Введение к работе
Актуальностъ теин. Открытие уникальных свойств и особенностей природных цеолитов привело к интенсивному использованию их в сельскохозяйственном производстве как в России, так л ва рубежом. Поэтому большую актуальность приобретает изучение биологических свойств цеолнтсодержалщх пород, исподьэуешх в качестве нетрадиционной кормовой добавки в промышленном животноводстве и птицеводстве. Ивсгочислеиными исследованиями показано, что одним из положительных свойств цеолитсодержашх пород является стимуляция нормального роста и развития как различных органов и тканей, так и организма в целом (Калачкш Г.И.,19SO; Карадлмн A.M..Чиркинян А.А.,1985; Намптон А. ,1988; Шпшна Л.А.,1990; Мухина Н.В.,1993; Николаев В.Н., 1988; Петункнн Н.И. ,1989; Фисияин В.И. и др. ,1990; Чачуха Ы.Д.,1992; Цхакая Н.Ш., Квашали H.ff., 1S85).
Проблема восстановительной терапии острых и скрыто протекающих струкгурно-функционадьЕых нарушений печени сельскохозяйственных тавотных в условиях промышленного гос шрещквания остается да-ш» иераэрешэнпои и поэтому представляется оправданным поиск новых способов стимуляции восстановительных процессов. 3 этом отношении задача восстановления функции к структуры почени при ее возрегяекиях объясняется ее исключительно важным значением в процессе 2Ш8недеятельноети. При лечении заболеваний печени природные цеолиты эасдужхвеж особого внимания, что объясняется их. кошлекс-пыы влиянием на организм, нетоксичностью, достаточной эффектив-еїсстья воздействия на процесс шдевар&вия, а тана» практически не-ограничевнаш запасами и относительной дешевизной сырья. Бее это открывает широкие вовмеяностн использования их 8 ветеринарии и ые-анцине.
Цель п вазачи нсег?д(пап?эт% Еельо нестоящи?; нсежщований явилась корфофуЕкциональнея оценка вдишгая природного цеолита Холиес-кого месторещценкя на Еосстаповитеяшш процессы в йвчеки на кодеин, токсического гепатита у лабораториях н е?лз>екхегійствевньв< жи-вотвых. Исходя из иэт исследоганий, smmmi вэзтеяпей работы таились:
1. Изучить морфефуяшюонаяьнеэ з?едаше печев» генераторных зівотішх с острым тотеїязсішм геввтиуеи при этепержэптш&яой фар-
- 4 -макотерапии природным цеолитом;
-
Изучить влияние четыреххлористого углерода на биоэлектрическую активность желудка (сычуга), двенадцатиперстной кишки и желчного пузыря у лабораторных и сельскохозяйственных животных.
-
Изучить влияние природного цеолита на биоэлектрическую активность органов пищеварения лабораторных и сельскохозяйственных животных с острым токсическим гепатитом;
Научная новизна. _В работе впервые дана морфофункциональная оценка влияния природного цеолита на состояние печени, желудка (сычуга), двенадцатиперстной кишки и желчного пузыря у лабораторных и сельскохозяйственных животных с CCU - гепатитом, при этом установлено: 1 - патологический процесс в печени кроликов и ягнят сопровождается угнетением биоэлектрической активности желудка (сычуга), двенадцатиперстной кишки и желчного пузыря; 2 - природный цеолит Холикского месторождения, введенный с кормом животным с токсическим ССІ4-гепатитом, оказывает положительное влияние на течение восстановительной регенерации в поврежденной печени белых крыс и кроликов, а также способствует более ускоренной нормализации угнетенной биоэлектрической активности желудка (сычуга), двенадцатиперстной кишки и желчного пувыря кроликов и ягнят.
Практическая ценность работы. Выполненная работа имеет теоретическое и прикладное значение. Полученные результаты исследований служат основанием для дальнейших поисков и разработок новых эффективных препаратов на основе природного цеолита с целью широкого внедрения их для лечения и профилактики заболеваний органов гепа-тобилиарной системы у сельскохозяйственных животных. Полученные данные о биоэлектрической активности желудка (сычуга), двенадцатиперстной кишки и желчного пузыря кроликов и ягнят позволяют судить о том, что метод электрографической регистрации является объективным способом оценки функционального состояния органов пищеварительной системы и может быть применен для определения эффективности лекарственных средств при патологии печени. Результаты проведенных исследований могут быть испольвованы при написании справочных пособий и рекомендаций по профилактике и лечению внутренних незаразных болезней домашних животных.
Положения, выносимиэ на защяту.
1. Экспериментальные данные, полученные с помощью гистологических, гистохимических и цитофотометрических методов исследова-
-'5 -
кия, свидетельствуют о том, что природный цеолит Холииского месторождения обладает способностью стимулировать восстановительные процессы в печени при остром токсическом гепатите у животных.
Z. Природные цеолиты Холкнского месторождения восстанавливают угнетенную моторную деятельность органов пищеварения желудка (сичуга) , двенадцатиперстной кишки и желчного пузыря) при остром токсическом гепатите.
Апробация работа. Основные материалы экспериментальных исследований доложены и обсуждены на: Научно-практических конференциях ветеринарного факультета Бурятского сельскохозяйственного института ( Улан-Удэ, 1990, 1992); Всесоюзной конференции "Гомеостатикз живых и технических систем" (Иркутск, 1939); Международной конфз-ренщш "Поиск новых лекарственных средств и их использование в клинике" (Чита, 1990); Всероссийской конференции "Экологическая патология: вопросы биохимии, фармакологии, клиники" (Чита, 1995); Научной сессии Бурятского научного центра, секция "Биотехнологии и биологически активные вещества" (Улан-Удэ, 1990); Республиканской конференции "Тибетская медицина: состояние и перспективы исследований" (Улан-Удэ, 1994).
Публикации. По теме диссертационной работы опубликовано 6 научных работ.
Структура и объем диссертация. Диссертационная работа излске-на на 149 страницах машинописного текста 15 состоит из вгэдения, четырех глав, выводов и списка литературы, включающего 299 источников, из которых 34 иностранных авторов. Работа иллюстрирована 10 таблицами, 3 графиками, 25 злектрогракмами, 9 фотографиями, 18 микрофотографиями, б гистограммами.
МАТЕРИМ й МЕТОДЫ ИСОЛЕДОШЕИЯ
Для оценки влияния природного цеолита sa вссстаяовитеяьнкз процессы в поврежденной печени во всех опытах испольвовалась экспериментальная модель токсического гепатита, полученная путем парентерального введения 50%-ного масляного раствора четыреххлорис-того углерода ( тетрахлорметана, ССЦ) однократно в объеме 0,6 мл/кг массы кроликам, 0,4 мл/кг массы - ягнятам и трехкратно через сутки в объеме 0,4 мл/кг - белым крысам. В качестве интакткого контроля служили животные, которым вводили одно подсолнечное мае-
- б -
до. Цеолитсодержащую породу Холинского месторождения (розовый туф) фракции 0,1 - 1,0 мм с содержанием природного цеолита (кли-jrton-іилолита) 60-70% давали животным с кормом ежедневно в течение 1 суток после введения тетрахлорметана: кроликам и ягнятам - в дозе 1 г/кг, белым крысам - в дозе 0,2 г/іООг живой массы.
Биоэлектрические сигналы исследуемых органов и монофункциональные показатели репаративкой регенерации печени научали на 3-й, 7-, 14- и 21-е сутки с момента последнего введения тетрахлорметана и начала экспериментальной терапия.
После взятия гистоматериала кусочки печени фиксировали в ЮХ-ном растворе нейтрального формалина. Депарафинироваиные гистологические срезы органа окрашивали по общепринятой методике гематоксилин- эозином (Меркулов Г.А.,1969), для оценки состояния пере-кисного окисления липидов выявляли содержание в печени пигмента липофусцина по Шморлзо (Лилли Р.,1969; Пирс Э.,1962). В гистологических срезах печени, окрашенных гематоксилин-эозиноы, подсчитывали количество митозов и двуядерных клеток. Митотический индекс виражали в промилле (2.).Для полного суждения об интенсивности клеточной пролиферации и гипертрофии мазки суспензированной ткани печени окраиивали по Федьгену (Хруст Ю.Р.,1978) на содержание ДНК в ядрах гепатоцигов. Концентрацию ДНК определяли на цитофотометре ШФ-К (Хруст Ю.Р.,1975). Стандартом диплоидного количества ДНК служило количество ДНК лимфоцитов этих же белых крыс, что позволило выявить клетки печени кратной (2п, 4п и т.д.) и промежуточной (2п -* 4п и т.д.) плоидности. По числу гепатоцитоз кратной шюид-ности судили об уровне полиплоидизации, а по числу гепатоштов промежуточной плоидности - об уровне клеточной пролиферации.
В свежезамороженных срезах печени, полученных на микро-том-криостате Ж-25 выявляли содержание гликогена ШИК-реакцией, нейтральных жиров - Суданом черным В, активность сукцинатдегидро-геназы (СДГ-аэы) и лактатдегидрогеназы (ЛДГ-азы) - по Нахдасу (Пирс Э.,1962).
Биоэлектрическую активность гладкой мускулатуры желудка (сычуга), двенадцатиперстной кишки и желчного пузыря графически регистрировали при помощи отечественного электрогастрсграфа ЗГС-4М. Для анализа полученных кривых с желудка (сычуга) - электрогастрог-рамм (ЭГГ), с двенадцатиперстной кишки - здеетродуоденограым (ЭДГ), с желчного пузыря - электрохолецистограмм (ЗХГ) определяли
- ? -
общий уровень биоэлектрической активности - ОУБА (усл. ед.), частоту импульсов в минуту - ЧИ, среднш величину амплитуды - СВА (мВ) по С.Ы.Лисозской (1958). Биометрическую обработку ре8ультатов исследований проводили по методу Стыодеита-Фишера в модификации Е.Е. Ыонцевичвте-Зрингене (1964), на ПЭВМ по программе "Статистика" для медико-биологических исследований (Алексеев С.А., 1993).