Введение к работе
Актуальность проблемы. Тромбоэмболии сопровождают заболевания сердечно-сосудистой системы, являясь наиболее распространенным осложнением и нередко служат причиной.,тяжелых- исходов' /В.М. ікнченко, І970;._3.С.Баркаган, І9ВЙ/. Часто встречаются тромбозм-— болические состояния и в хирургической практике /Б.В. Петровский и др., Ivol/. Растет коагуляционная активность крови при гиподинамии /В.Л.Скипетров и др., І98І/, вообще при экстремальных воздействиях /А.Ш.Вышевский, В.Н.Кожевников, 1966/. Наклонность к громбообразованию при перечисленных состояниях - следствие чрезмерной активации свертывания или результат недостаточности про-гивосвертывашего потенциала /В. (1. Скипетров, В.И.Куэник, ІУ73/.
Предупреждение и коррекция тромбогемморагий достигается с помошью антикоагулянтов. Одни из них угнетают биосинтез факторов свертывания (антибиотики и цитостатики), другие тормозят формирование Са -зависимых прокоагулянтов на пострибосомальной стадии (антивитамины К), что обеспечивает медленно развивающуюся стабильную гипокоагулемию. Практическая медицина требует, как правило, быстрого эффекта, обеспечиваемого антикоагулянтами прямого действия. С этой целью чаще других применяется гепарин, отличающийся сильным, но кратковременным действием /Б.А.Кудряшов и др., 1981/. Хотя гепарин и является средством выбора, он не лишен ряда недостатков. К ним можно отнести способность вызывать агрегацию тромбоцитов /Saba е.а. , 1979/ И тромбоцитопению / Prantani е.а., 1975/. Существует и устойчивость к гепарину /З.С.Баркаган и др., 19Ь2, 1988/, нередко отмечаются тромбоэмболические осложнения после отмены гепарина - "эффект бумеранга" /Nordon е.a. , 1981/. Можно контролировать внутрисосудиетое свертывание крови на этапе самосборки фибрина, не имеющем, в отличие от предыдущих стадий альтернативных путей /А.Ш.Вышевский и др., 1986/. На это указывают данные о способности фрагмента Д молекулы фибриногена замедлять самосборку. Аналогично действие пептидов с последовательностью Gly-Pro-Arg-/Kuyas' r,oolittle , 1983; i/Iiraglia , Gree-
nberg , 1985/. Их недостаток - быстрая элиминация из кровотока /Г.Л.Чипенс, 1982/, которую не устраняет модификация структуры /Kuyas, Loolittlo , 1983/.
В плазме крови человека и высших животных обнаружены пептиды с указанной последовательностью /А.Ш.Вышевский и др., 1986/. Они тормозят самосборку, взаимодействуя с мономерным фибрином /Е.А.Чирятьев и др., 1989/ и при введении в кровоток вызывают, к сожалению, лишь кратковременную гипокоагулемию, что также обусловлено быстрой их элиминацией /Е.А. Чирятьев, 1990/.
В лабораториях кафедр биохимии, фармакогнозии и фармакологии Тюменского медицинского института установлено наличие в экстрактах некоторых растений Западной Сибири пептида, сходного по аминокислотному набору с пептидами животного происхождения /Е.А. Чирятьев и др., 1989/.
Перспективный источник пептида-антикоагулянта - трава сабельника болотного. Ее водные извлечения, полученные в виде сухого экстракта, длительно сохраняют противосвертывающую активность. Наши предварительные исследования указали на целесообразность изучения травы сабельника болотного в качестве источника антикоагулянта, действующего на уровне заключительной фазы свертывания.
Цель работы. Установление химической природы противосверты-ваюшего компонента водных экстрактов из травы сабельника болотного, изучение механизмов его влияния на гемокоагуляцию in vitro и в организме животных.
Задачи.исследования.
-
Выделение и очистка противосвертываюшего компонента из водных экстрактов сабельника болотного.
-
Изучение химической природы антикоагулянта.
-
Установление этапа свертывания, лимитируемого антикоагулянтом.
-
Изучение влияния экстрактов, обогащенных антикоагулянтом на свертывание крови в эксперименте.
-
Изучение влияния этих же экстрактов на течение экспериментальных гиперкоагулемий.
Научная новизна. Впервые установлено, что при диализе водно-аммиачного экстракта сабельника через целлофан Т-ЮО недиализую-шая фракция сохраняет более 50$ противосвертываюшей активности, свойственной первичному экстракту, и что сухой экстракт из недиа-лизуюшейся фракции, хорошо растворяется в воде и 0,14 М растворе хлорида натрия, отличаясь высокой противосвертываюшей активностью, не влияя при однократном и многократном введении на морфологические показатели крови, на выделительную функцию почек и на вес внутренних органов.
Впервые установлено, что противосвертываюшая активность не-диалиэующейся фракции экстракта связана с пептидами, отличающимися высоким содержанием аминокислотных остатков с радикалами, способными к ионизации в физиологических условиях. Показано также, что большие дозы экстракта при внутривенных инъекциях вызывают кровотечения, приводящие к гибели, а при других путях введения не вызывают кровоточивости, не оказывают токсического действия.
Практическая ценность. Получены данные, свидетельствушие о целесообразное і и необходимости глубокого фармакологического ис-„ следования преь іратов из травы сабельника болотного,подсхеме, предусмотренно.. Фармакологическим комитетом для доклинических испытаний ""антикоагулянтов прямого действия.
Апробации и публикации. Материалы работы доложены на конференции молодых ученых-медиков и специалистов здравоохранения (Тюмень, 1968), на Всесоюзной конференции "Новые лекарственные препараты из растений Сибири и Дальнего Востока" (Томск, 1989), на конференции биохимических обществ Урала, Сибири, Поволжья, посвяшенной проблемам биохимии (Пермь, 19ь9), на Всесоюзной конференции молодых ученых "Физиология и патология перекисного окисления липидов, гемостаза и иммуногенеза" (Полтава, 1991, 1992) и конференции "Обмен вешеств в норме и патологии" (Тюмень, 1992).
Структура и объем диссертации. Диссертация представлена на 146 страницах машинописи, содержит 18 рисунков, 23 таблицы, состоит из введения, обзора литературы, собственных исследований, выводов и списка литературы (107 отечественных и 105 иностранных
источников).