Структурно-функциональное состояние эритроцитов и перекисное окисление липидов у больных артериальной гипертензией Хусаинова, Леонора Нурфаизовна

Введение к работе

Актуальность темы; Артериальная гипертония (АГ) относятся к числу наиболее распространенных заболеваний сердечно-сосудастой системы, является ведущим фахторйм риска по отаошенню к атерооклерозу, ишемической болезни сердца, сердечяой недостагочносга (И-КЛВхванабая, 1986, ЕЛЧазов, 1989). По даняьш Всемирной организации здравоохранения (1978) у 12-15% всего взрослого населения отмечается повышение артериального давления (АД).

Широкая распространенносгь, неуклонный рост забояеваемости, увеличение удельного веса среда больных лиц молодого возраста диктуют необходимость изучения вопросов своевременной диагностики и профилактики АГ.

Несмотря на давность изучения и большое количество исследований, причины развитая заболевания окончательно не раскрыты. Одним из малоизученных вопросов является структурно - функциональное состояние эритроцитов, связь с агрегарующей функцией тромбоцитов и перекисным окислением лигдадовубольншсартериальнойпшертонней.

Являясь одним из форменных элементов крови, эритроцит
обеспечивает ее антиокислнтельный потенциал, снижает интенсивность
процессов свободно-радикального окисления липидов, участвует в инактивации
перекисей различного строения (Воскресенский ОЛ., 1981; Inri S., Toht F.,
1984). . ~~

1mm обр^о^пссп,доьгтссгруктурш>4ут^опт>ис^со<п^ эритроцитов, состоянья оксвдашно-ангиоксидавтных систем, агретации тртмбоцитов может способствовать конкретизации представлений об адагттациошю-ко'.тенсаторБік процессах и дисфункциях, развивающихся у больныхАГ.

Цель исследования: Оценка оруїсгурно^ункциональншс свойств эритроцитов, изменения агрегация тромбоцитов н состояния оксиданшо-антиоксидантной системы у больных артериальной пшертензией.

Задачи иссдедования: У больных артериальной гицертеюией в завясиыосхи от уровня артериального давления:

1. Изучить струиурно^ункционаяьное состояние клеток красной крови путем определения количества эритроцитов и их объема, общего и внугризритроцитарного содержания и концентрации гемоглобина.

2. Оценить состояние эритроцитарной мембраны на основании определения кислотной и осмотической резистентности.

3. Исследовать функциональное состояние тромбоцитов путем определения спонтанной и ивдуцированной агрегации.

4. Определить в эритроцитах активность перекисного окисления липидов по уровню веществ, реагирующих с тиобарбигуровой кислотой и состояния ферментативного звена антиоксидантной защиты по активности супероксиддисмутазы эритроцитов и каталазы крови.

Научная новшна: В настоящей работе проведена комплексная оценка важнейших сторон структуры и функции зратроцитов у больных с артериальной гишртензией, включающей параметры стабильности мембраны и кислородотранспортной функции, агрегации тромбоцитов, оксидантно-антиоксидаатной сисгемы эритроцитов. Установлено, что течение артериальной гипертензш сопровождается изменениями со стороны как эрнгроцитарного, так и тромбоцитарного звеньев реологии крови, выраженность которых зависит от уровня повышения артериального давления. Выявлено увеличение количества эритроцитов крови и их объема, общего и внугрюритрощггарного гемоглобина, уменьшение кислотной и осмотической резистентности мембраны эритроцитов, повышение реактивности тромбоцитов и их чувствительности к индукторам агрегации.

Показано, что у женщин в постклимактерическом периоде с АГ риск тромбогенеза и нарушения МЕкроциркуляции крови выше, чем у мужчин аналогичного возраста.

Установтевы особенности изменения ферментативного звена антиоксидантной защиты в эритроцигах. При мягкой артериальной пшертензии

выявлено снижение активности супероксиддисмугазы до 89%, при тяжелой артериальной гииергензиии - до 60% от уровня здоровых лиц. Статистически значимое снижение активности каталазы зафиксировано лишь у больных с тяжелой формой повышения артериального давления и составило 80% от контрольного значения, что косвенно свидетельствует о превалировании роли супероксидного радикала в формировании функционально-метаболических изменений клеток крови при артериальной гипергензии.

Анализ показателей структурно-функционального состояния эритроцитов, тромбоцитов, оксидантао-антиоксидантпой системы у больных артериальной гипертегоией с различным уровнем артериального давления нозЕолкл проследить аспекты патологического продесса на молекулярном: уровне и выделить некоторые особенности в каждой из анализируемых вариантов течения гипертензии.

Практическая значимость: Показана целесообразность комплексного исследовання структурных и функциональных показателей эритроцитов и агрепщиошой способности тромбоцитов, сопряженных с состоянием оксидантно-антноксидантной сисгемы эритроцитов при артериальной гипертонии в зависимости от уровня артериального давления, юзраста больных, длительности заболевания.

Ряд изученных показателей, как кислотная и осмотическая резистентность эритроцитов, содержание ТБК-реагирующих веществ, активность каталазы и супероксиддисмугазы, предложены использовать как критерии в ранней диагносгики прогрессирования патологического процесса, оценки тяжести течения заболевания.

По материалам диссертационной работы оформлены два рационализаторских предложения:

1. «Метод ранней диагностики дестабилизации мембраны у больных артериальной гипертонией». Зарегистрирован под № 2017 от 3 февраля 1999г. Метод внедрен в практику поликлиники городской клинической больницы №6.

2. «Способ ранней диагностики н профилактики тромбогенеза у больных артериальной гипертонией».- Зарегистрирован под № 2021 от 23 февраля 1999г. Метод внедрен в практику городской клинической больницы №13.'

Внедрение в практику здравоохранения: Все апробированные методы исследования структурно-функционального состояния и степени активности перекисного окисления липидов эритроцитов, агрегации тромбоцитов, внедрены в кшпшко-лабораторную службу городской клинической больницы №>5.

Основные положения, выносимые на защиту;

5. При артериальной гипертензии наблюдаются' изменения структурно-функционального состояния эритроцитов в зависшмосги от уровня артериального давления, пола, возраста больных и длительности заболевания.

6. У больных артериачьдай гипертешией изменяется чувствительность мембран эритроцитов к ионам водорода и тоничности среды.

7. Степень нарушения агрегационной функции тромбоцитов при артериальной гипертензии, выражающаяся повышением их реактивности и чувствительности к индукторам агрегации, зависит от уровня артериального давления, пола больных и проявляется симптомами гиперкоагуляционных сдвигов.

8. Установлены особенности формирования ангиокевдантной защиты эритроцитов в условиях активации перекисного окисления липидов при артериальной гапертепзни, проязляющиеся превалирсванисм роли супероксидного анион-радикала в развитии патологического процесса.

Апробация работы: Материалы диссертации доложены на 1-ом конгрессе ассоциации кардиологов стран СНГ (май 1997г., Москва), научно-практической конференции молодых ученых БГМУ (май 1998г., Уфа), заседании общества кардиологов Республики Башкортостан (ноябрь 1998г., Уфа). Апробация диссертации прохала на совместном заседании кафедры биоорганической и клинической химка с курсом лабораторной диагностика

ИПО, кафедры внутренних болезнен №1 и кафедр терапии и кардиологии ИПО (ноябрь 1998г., Уфа).

По материалам диссертации опубликовано 5 работ.

Объем и стр\кгуиа днссертапнн: Работа изложена на 139 страницах машинописи на русском языке, иллюстрирована 42 таблицами и 23 рисунками. Диссертация состоит го введения, обзора литерат5ры, описания материалов и методов исследования, результатов исследований, обсуждения результатов, заключения, выводов, практических рекомендации и списка литературы, содержащего 246 источников, из них 136 - отечественных и 110 - иностранных

Работа выполнена на кафедре биоорганической и клинический химии с курсом лабораторной диагностики ИПО (зав.кафедрой профессор, д.м.н. Давлетов Эт\), кафедре внутренних болезней №1 (зав. кафедрой профессор, д.м.н. Мингазетдияова Л.Н.), Башкирского государственного медицинского укиверситета (ректор профессор, д.м.н. Тимербулатов BЛЇ.), херапевтических отделениях городской клинической больницы №6 (гл. врач Волгарев А.В.). МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

В основу работы положены результаты обследования 100 больных (48 мужчин и 52 женщин) артериальной гипертензией различной степени тяжести, находившихся на стационарном лечении в терапевтических отделениях городской клинической больницы №6 в возрасте от 29 до 65 лет. Средний возраст обследованных составил 47±4,25 лет.

Исследование проводилось в комплексе с общеклиническим обследованием, которое включало измерение АД на атечевой артерии методом Короткова (за истинное принималось наименьшее значение при 3-х кратном измерении), лабораторные методы: общий анализ крови с лейкоформулой, общий анализ мочи, пробы Нечипоренко, Зимницкого, Реберга-Тареева, бактериологическое исследование мочи; биохимические показатели крови с определением ляпидного спектра (общее содержание липидов, холестерина, триглицеридов,13-лшолрогеидов), общего содержания белка, электролитов (К⁺,

Na⁺, Ca²⁺), уровня глюкозы, креатшшаа, мочевины, протромбина, ІГГИ; электрокардиографию, рентгенографию органов грудной клетки, УЗИ органов ^рюшнон полости, исследование глазного дна, по показаниям -рентгенографию череда, эхокардиографию, дан нсключения нефрогешюй пшергенаш - экскреторную урографяю н радноюогопную ренографию.

Все бальные были проконсультароваяы эндокринологом, невропатологом для исключения смежной патологии.

Из исследования были исключены больные с заболеваниями почек, поражением печени, эндокринных органов, гематологическими заболеваниями, ишемической болезнью сердца.

При отборе больных учитывалось отсутствие регулярного приема гипотензивных и других лекарственных средств.

Контрольную группу составили 20 практически здоровых лиц обоего пола в возрасте от 25 до 55 лет (средний возраст 45,8±5,21) без признаков сердечно-сооудистай патолйгии, заболеваний почек, эндокринной системы.

Забор крови из локтевой вены для биохимических исследований и из пальца для определения морфологических показателей эритроцитов производился утром, натощак, в течение суток с момента поступления больных на стационарное лечение. С целью предутфеждения коагуляции использовался гепарин в дозе ОД мл (1000 ЕД) на 10 ыл крови, 3,8% цитрат натрия и 1,34% оксалат натрия в объемном соотношении 1:10.

Все больные были разделены на три группы, в зависимости от уровня диастодического артериального давления в соответствии с классификацией ВОЗ (1978): с мягкой, умеренной и тяжелой артериальной гшгертензией.

В 1 группу вошли 35 пациентов с мягкой артериальной пшертензией (МАГ), из ннх 16 мужчин и 19 женщин, средний возраст 40,8±4,91. Среднее значение АД составило' 150+11,11/93±6,93 мм. от. ст. Вторую группу составило 35 человек с умеренной АГ (УАГ), из ких1б мужчин и 19 женщин, средний возраст 48,7±5,01 лет. Среднее значение АД составило 180±9,09/105,6±6,95 ММ рт. ст. Третью группу составили 30 человек с тяжелой АГ (ТАГ). Средний

возраст - 52,9±6,85 лет, 14 мужчин и 16 женщин. Среднее значение АД

составило 211,6+10,3/120,5±4,45 мм. рг. ст.

Больные были распределены по длительности заболевания (до 5 лег,

от6доЮлет; >10лет) и по возраст/(30-39 лет; 40-49 лет;>50 лет).

Настоящее исследование проводилось в следующих направлениях: а) определение функционального статуса эригроцитов по состоянию

мембраны - путем изучения кислотной, осмотической резистентности и объема

ЭР, по состоянию гемоглобина - исследованием содержания его в крови,

концентрации и содержанию в каждой клетке;

п"\ ітгтпггтстличттт.нпр rnr^-nqvrvif» ттипчплттитпп _ тгутрм пттп*»ш»ттр*та-<г

спонтанной агрегационной способности и индуцированной АДФ, серотонином, коллагеном;

в) оценка состояния оксидангао-антиоксидантной системы - путем определения уровня ТБК-реагирующнх продуктов эритроцитов, активности суиероксиддисмутазы эритроцитов и каталазы кровн.

Определение показателей красной крови осуществлялось на автоанализаторе «Система 9000» (фирмы Seronna diagnostic, США). Кислотную резистенность эритроцитов определяли методом И.И.Гятельзона, И.А.Терскова (1959) с построением киолотных эритрограмм. Осмотическую резистентность эритроцитов изучали по методу Waugh (1938) и Asherman (1955) Б модификации НЛ.Василевской (1958) с построением кривых гемолиза.

Исследование агрегацнонной функции тромбоцитов производилось на двухкаиальном лазерном анализаторе агрегации тромбоцитов, модель 230LA научио-производственной фирмы БИОЛА. Изучалась: спонтанная агрегация тромбопитов; индуцированная 0,5 мкМ АДФ; 5,0 мкМ АДФ; 5,0 мкМ 5-ОТ (серотонином); колпагеном.

Уровень ТБК-реагирующих веществ эритроцитов определялся по методике, разработанной И.Д.Стальнон, Г,Г.Гаришвили, (1987). Активность каталазы измеряли по методу А.Н.Баха, С.З.Зубкова, (1963). Активность супероксиддисмутазы эритроцитов определяли методом Fried (1975).

Статистическая обработка произведена на ЭВМ Pentium II с использованием пакета программ Microsoft Office 1997.