Введение к работе
Актуальность исследования. Существует поразительное единство биохимической организации в пределах всего органического мира, возникшее в результате эволюции биомолекул от появления клетки до сложной и целостной системы многоклеточного организма. Это явление носит название биохимической универсальности. Известны многочисленные примеры идентичности функциональных блоков как у близких организмов, так и стоящих на разных уровнях эволюционной лестницы. При этом обнаруживается сходство функциональных белков, осуществляющих одноименные функции у многоклеточных и одноклеточных, у высших эукариот и прокариот (Уголев,1982, 1989; Перцева, 1990).
Отмечено, что в ряде биохимических систем эволюция совершается с одинаковой последовательностью в разных филогенетических ветвях. В итоге это даёт и некоторый общий онтогенез.
Биологическая роль специфических белков беременности до настоящего времени остается мало изученной. Установлено, что, во-первых, они обладают иммуносупрессивной или иммуномодулирующей активностью для поддержания статуса нормальной беременности. Во-вторых, для некоторых представителей этой группы белков описана связь со стероидными гормонами, фактором роста и другими биологически активными веществами (Терентьев,1988-1999). Имеющиеся литературные данные носят характер результатов исследования функции этих белков in vitro. Но по каждой из точек зрения имеются неоднозначные результаты и окончательное решение вопроса о биологической роли возможно лишь в опытах in vivo.
В этих целях необходимо обнаружение аналогов белков беременности у лабораторных животных. Подобные попытки предпринимались отечественными и зарубежными исследователями: Кривоносов С.К. (1985-1988), Зорин Н.А. (1990-1995), Т-М Lin, S.P. Halbert (1976-1978), Inaba (1981). Однако завершенных работ по этой проблеме не выявлено.
Цель исследования: Изучение общих закономерностей и различий в спектре фетоплацентарных, сывороточных и тканевых белков человека и обезьян, а также определение физико-химических параметров некоторых межорганных тканевых антигенов.
В задачи исследования входило:
-
Обнаружить аналоги сывороточных белков человека, в том числе белков беременности, в крови обезьян Масаса Rhesus, Масаса Cynomolgus, Масаса Fascicuiaris (резус, яванская, ла-пундер).
-
Идентифицировать специфические белки плаценты человека - трофобластспецифический бета-глобулин (ТБГ) и плацентарный лактоген человека (ПЛЧ) - в биологических объектах от обезьян.
-
Изучить белковый спектр экстрактов тканей органов, в том числе плаценты, а также сыворотки крови человека и обезьян.
-
Выявить термостабильные межорганные антигены (Ферри-тин (Ф), термостабильные межорганные (ТМ1 и ТМ2) в экстрактах тканей человека и обезьян.
-
Определить физико-химические параметры малоизученных ТМ1 иТМ2.
Научная новизна исследования: Впервые проведен широкий сравнительный иммунохимический и биохимический анализ фетоплацентарных, сывороточных и тканевых белков у человека и обезьян, выявлены видовые особенности и параллели при изучении белков в биологических объектах.
Установлено, что степень родства белков человека и их аналогов у обезьян различна: полная идентичность по СБАГ, а2МГ, Ig G и М, ТМ1, неполная по АФП, ТМ2, Ig А, крайне низкая по ПЛЧ и ТБГ.
Получены оригинальные данные по физико-химическим параметрам новых термостабильных антигенов - ТМ1 и ТМ2. Разработаны подходы к их выделению и очистке для последующего использования полученных препаратов в изготовлении иммунохимических тест-систем и в других лабораторных иссле-
дованиях.
Научно-практическая значимость работы: Сравнительный иммунохимическни анализ структурного сходства и различия белков тесно связанных видов позволяет косвенно судить о процессах генетической перестройки организмов при видообразовании, проявляющейся в антигенной дифференциации. В практическом аспекте интересен факт применения специфических белков беременности для диагностики различных нормальных и патологических проявлений гравидарного состояния. Изучение термостабильных тканевых антигенов вносит вклад в разработку иммунохимических тестов на деструкцию тканей.
Самостоятельно смоделированные иммунодиффузион-ные тест-системы на ТБГ, СБАГ, ТМ1, ТМ2 могут быть использованы в лабораторных исследованиях и в практической медицине.
Апробация работы: Материалы диссертации доложены на научных конференциях кафедры биологической химии с курсом клинической лабораторной диагностики, на конференции, посвященной 80-летию АГМА (1998), межвузовской конференции молодых ученых, посвященной 35-летию открытия АФП (Астрахань-Москва, 1999), конференциях FEBS (1993,1995).
Результаты исследования используются в научной и практической работе кафедры биохимии с курсом клинической лабораторной диагностики и УНДЦ АГМА. Публикации: По теме диссертации опубликовано 8 печатных работ, имеется 3 рационализаторских предложения. Структура и объем работы: Диссертация изложена на 148 страницах, состоит из введения, 4 глав (обзора литературы, материалов и методов, результатов собственных исследований, обсуждения результатов исследования), выводов, списка литературы. Иллюстративный материал представлен 15 таблицами, 37 рисунками. Библиография включает в себя 62 отечественных и 166 зарубежных авторов.