Введение к работе
Актуальность проблемы. Одним из компонентов биологических нембран являются липиды. которые составляют от ЗО до 80Х их массы. Согласно современным представлениям данный класс биохимических соединений организован в мембране преимущественно в виде бислоя, Функция которого состоит в Формировании замкнутых барьеров типа плазматической мембраны и мембран внутриклеточных органелл. Свойства этих барьеров определяются прежде всего Физико-химическими характеристиками липидов (Финдлеп Д.. Эванз. . 1990).
Однако до недавнего времени практически не были исследованы так называемые минорные "необычные" липиды, к которым относятся ПАРЕ. LHAPE. nae, семилизобисфосфатидная кислота, фактор активации тромбоцитов. Мало что известно о их функциональной роли в биомембранах.
особое место среди указанных соединения занимают апильные производные фосфолипидов. считалооь. что жирные кислоты, соединенные с аминами,встречаются в природе в основном в сФинголипи-дах как часть их нерамидного (н-аиидсФингозинового) остова, а аминогруппы глицерофосфолипидов. таких как РЕ и PS, не ацилиру-ются через азот. Однако, в середине 60-х годов Бонстейн (Bomstein к.А.. 1965) выделил н-ацилФосФатидилэтаноламин (ПАРЕ) и соответствуюпий лизофосфолипид (LHAPE) из пшеничной ну-ки, а дальнейшие исследования показали его наличие у высших Растений и микроорганизмов.
Чрезвычайно важными и интересными свойствами обладают нета-болиты Н-апилированных фосфолипидов - н-аиилзтаноламины, на которые исследователи обратили внимание еше в 50-х годах (Long. D. А. і 1950, Ganley о. Н.. 1958). Оказалось, что минорные липидные компоненты обладают широким спектром биологических и Фармакологических свойств.
В работе приняты следующие сокращения: КАЕ - Н-аиилэтаноламин. РЕ - ФосФатидилэтаноламнн. PS - ФосФатидилсерин. FC - Фосфатн-дилхолин. PI - фосфатидилинозитол.
- г-ЭФФект действия ацильнык производных этаноламина на транспорт катионов в тканях млекопитающих был обнаружен недавно (Epps D. Е. е. а, 1961). этот процесс изучен не в полной мере. Объектом наших исследования являлись клетки неиробластомы, в которых при диФФеренцировке увеличивается количество каналов, принимающих участие в транспорте катионов, что сопровождается одновременный изменением липидных компонентов в клетке, липиды, -в свою очередь, могут принимать участие в транспорте катионов. Изучение этих процессов будет способствовать расширению представлений о Физиологическом действии N-ацилэтаноламинов.
Цель и задачи исследования. Исходя из того, что NAPE и NAE были обнаружены в клетках неиробластомы, была поставлена цель: изучить содержание, субклеточное распределение и обмен этих соединений в клетках неиробластомы, их влияние на транспорт катионов через плазматическую мембрану.
Непосредственными задачами были следующие:
исследовать изменение содержания NAPE, LHAPE и NAE в процессе диФференцировки;
изучить распределение N-ацилэтаноламинов по субклеточным фрак, циям клеток неиробластомы.
определить степень влияния этих минорных липидов на транспорт катионов через плазматическую мембрану в дифференцированных и незрелых клетках.
исследовать возможные пути деградации и метаболизма "необычных" липидов.
в опытах, проведенных на клетках неиробластомы и на животных, выяснить биологическую роль данных соединений.
научная новизна, в клетках неиробластомы слзоо N18 впервые обнаружены минорные липидные соединения Н-ацилэтаноламшш, исследованы пути их метаболизма. Установлены отличия ФосФолипид-ного состава клеток неиробластомы в процессе диффєрєнцировки. Показано влияние N-ацилэтаноламинов на транспорт рубидия-йб в этих клетках, вход кальция-45 в Фосфатидилхолиновые липосомы. Обнаружено, что указанные соединения влияют на' процессы переписного окисления как в клетках неиробластомы, так и в субклеточных «Гікцачх. Экспериментально доказано действие ПАЕ на реакции ме-
- з -тастазирования в условиях in vivo.
Практическая значимость. Получение данные, касающиеся проявляемого Н-аиилэтаноламинами антиоксидантного и, соответственно, связанного с ним антиметастатического эффекта, перспективны для последующего внедрения этого соединения в медицинскую практику (создание новых лекарственных препаратов, разработанных на основе минорных липидных компонентов - NAE).
Апробация работы и публикации. Результаты исследований доложены и обсуждены на:
- конкурсе молодых ученых института биохимии АН Украины,
Г. Киев, 1988 г. і
IV Всесоюзном симпозиуме "Липиды биологических мембран", Черноголовка, декабрь, 1939 г. ;
III Всесоюзной конференции по нейронаукам, г.Киев, 1990 г.
- конференциях лаборатории биохимии клеточных культур, г. Киев,
1991 г.
По теме диссертации опубликовано 5 работ..
Структура и объем диссертации. -Диссертация состоит из введения, трех глав обзора литературы, описания методов исследования, трех глав экспериментальных исследований, их обсуждения, заключения и выводов. Список литературы содержит 172 источника (32 отечественных и но зарубежных, ) работа изложена на 137 страницах машинописного текста. Текст диссертации иллюстрирован Ю'таблицами и 7 рисунками.