Введение к работе
Актуальность теш. В последнее время пристальное внимание припекают системы метаболизма ксенобиотиков в организме животных,. го связано с іштенснфикацией применения разнообразных искусствен-и: ых соединений з качестве пестицидов, лекарственных препаратов,
такае с возрастающим загрязнением окружающей среды отходами про-зводства. Б соответствующие системы метаболизма входит и систе-а глутатионтрансйераз (Ш 2.5,1-18, ГГ), занимающая одно из кдю-эвых полонений в биотраксйормаяии чуаероднкх соединений. ГТ ка-аяизирует нуклеофишьные реакции восстановленного глутатиона (Г-sH)
широким кругом электроРильнш: соединении: замещение подвижных томов л группировок; прямое присоединение Г-sK по кратным связям
с расцеплением окскрановых мостиков; восстановление гидроперз-исей и эндопероксвдов до соответствущпх спиртов; изомеризация миграция двойкой связи, пис-транс-нзомерлзация относительно еойной связи); нптроредуктазные реакции; тиолиз. С индукцией ГТ о многих случаях связано развитие резистентности членистоногих
пестицидам и снижение эффективности лекарственных препаратов
организме человека и зпзотных. Регуляция активности зтого фер-єнта в организме осуществляется множеством способов.. Однако с очки зрения практического применения особый интерес предстазля-т синтетические ингибиторы и активаторы фермента, которые позво-или бы подавлять или активировать метаболизм ксенобиотиков ж ем самым снижать ии повышать устойчивость к ним .организма.
то so время-набор зййектїівнкх и специфичных ингибиторов ГГ на энный момент ограничен, и, что самое главное, одгосторонен: очтп все они представляют собой нереакшонносшсобнне аналоги -sH либо второго, электрофильиого субстрата. Поэтому актуальны ледуэщле задачи:, исследование механизма взаимодействия ГТ с ив-нбиторатлі: расширение круга ингибиторов фермента за счет новых лассов соединений; решение вопроса об избирательности этих ин-
ЕбИТОрОВ.
Цель и основные задачи работы. Целью работы является выявление ходств и различий ГТ из двух источников - злаковой тли (фермент оторой ранее не изучался) и печени крысы, при помощи ингибиторов ового, неизученного класса азиззінов. Б ходе работы были поставлены сдедущие конкретные задачи: I. Дать субстратно-пнгнбиторнуо характеристику ГТ злаковой тли . печени крысы.
-
Установить -дахашзг. действия ингибиторов нового типа азшинов.
-
Определить степень избирательности субстратов и ангнб; для ГТ злаковой тли и печени .красы. .
Научная новизна. Впервые изучена суйстратно-ингибиторная циничность ГТ цитрзольной фракции гошгената злаковой тли. I чены в качестве эффекторов ГТ из двух источников представите нового класса алектронейтральннх полиазотистых 1,3-дшюлей -азтазп-юв. Установлено, что в растворе "роисходат коиплексооС зование иекду Г-sH и азшянами, и тленно эти комплексы обла? наибольшим ингибйрующЕИ действием на ГТ. Обнаружено, что 1-е Емвдоазншны претерпевают каталитическое разложение под дейс Г-SH и других тиолов. Обнаружен принципиально новый тип peas катализируемой ГТ - н-дезокигенирование n-оксидов, разработ метод ее измерения. Впервые кинетически дифференцирована акт кость ГТ, ответственная за тдаго-з п-НЕтрофенилацетата, от т. глутатпон з-арилтрансйеразной активности ГТ печени крнсы. В леки сходства и различия двух йегалентов при помощи ггошщипиа новых ингибиторов п субстратов.
Научно-практическое.значение. Данные о сходствах и разліга двух ферментов ыогут быть использованы в поисках ингибиторов еого класса, которые могли бы служить,синергистами пестипидш и/или пролонгаторааи действия лекарственных препаратов. На о< реакции Е-дезоксигенирования резазурина разработан новый мете колориметрического определения активности ГТ.
Апробация работы.Магериаяы -диссертации докладывались на Вс союзном семинаре "Химия физиологически активных соединении" (Черноголовка,. 1989), на X съезде Всесоюзного энтошлогическс общества (Ленинград, 1989), па конференции молодых ученых "Сс ременные проблемы получения лекарствешшх препаратов" (Ленинг 1990). По материалам диссертации опубликовано 5 работ.
Объем и структура работы. Диссертация изложена на стра машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы пяти глав с изложением экспериментальных данных, обсуждения р зультатов, выводов и списка литературы (214 работ).В работе п ведено рисунков и таблиц.