Введение к работе
Актуальность проблемы.— В- нарушении репродуктивной функции
> млекопитающих, по-прежнему, ведущее место занимают пренатальные потери. Многочисленными исследованиями установлено, что у разных пидоп, имеющих существенную разницу в строении плаценты и сроках беременности, величина мрснатальной выживаемости (60-70%) и критические периоды эмбрионального развития сходны (Соколовская И.И., Миловании В.К., 1481; Roche J.F.. 1986; Lambert Е.М. -ex. al., 1990.) Несмотря на длительный период изучении причин, вызывающих снижение пренатальной выживаемости и разработки способов ее повышения, решение данной проблемы еще далеко до полного завершения.
В последнее время значительный интерес был проявлен к изучению возможной роли материнской иммунной системы в нормальном и нарушенном пренатальном развитии В первую очередь это было обусловлено обнаружение факта распознавания (независимо от типа плаценты) материнской иммунной системой антигенов зародыша отцовского гаплотипа. В настоящее время существует большое число иммунотроп-ных препаратов, способных осуществлять коррекцию иммунитета посредством изменения активности определенных звеньев иммунного ответа, что открывает новые перспективы хак в изучении роля иммунной системы сауки в нормальном и нарушенном пренатальном развитии, так и в разработке иммунологических способов повышения эмбриональной выживаемости. Другим важным аспектом в изучении роли иммунной системы самки в нарушении пренатального развития является выяснение возможного взаимоотношения вторичных иммунодефицитов и штаммов синегнойной палочки, контаминируюших семя производителей, в возникновении этой формы патологии. Решение данной проблемы имеет важное значение как для разработки научно-обоснованных норм ветеринарно-санитарного качества семени производителей, так н для разработки способов профилактики и лечения некоторых форм патологии репродуктивной функции у животных.
В настоящее врема при изучении иммунных взаимоотношений в системе "самка-зародыш" наибольшее распространение получили исследования на экспериментальных моделях (Chaouat G et. al., 1988, 1992; Clark D.A. et. al., 1989, 1992; Banwatt D. et. al., 1992). Возможность проведения этих исследований с использованием экспериментальных МО-целей на лабораторных животных обусловлена тем, что многократно эыло показано существование сходных иммунных взаимоотношений в :истеме "самка-зародыш" у животных независимо ни от строения пла-
центы, ни от сроков беременности.
Цель работы - определение взаимосвязи между активностью иммунной системы самки и нормальным пренлтальным развитием, выяснение возможности коррекции эмбриональной выживаемости посредством изменения иммунологической реактивности материнского организма, а также изучение возможной взаимосвязи вторичных иммунодефицитов и синегнойной палочки в возникновении пренатальних потерь.
Задачи исследований: 1. Определить влияние на эмбриональное развитие экспериментального угнетения иммунной системы у самок как с аллогенной, так и сннгенной беременностью. 2. Исследовать роль иммунных реакций самки в снижении эмбриональной выживаемости, обусловленной действием глюкокортикостероидов. 3. Разработать специфические (посредством иммунизации) способы предотвращения пренатальних потерь у самок (как аллогенно, так и сингенно спаренных) со вторичными иммунодефицитами. 4. Определить возможность использования иммуномодуляторов для коррекции эмбриональных потерь у самок с угнетенной иммунной системой. 5. Выяснить индукторы становления им-мунотрофической функции материнской иммунной системы как при аллогенной, так и сннгенной беременности. 6. Изучить биологические показатели, степень вирулентности и синтез факторов патогенності!, а также устойчивость к антимикробным препаратам штаммов синегнойной палочки, контаминируюших сперму быков-производителей. 7. С использованием экспериментальных моделей выяснить возможную взаимосвязь угнетения иммунной системы у самок и синегнойной палочкой в снижении пренатальной выживаемости. 8. Исследовать влияние на биологические показатели сперматозоидов (как in vitro, так и in vivo) естественной и искусственной контаминации спермы быков-производителей штаммами Ps.aemginosa с различной степенью вирулентности.
Научная новизна. Впервые на экспеиментальных моделях установлено, что угнетение активности иммунной системы как у аллогенно-, так и сингенноспаренных самок вызывает снижение эмбриональной выживаемости. В условиях аллогенной беременности это снижение происходит в начальный период плацентацин, а при сннгенной беременности пренатальные потери происходят, в предплацентациошшй период. С использованием дополнительной специфической сенсибилизации выяснено, что данное снижение эмбриональной выживаемости обусловлено нарушением иммунных взаимоотношений в системе "самка-зародыш".
Впервые выяснено, что первичными индукторами становления иммунных взаимоотношений в системе "самка-зародыш" являются при аллогенной беременности - антигены плазмы семени и живчиков, а при
сингенной - антигены живчиков.
Впервые показано, что обработка беременных (как сингенно, так
и аллоіемно) самок синтетическими—иммуномодуляторами, способными от
менять феномен иммунологической толерантности (индуцированный акти-
ваниеи неспецифических клсток-супрессоров, с которыми нередко
связывают нормальное пренатальное развитие) не только не увеличивает
величину пренатальних потерь, но предотвращает их у самок с угне
тенной иммунной системой. Таким образом, установлено новое научное
направление в разработке способов повышения пренатальной выживаемо
сти у самок - посредством обработки их синтетическими иммуномоду
ляторами.
На основе этих впервые установленных фактов, сформулировано новое теоретическое положение о том, что хтя нормального пренатального развития необходим иммунный ответ самки на антигены ранних эмбрионов.
Впервые показано, что ни искусственная, ни естественная контаминация спермы быков-производителей штаммами синегнойной палочки, обладающими высокой степенью вирулентности, а также синтезируюшимк различные факторы патогенности, не оказывает отрицательного влияния на выживаемость сперматозоидов in vitro.
Впервые установлено отсутствие взаимосвязи в возникновении пренатальних потерь между вторичными иммунодефииитами и штаммами синегнойной палочки (независимо от степени вирулентности и синтеза флктороз патогенности), контаминируюшими семя производителей. На основе этих исследований сформулировано новое теоретическое положение :> существовании у сперматозоидов и тканей половых путей коров и гелок тканевоспецифического конституционального иммунитета по отноше-іию к штаммам синегнойной палочки.
Практическая ценность работы. Разработаны экспериментальные мо-іели угнетения и восстановления пренатальной выживаемости посредством изменения активности иммунной системы самок (как при аллогенном, ак и сингенном спаривании). Данные модели могут быть использованы іри дальнейшем изучении как иммунных факторов, участвующих в юрмальком пренатальном развитии, так и при определении возможного заимодействия иммунодефицитов и микроорганизмов в нарушении эмб-іионального развития. Экспериментально обосновано использование как пецифической сенсибилизации (иммунизация лейкоцитами, либо плазмой пермы или сперматозоидами самцов доноров спермы), так и . синтети-еских иммуномодуляторов для предотвращения пренатальних потерь у шок со сниженной активностью иммунной системы. Показано, что
при разработке системы мероприятий по профилактике нарушений репродуктивной функции необходимо учитывать, что факторы, вызывающие снижение резистентности увеличивают прекатальные потери, вследствие нарушения иммунотрофического действия организма самки на зародыш.
Внедрение в практику. Обнаруженное нами отсутствие отрицатель
ного влияния на воспроизводительную функцию у животных (даже с
пониженной резистентностью) контаминации спермы быков-производителей
штаммами синегнойной палочки (независимо от степени их вирулентно
сти) было использовано при изменении ветеринарно-саннтарной оценки
качества спермы быков-производителей в изменении N I ГОСТ 26
030-83 "Сперма быков замороженная. Технические условия", а также в "Ветеринарно-санитарных правилах для племпредприятий (станций) и пунктов искусственного осеменения сельскохозяйственных животных" утвержденных ГУВ МСХ СССР от 29.12.90 года. Практическое использование на ряде племпредприятий в течение 5 лет новой оценки ветеринарно-санитарного качества спермы быков-пройзводителей с одной стороны подтвердило правильность теоретических положений, выдвинутых в диссертационной работе, с другой стороны увеличило выход спермы ценных в племенном отношении быков-улучшателей.
