Введение к работе
Актуальность проблемы.
Состояния, при которых наблюдается массивное поражение печеночной ткани, сопровождающееся глубоким угнетением метаболических процессов и, соответственно, нарушением функций всего организма, часто встречаются в современной медицине. Причины их могут быть различны: обширная травма, удаление значительных участков печеночной ткани при массивных резекциях, развитие острых некрозов вследствие ишемии или токсических поражений органа. Последние стоят на одном из первых мест по своей клинической значимости вследствие тяжести поражения печени и распространенности. Летальность при подобных состояниях, особенно при развитии острой печеночной недостаточности и печеночной комы, остается на чрезвычайно высоком уровне и достигает 70-90 (Губский Ю.А.,1989). Современные методы лечения (в/в инфузии, обменное переливание крови, гемодиализ, гемосорбция, лимфосорбция и др.), направленные на дето-ксикацию организма и улучшение функции пораженной печени, не всегда эффективны, поскольку не влияют на одно из начальных звеньев патогенеза заболевания, а именно - снижение количества функционирующих гепатоцитов.
Вместе с тем, в подавляющем большинстве случаев изменения в печеночной ткани не носят необратимый характер. В основе этой обратимости лежит способность печени выполнять свои функции по поддержанию гомеостаза минимальным объемом функционирующей паренхимы, а также восстанавливать утраченную массу гепатоцитов при определенных благоприятных условиях.
Перспективным направлением в терапии состояний, сопровождающихся потерей значительных участков функционирующей паренхимы пе-
чени, является использование природных факторов роста печени или их искусственных аналогов для ускорения репаративной регенерации печени.
Однако, до сих пор исследования в данной области были ограничены рамками эксперимента, поскольку использовались полуочищенные факторы роста (Сванадзв Н.Л.,1984, Francavilla A.et al.,1986, Zhigiang Y. et al.,1990). Использование индивидуальных веществ -промоторов пролиферативной активности гепатоцитов в большой степени ограничивается сложностью и высокой стоимостью их получения.
Необходимость поиска новых соединений, обладающих способностью эффективно стимулировать репарацию печеночной ткани при ее поражении определяет актуальность использования с этой целью синтезированных аналогов одного из факторов роста печени, обнаруживаемого у животных и человека и являющегося альбумин-бшщрубино-вым комплексом (Diaz-Gil J.J. et al.,1987, 1989). Цель и задачи исследования
Целью настоящей работы явилась оценка репарирующей активности альСумин-билирубинового комплекса при токсическом поражении печени крыс и возможности разработки на его основе препаратов для лечения заболеваний печени.
Для достижения поставленной цели необходимо было решить следующие задачи:
-
Синтезировать ковалентний и нековалентный комплексы билирубина с сывороточным альбумином животных и человека.
-
Оценить активность биосинтеза ДНК и белка у крыс после 30% ГЭ под влиянием препаратов альбумин-билирубинового комплекса.
-
Изучить влияние препаратов альбумин-билирубинового компле-
кса на микросомальную монооксигеназную систему печени крыс при токсическом поражении печени, вызванном четыреххлористым углеродом.
-
Оценить действие препаратов альбумин-билирубинового комплекса на активность сывороточных ферментов у крыс при токсическом поражении печени, вызванном четыреххлористым углеродом.
-
Исследовать участие препаратов альбумин-билирубинового комплекса в процессах биосинтеза ДНК и репарации повреждений ДНК в печени крыс при токсическом поражении печени, вызванном четыреххлористым углеродом.
Научная новизна и практическая значимость работы.
Научная новизна работы заключается в том, что впервые проведено сравнительное изучение репарирующей активности полученных в лабораторных условиях аналогов природного фактора роста печени -нековалентного альбумин-билирубинового комплекса и альбумин-би-лирубинового конъюгата. Выявлена зависимость репарируюдей активности от вида связывания альбумина и билирубина в комплексе. Впервые показано, что препарат нековалентного альбумин-билирубинового комплекса при однократном в/в введении способствовал репарации поврежденных мембран и восстановлению состава и функциональной активности ферментов монооксигеназной системы микросом печени у крыс с токсическим гепатитом, индуцированным четыреххлористым углеродом. Показано, что введение препарата крысам приводило к эффективной репарации однонитевых разрывов в ДНК, вызванных действием гепатотоксина.
Результаты исследований, полученные в работе, являются экспериментальным обоснованием для разработки лекарственного препарата на основе альбумин-билирубинового комплекса для лечения за-
болеваний печени.
Апробация работы. Результаты проведенных иследований и положения диссертации докладывались и обсуждались на совместных научно-практических конференциях кафедры биохимии МВФ РГМУ им. Н.И.Пирогова и лабораторий Института биомедицинской химии РАМН (Москва, 1992, 1993) и на 7-й международной конференции "Цитохром Р-450: биохимия и биофизика" (Москва, 1992).
Публикации. По теме дисертации опубликовано 4 печатные работы. Объем и структура работы. Диссертационная работа изложена на ... страницах машинописного текста и состоит из введения, аналитического обзора литературы, методического раздела, главы, содержащей изложение результатов исследования и их обсуждения, заключения, выводов и библиографического указателя, включавдего ... источников. Работа содержит 5 таблиц и 13 рисунков.