП при кортикальных повреждениях, а в области моторной коры такие
2 работы пока единичны ( Sorter et al.,t987$ Wallace,Hanisterger, 1984). Исходя из общего направления исследований, проводимых в те-чеіша длительного периода в .группа нейробиологии развития (Лешсов и др.,1976-1990), мниенью нанесения повреждения, сопровождаемого инъекцией ТП, была избраіа сенсомоторная область корн мозга.
Цель и задачи исследования. Целью настоящей работы явилось комплексное, с использованием поведенческих, электрофизиологических и гистологических методов, исследование последствиіі трансплантации неонатальной корковой ткани в полость, сделанную в паренхиме сенсомоторной области коры мозга у развивающихся и взрослых белпх крыс, В качестве конкретных задач исследования вибрали следующие:
-
Сравнение локомоции развивающихся крыс после разрушения участков сенсомоторной коры и введения ТП.
-
Анализ хода изменений двигательной функции у взрослых крыс после мульткфокальных пораженій и введения множественных ТП.
-
С целью расширения потеївдаашшх источников донорского материала использовали для пересадки корковухо ткань из гомологичных зон протнкшолояного полушария (гетеротоиическая трансплантация).
-
Элегстрофизиологжческая характеризация ТП в разные сроки: а) сравнение спонтанной и вызванной активности нейронов в ТП и в окружающей корковой, ткани, б) обследование ТП и окружающей мозговой ткани методом электрической юшростимуляцяи с регистрацией двигательных ответов (ДО).
-
Контроль общего состояния ТП и пограничной ткани между ТП и нормальной тканью мозга (интерфейса) с помощью метода Ниссля.
-
Гистологический анализ цитоархитектошки нейронов в ТП с помощью метода Гольдки.
-
Прослеяиваниэ динамики васкуляризации ТП с помощью шітракарди-альной перфузии красителя и метода Гольдки.
Научная новизна. В данной работе впервые проведена трансплантация неонатальной корковой ткани, в том число гетеротошгаеской, в сенсомоторную кору мозга у развивающихся и взрослых белых крыс.
Впервые выполнено длительное, до года и более, комплексное, мультдцисцпшшнарное (электрофизиологическое, морфологическое, поведенческое) исследование последствий разрушешш и трансплантации в сенсомоторной коре крысы.
Теоретическое и практическое значение работы. Проведенное комплексное исследование последствий трансплантации неонатальной корковой ткани во фронтальные области коры мозга у развивающихся и
взрослее белых крыс показало положительное воздействие корковых
ТЯ на окружающую мозговую ткань, предохраняющее ее от некротиче
ских и существенных дегенеративных изменений в зоне повреж
дения в коре мозга, и возможность множественной вкутрикозговой
трансплантации при культи^окалышх поражениях мозга, которые яв
ляются перспективой катода нейротрансплантации в восстановитель
ной нейрохирургии.
Апробация работа.
Осповкне материалы диссертации докладывались и. обсуждались на: ХУ Съезде Всесоюзного Оизиологического общества, Кишинев, 1987; Секции общей физиологии Ленинградского общества физиологов, биохимиков и фармакологов, Ленинград, 1988, 1990; Всесоюзно:.! симпозиуме "Трансплантация ткаїпі мозга шюкопитавдих", Пуцино, 1988; Международной конференции по биологии развития, Лейпциг, 1989; International Бугарооігмг "Plasticity end regeneration of the nex~ vous systea",Torino,Italy, 1990; Конференции "Доминантные меха-ішзмн. поведенческих адаптации", ЛГУ, Ленинград, IS90; III Всесоюзной конференции по пойронаукам, Киев, 1990; Soviet-Indian Symposium on iJourobiologyj Puschino, 1991.
Публикации. По теме диссертации опубликовано II работ.
Структура и объем диссертации. Диссертация включает Н8 стра-іпіц машинописного текста, 33 рисунка. Текст состоит из введения, обзора литературы, описания методик исследогашш, четырех глав результатов экспериментов, обсуждения результатов, выводов и указателя литературы, который включает 221 источник, из них 75 на русском языке.