Введение к работе
Актуальность проблемы определяется тем, что сфингомиелины (СІЮ, являясь структурными компонентами биологических мембран, играют важную роль в реализации важнейших функций клеток рецепторної!, транспортной, энергетической, полиферативной (Ansel1 Q.B., Hawthorn S.N 1964; Dawson R.M.С., 1964; Грибанов Г.A., 1979; Markus N.,1994; Steen Law S.L., 1995; Wujie S.S, Sturgill T.W. ,1995; Iwata M., 1995).
Установлено, что содержание СФМ в тканях организма тесно связано с интенсивностью протекающих в них биологических процессов (Centhia M.G.,1994; Kolesnlk R., 1994). Показана важная роль этого соединения в передаче сигналов в клетку (Merrll A.H.J, Stevens V.L., 1989, Markus N.,1994), обнаружены специфические комплексы данного фосфолипида (ФЛ) с одним из компонентов биомембран - холестерином (Hannun Y.A., Bell R.M., 1989; Iwata М., Herring-ton J., Zager R.A., 1995; Kolesnlck R.N., 1989; Wujie S.S, Stur-gill T.W.,1995).
В последнее время доказано, что в ответ на различные воз-, действия в биологических структурах возникают быстрые обратимые изменения уровня содержания высоколабильных ФЛ , таких как фосфо-инозитиды (Каргаполов А.В и соавт. 1988-1995; Berridge M.J., Dawson R.M.С, Downes СР. et al. 1983). Эти изменения происходят в течение 2-3 минут с интервалом в 10-20 секунд. Характер таких колебаний уровня содержания зависит от действующего агента и состояния биологических структур, что может быть использовано в прогнозировании и диагностике заболеваний ((Каргаполов А.В. и др. 1987-1995). Однако отдельные формы ФИ являются крайне неустойчивыми соединениями и определение уровня их содержания сопряжено со значительными методическими трудностями (Прохорова М.И. 1982). Поэтому возникает необходимость изучить динамику быстрых изменений стабильных ФЛ, в частности СФМ. Эти данные дадут,возможность получить новую информацию об особенностях функционального состояния биологических структур, что может быть использовано в прогнозировании и диагностике заболеваний, а также для расшифровки молекулярных механизмов, обеспечивающих жизнедеятельность тканей, особенно центральной нервной системы, в функционировании которой СФМ играют важную роль (Koval М., Pagano R.E. 1991). Для решения данной задачи требуется разработка эффективных методов, позволяющих регистрировать специфику быстрых изменений количества СФМ.
Цель настоящей работы состояла в изучении особенностей пока-
зателей быстрых изменений уровня содержания СФМ в биологических
системах при воздействии экзогенных факторов в норме и патологии. Для осуществления этой цели поставлены следующие задачи:
1. Выявить особенности динамики быстрых изменений количества СФМ печени под влиянием ионов кальция и уменьшения тоничности среды.
?.. Изучить влияние экзогенных факторов на показатели динамики быстрых изменений уровня содержания СФМ цельной крови.
-
Провести сравнительный анализ параметров динамики быстрых изменений количества СФМ цельной крови и гомогенатов печени под влиянием гипотонии.
-
Исследовать особенности динамики быстрых изменений уровня ОФМ крови в норме и патологии.
Научная новизна работы. Впервые обнаружены быстрые обратимые изменения уровня содержания СФМ крови и гомогенатов печени, возникающие под воздействием ионов кальция, гипотонии, уменьшения рН среды. Установлено, что наиболее информативными параметрами позволяющими характеризовать эти изменения, являются: амплитуда, период обратимого изменения, исходные и конечные уровни, время максимального и минимального содержания. Разработаны эффективные методы анализа быстрых изменений количества СФМ.
Практическая значимость работы. Выявленные специфические изменения некоторых параметров динамики быстрых изменений уровня СФМ крови больных с патологией центральной нервной системой позволяют применять их при диагностике шизофрении и эпилепсии. Разработаны модифицированные методы количественного определения сфингомиелинов в смесях природных липидов с использованием проточной тонкослойной хроматографии и инфракрасной спектроскопии.
Положения выносимые на защиту:
-
Результаты изучения особенностей показателей быстрых изменений уровня содержания СФМ печени при воздействии на гомогенаты данной ткани различных экзогенных факторов.
-
Данные сравнительного анализа особенностей показателей динамики быстрых изменений количества СФМ различных тканей, возникающие под влиянием одного и того же экзогенного фактора -уменьшения тоничности среды.
-
Результаты использования аппаратно-программной системы,основанной на инфракрасной спектроскопии, для анализа параметров быстрых изменений уровня содержания СФМ крови в норме и патологии.
- Апробация работы и публикации. Материалы диссертации -докладались на XII съезде психиатров России (Москва, 1995), на I зерском конгрессе " Здоровье человека" (Тверь, 1996). Диссерта-ія апробирована на межкафедральном заседании с участием сотруд-іков кафедр общей и биоорганической химии, биохимии, фармаколога, медицинской биологии и генетики, научно-исследовательского ?нтра Тверской государственной медицинской академии (1996).
По теме диссертации опубликовано: 7 научных работ, получено зторское свидетельство за N1802341 и 3 рацпредложения.
Объем и структура работы. Диссертация состоит из введения, эех глав и выводов. Первая глава представляет собой обзор лите-элуры. Во второй главе дано описание методов использованных в ^боте. В третьей главе представлены основные результаты собст-энных исследований и их обсуждение. Диссертация изложена на 121 границах машинописного текста, содержит 1 таблицу, 33 рисунка, тасок литературы включает 197 наименований.