Введение к работе
Актуальность проблемы. При центрифугировании коагуляци-онная активность плазмы в верхних слоях падает и повышается в нижних /Gaertner, 1960/. Это объясняли флотацией антикоагулянтов с низкой плотностью. Более вероятным связывать повышение свертывающей активности нижних уровней центрифугируемой плазмы с седиментацией циркулирующих в крови надмолекулярных частиц (НМЧ), источник которых - физиологическая деградация форменных элементов и клеток эндотелия. Это предположение основано на следующем: 1) тканевой тромбопластин -липопротеид, представленный фрагментами клеточных мембран /Д.М.Зубаиров, 1982; Hvatum, Prydz, 1966/; 2) можно освободить биологическую жидкость от активности тромбопластина ультрафильтрацией /Д.Н. Зубаиров и др., 1969/; 3) показано, что тромбопластичєская активность изменяется под действием вазоактивных веществ /В.П.Скипетров, Б.И.Кузник, 1973/, при изменении проницаемости сосудов /Б.И.Кузник и др., 1989; Zaugg, 1980/, при механических /Б.Г.Лукьянец, 1983/, термических /В.С.Соловьев, 1983/ и химических /Вгох е.а., 1984/ повреждениях, а также при воспалении /Edgington е.а., 1987/.
Сопоставляя эти данные с указаниями на возможность изменить свертывающую активность плазмы под действием ускорения, обеспечивающего седиментацию НМЧ, без повреждения биомолекул /Хэм, Кормак, 1982/, мы предположили, что в плазме крови имеются коагулоактивные частицы.
Принимая во внимание участие фрагментов клеточных мембран (ФКМ) эритроцитов, тромбоцитов и лимфоцитов в свертывании по внутреннему пути /Hemker е.а., 1983/ и, особенно, по внешнему (фрагменты плазматических мембран мононуклеаров и клеток эндотелия сосудов) /Д.М.Зубаиров, 1978/, непрерывность их появления в кровотоке, связанная с непрерывной физиологичес-
кой деградацией клеток, можно допустить, что они участвуют в поддержании гемостатического потенциала крови и формировании гемокоагуляционных сдвигов, связанных с ускоренным разрушением клеток и (или) проникновением ФКМ из экстравазального пространства в кровоток.
Представляет интерес также изучение роли ФКМ в формировании гемокоагуляционнои активности гоиогенатов тканей. Чаще о свертывающей активности тканей судят по влиянию гомогенатов, лишь частично освобожденных от грубых частиц, на время свертывания цельной плазмы /А.В.Люлько и др., 1984/ или плазм с дефицитом факторов свертывания /С.П.Голышенков, 1982/.
Тромбогеморрагические осложнения при патологических состояниях, особенно при травмирующих операциях, обоснованно связывают с тромбопластинемией и последующим ускорением непрерывно протекающего диссеминированного внутрисосудистого свертывания крови /Б.И.Кузник и др., 1983; З.С.Баркаган, 1988; М.Ферстрате, Ж.Фермилен, 1986/. Все сказанное определило направление исследований.
Цель работы: охарактеризовать природу и коагуляционные свойства циркулирующих в крови надмолекулярных частиц, их участие в поддержании гемостатического потенциала и в возникновении гемокоагуляционных сдвигов.
Задачи исследования: 1. Изучить гемокоагуляционную активность плазмы, освобожденной от НМЧ. 2. Разработать способ количественной оценки их коагуляционной активности. 3. Охарактеризовать гемокоагуляционную активность НМЧ. 4. Изучить гемокоагуляционную активность НМЧ в крови разных регионов кровотока. 5. Изучить геиокоагуляционные свойства ФКМ из разных органов, их циркуляцию в кровотоке, и антигепариновую активность.
В процессе работы возник интерес к изучению влияния комплекса антиоксидантов на активность неполного и тканевого тромбопластинов внутренних органов, эритроцитов и НМЧ частиц плазмы крови.
Научная новизна: Впервые установлено, что в кровотоке циркулируют НМЧ - ФКМ, которым свойственна активность тканевого и неполного тромбопластинов, что коагуляционная активность гомогенатов большинства тканей животных и человека обусловлена преимущественно этими частицами и что их гемоко-агуляционная активность представлена тканевым и неполным тромбопластинами.
Впервые показано, что продолжительность циркуляции НМЧ в кровотоке определяется их происхождением. НМЧ из плазмы крови и гомогенатов тканей разных органов проявляют ^антигепари-новую активность, реализующуюся путем связывания гепарина на их поверхности.
Практическая ценность работы: 1. Предложен способ получения "тромбопластиндефицитной" плазмы. 2. Разработан способ освобождения плазмы от гепарина (авторское свидетельство N 1371208 от 1 октября 1987 г).
Апробация работы: Основные положения работы доложены на конференциях: "Актуальные вопросы теоретической и практической медицины" /Тюмень, 1983, 1985, 1988/, "Некоторые вопросы клинической и экспериментальной гемокоагулологии" /Тюмень, 1984/, научно-технической конференции по химии и химической технологии /Тюмень, 1985/, "Компенсаторно-приспособительные механизмы внутренних органов и головного мозга в норме, патологии и эксперименте" /Тюмень, 1984/, "Актуальные проблемы фармации" /Тюмень, 1985/, на конференции молодых ученых по проблемам химизации основных отраслей народного хозяйства
Тюменской области /Тюмень, 1986/, "Актуальные проблемы гемостаза в клинической практике" /Москва, 1987/, "Механизмы регуляции гемостаза на уровне молекулярных взаимодействий" /Свердловск, 1988/, "Актуальные проблемы фармации Западной Сибири и Урала" /Свердловск, 1989/.
Публикации: Материалы работы опубликованы в журнале "Гематология и трансфузиология", "Украинском биохимическом журнале", в трудах и сборниках вышеназванных конференций.
Положения. выносимые на защиту:
-
Циркулирующие в крови надмолекулярные частицы - обломки клеточных мембран - участвуют в поддержании гемокоагуля-ционного потенциала в норме и могут являться фактором, обусловливающим гиперкоагулемию при экстремальных воздействиях.
-
С присутствием надмолекулярных частиц связана мозаич-носгь гемокоагуляционного потенциала.
-
Оценка свертывающей активности тканевых экстрактов может производиться только после полного удаления надмолекулярных частиц.
Структура и объем работы. Диссертация представлена на 150 страницах машинописного текста, содержит 9 рисунков, 29 таблиц, состоит из введения, обзора литературы, собственных исследований, обсуждения, выводов и списка литературы (97 отечественных и 112 иностранных источников).