Введение к работе
Актуальность темы Трансплантация эмбриональной нервной ткани привлекает в последние годы пристальное внимание исследователей различного профиля - физиологов, морфологов, генетиков, нейрохими-ков и клиницистов. В рамках этого направления получены новые факты, необходимые для раскрытия механизмов нейрогистогенеза, миграции и дифференцировки клеток нервной ткани, механизмов реализации генетических программ в клетках в измененных условиях их развития (Александрова М.А, Полежаев Л.В., 1984; Виноградова О.С., 1985; Отеллин В.А., с соавт. 1984; Полежаев Л.В., 1985; BjorkJund A. et al., 1982; Das G.D., 1985; Gash D.M. et al., 1985).
В дальнейшем эти наблюдения были углублены и расширены в исследованиях ряда авторов, что послужило основанием для клинического использования модели нейротрансплантации с целью лечения нейроде-генеративных и нейроэндокринных заболеваний (Бехтерева Н.П., Отеллин В.А. с соавт., 1990; BjorklundA. 1991; и др.).
Накопленный опыт экспериментального и клинического использования нейротрансплантации свидетельствует о существовании ряда нерешенных вопросов в биологии развития клеточных элементов нервной ткани, касающихся реакций отторжения трансплантатов и участия в них различных форм глии, а также формирования морфофункциональных межклеточных взаимодействий, имеющих место при совместном культивировании разных структур мозга.
Цели и задачи исследования. Целью настоящего исследования явилось изучение характера развития и приживления клеток эмбриональной нервной ткани крыс различного возраста при разных способах ее алло-трансплантации в мозг взрослых животных.
В связи с этим в работе были поставлены следующие задачи:
I. Оценить значение васкуляризации донорского мозга эмбрионов для жизнеспособности нейрогрансплантатов у крысы.
-
Проследить динамику и условия развития различных типов гли-альных клеток (радиальной, астро-, олигодендроглии и эпендимы) в неиротрансплантатах.
-
Установить возраст донорской эмбриональной нервной ткани верхних шейных ганглиев, при котором нейротрансплантаты оказываются наиболее жизнеспособными.
-
Исследовать гистогенез нервной ткани при совместной трансплантации закладки черного вещества и стриатума.
Научная новизна. В настоящем комплексном исследовании основное внимание было сосредоточено на изучении особенностей развития эмбриональной нервной ткани различного возраста и факторов, способствующих лучшей выживаемости ткани в условиях её аллотранспланта-ции в мозг взрослых крыс.
Впервые с использованием глиальных маркеров обнаружено более раннее, по сравнению с развитием эмбриональной ткани in situ, появление астроцитов (трансформация виментин-иммунопозитивной радиальной глии в астроциты иммунопозитивные к глиальному кислому фибриллярному белку - GFAP) и ускоренная дифференцировка астроглии. Впервые установлено, что лишь при экспериментальном кольцевидном заворачивании трансплантируемых кусочков эмбриональной ткани вен-трикулярной поверхностью внутрь, удается закономерно получить образование эпендим ного слоя клеток во всех неиротрансплантатах. Новые данные получены в отношении значения выбора для трансплантации васкуляризированной донорской ткани (на стадии Е14). Именно такая ткань обнаруживала большую жизнеспособность по сравнению с ранней стадией развития эмбриона Е12, когда имеет место лишь начало васку-ляризации ткани. Впервые экспериментально обоснована пригодность аллотрансплантации зрелых симпатических верхних шейных ганглиев. Показано, что совместная ашютрансплантация эмбриональной черной
субстанции и стрнатума в мозг взрослых животных увеличивает число их успешных приживлений.
Научно-практическое зіичешіе. Настоящая работа относится к числу фундаментальных исследований, направленных на выяснение механизмов развития и днфференцировкн эмбриональной нервной ткани. Показан характер развития глиального и . сосудистого компонентов нервной ткани и их значение для жизнеспособности нейротранспланта-тов при разных способах их пересадки. Полученные данные о корреляции между сроками васкуляризации эмбриональной нервной ткани и её последующим приживлением при трансплантации, а также данные о возможности успешной пересадки зрелых симпатических ганглиев могут быть использованы исследователями в экспериментальных разработках, направленных на восстановление целостности поврежденного мозга.
Предложена модель аллотрансплантации эмбриональной нервной ткани для исследования морфо-физиологических особенностей нейро-глиальных взаимодействий. Она может быть использована для изучения эффектов воздействия биологически активных веществ на процессы днфференцировкн дофаминэргических нейронов и формирование функциональных свойств клеток-мишеней в котрансплантатах.
Апробация работы. Основные материалы диссертации были доложены и обсуждены на Съезде Венгерского Физиологического Общества (Печ, Венгрия, 1992); на 16-ом Ежегодном Конгрессе Европейской Ассоциации нейронаук (Мадрид, Испания, 1993); на Съезде Анатомического Общества Германии (Марбург, ФРГ, 1994); на 5-ом Международном Симпозиуме по Нейротрансплалтации (Шатене - Малабри, Франция, 1994); на Конференции Памяти Н.И. Зазыбина "Актуальные проблемы нейрогистологни и нейроонтогенеза" (Киев, Украина, 1994); на 1-ом Съезде Венгерского Общества по Нейронаукам (Печ, Венгрия, 1994); на 2-ом Съезде Венгерского Общества по Нейронаукам (Сегед, Венгрия, 1995); на Съезде Анатомического Общества Германии (Грац, ФРГ, 1995);
на 3-ем Съезде Венгерского Общества по Нейронаукам (Балатонфюред, Венгрия, 1996).
Структура и объем. Диссертация состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов исследования и изложения результатов собственных исследований, их обсуждения, выводов и списка цитируемой литературы. Работа изложена на 110 страницах машинописного текста, содержит 74 рисунка и 4 таблицы. Список литературы включает 210 источников.