Введение к работе
Актуальность темы. При каждой инфекции развитие иммунологических реакций имеет свои особенности, проявляющиеся в изменении концентрации иммуноглобулинов или состава антител (Боровик Р.В., 1978; ГолубничийВ.П. и др., 1985; Corbell L.B. et al.,1984). Однако роль гуморальных, клеточных'и секреторных факторов иммунитета при многих заболеваниях у птиц до настоящего времени изучена недостаточно ( suwaohe b.d.,1990;Кауа л. et al.,1983). Зачастую при разработке способов ветеринарно-санитарных мероприятий и определении средств специфической профилактики иммунобиологическая реактивность организма птиц не принималась во внимание в связи с отсутствием доступных методов контроля (Колабская Л.С. и др., 1933; Пигаревский В.К. и др., 1968).
Одним из способов оценки состояния неспецифической резистентности является метод количественного определения иммуноглобулинов (Федоров Ю.Н., 1965; Колабская Л.С. и др., 1987; Конопатов ft.В., 1991). Основний компснентсі.! им.чунохимических реакций для количественного определения иммуноглобулинов в сыворотке крови птиц являются моноспецифические сыворотки к иммуноглобулинам. Особого внимания заслуживают моноспецифические сыворотки к IqG-. как основному классу иммуноглобулинов кур. Отечественная биологическая промышленность в настоящее время не производит моноспецифические сыворотки к отдельным классам иммуноглобулинов птиц.
Отсутствие единой техники исследования и стандартных моноспецифических сывороток приводит' к получению Несопоставимых результатов при их использовании различнгми исследователями (ьилик В.В., 1987; Голубни'шй В.її., і 963; Ы?-1" ''- «^ «і., 1 і'ГЮ).
Наличие моноспецифических сывороток и методов количественного определения классов иммуноглобулинов позволит изучить особенности
иммунологических реакций при различных инфекциях и осуществить контроль за.состоянием защитных систем организма птиц при проведении вакцинации, а таїоке при отбора птиц для биологических исследований и воспроизводства.
Получение стандартных моноспецифических сывороток, обладающих высокой активностью и специфичностью, является условием для их применения в промышленном птицеводстве.
Цель и задачи работы; Целью настоящих исследований являлось получение моноспецифических сывороток к IoC- кур и их использование для контроля уровня иммуноглобулина С птиц при проведении профилактических мероприятий в промышленном птицеводстве.
Для достижения данной цели были поставлены следующие задачи:
I. Выделить IoG-из сыворотки крови кур и определить его физико-химические показатели.
2.- Получить моноспецифические сыворотки к IoG- кур.
-
Изучить физико-химические, иммунохимические, специфические свойства моноспоцифических сывороток к IoG- кур.
-
Разработать экспресс-метод определения количественного содержания IcG- в сыворотке крови кур с использованием моноспецифических сывороток.
-
Изучить особенности изменений IoG- сыворотки крови интакт-ных кур и при экспериментальном заражении возбудителями вирусных, бактериальных и протозойних заболеваний.
-
Провести контроль уровня IoG- в сыворотке 'крови кур при проведении ветеринарно-санитарных мероприятий в условиях промышленного птицеводства.
-
Разработать нормативно-техническую документацию на получение ноноспецифических сывороток к IoG кур.
Основино положения, выносимне на защиту;
I. Получение моноспецифических сывороток к IoG- кур: выделение из сыворотки крови кур иммунохимически гомогенного lop-, иммунизация животных, позволяющая получить стандартные,, активные, . высоко-специфичные сыворотки..'
. 2. Использование моноспецифических сывороток к IoG- кур для контроля уровня неспецифической.резистентности птиц в условиях промышленного птицеводства.
Научная новизна. Используя сочетание методов (осаждение нейтральными солями, ионообменную хроматографию и гель-фильтрацию) получен IoG кур, иммунохимически однородн..й, характеризующийся коэффициентом седиментации 6,9-7,2 3 и молекулярной массой I60000-I70000 Д.
Впервые в нашей стране разработаны и биофабрично выпущены наборы сывороток и наборы радиально-иммунодифс^уэионннх кассет, предназначенные для количественного определения IoG- кур.
Впервые проведено количественное определение уровня IoG- сыворотки крови кур в эксперименте при бактериальных (пуллороз, колибактериоз), протозойних (кокцидиоз), вирусных инфекциях (инфекционная бурсальная болезнь) и при проведении плановых, вакцинаций в птицехозяйствах.
Контроль уровня IoG в сыворотке крови кур при проведении ветеринарно-санитарных мероприятий в условиях птицефабрик позволил провести научно обоснованное применение биологически активных препаратов для коррекции иммунной системы организма птиц.
Практическая ценность. На основании проведенных исследований разработана нормативно-технически документация "Набор сывороток для количественного определения IoG кур, гусей, уток и индеек":
-
Технические условия (ТУ 10-07-262-91),
-
Инструкция по изготовлению и контролю,
-
Наставление по применению,
утвержденное ГУВ Госагропрома СССР 12 Л1.91, и нормативно-техническая документация "Набор радкольно-иммунодиффузионных кассет для количественного определения IqC- кур, гусей, уток и индеек":
-
Технические условия (ТУ J0-07-263-9I),
-
Инструкция по изготовлению и контролю,
-
Наставление по применению,
утвержденные ГУВ Госагропрока СССР 12,11,91. Главным Управлением ветеринарии издан приказ № 72 от 17.12.91. о внедрении наборов сывороток и радиально-иммунодиффузионных кассет в практику промышленного птицеводства.
Результати исследований используются на курсах усовершенствования ветеринарних врачей во Всероссийском НИВИ птицеводства при изучении влияния биологически активных препаратов на иммунный статус организма птиц.
Результаты исследований используются для контроля уровня неспецифической резистентности в процессе выращивания птицы в условиях птицефабрик.
Апробация работы. Материалы диссертации доложены на Всесоюзной конференции "Система мер по обеспечению эпиэоотологического благополучия и рентабельности птицеводческих мероприятий" (Ленинград, 1965), на Всесоюзной конференции "Комплексная система ветеринарных мероприятий в птицеводстве - резерв повышения эффективности производства" (Ленинград, 1989) на конференции молодых ученых и специалистов "Ветеринарные проблемы птицеводства" (Ленинград, 1990), на Методическом и Ученом Советах Всероссийского ШШ, птицеводства (I966-I99U г.г.).
Цублнкации. Основные положения диссертации опубликованы в 6 научных работах.
Объем и структура работы. Диссертация изложена на 161 страницах машинописного текста и включает введение, обзор литературы, результаты собственных исследований, обсуждение, выводы, практические предложения, список литературы и приложение. Работа иллюстрирована 17 рисунками и 13 таблицами. Список литературы включает 214 источников литературы, в том числе 102-иностранных авторов,