Введение к работе
АКТУАЛЬНОСТЬ ПРОБЛЕМЫ, Фосфатидилхолины (ФХ)-являются основными наиболее распространенными липидными компонентами биологических мембран и и в значительной мере обуславливают протекание различных биохимических процессов,обеспечивающих функционирование клетки (AriSell G,В..Hawthorne J.N.,1973). Установлено „что уровень содержания ФХ в биологических структурах связан с интенсивностью протекающих в них данных процессов,многие из которых происходят в короткие интервалы времени (Nelson G.,1972;Ягужинский Л.С.,1978). Поэтому представляет интерес изучить характер быстрых изменений основного липидного компонента биологических мембран.В настоящее время подобные исследования проведены для высоколабильной фракции фосфолипидов (ФЛ)-фосфоинозитидов (ФИ) и сфинго-миелинов (СФМ) (Каргаполов А.В и соавт.1988-1997 ). Наиболее перспективным для решения данной задачи является использование инфракрасной спектроскопии (ИКС),в комплексе с тонкослойной хроматографией (ТСХ),что позволит быстро и эффективно регистрировать параметры динамики уровня ФХ.При количественном изучении ФХ с помощью ИКС необходимо учитывать,что присутствие значительных количеств белка и других биохимических компонентов в тканях организма оказывает влияние на показатели спектра.Однако стабильность ковалентных связей белковых молекул дает возможность предполагать,что динамика изменения показателей в областях спектра,включающих частоты поглощения карбоксильных,фосфатных групп,четвертичного азота,сложноэфир-ных группировок,в значительной мере определяется липвдным компонентом.Поэтому в условиях эксперимента параллельно проводилось определение уровня содержания ФХ с использованием метода тонкослойной хроматографии.
ЦЕЛЬ ИССЛЕДОВАНИЯ.Изучить особенности динамики уровня ФХ гомогенатов печени крыс и цельной крови человека,в норме и патологии,под влиянием экзогенных факторов.
1.Изучить показатели быстрых изменений ФХ и ФИ гомогенатов печени крыс при действии ряда экзогенных факторов:ги-
потонии,ионов кальция,фосфат-ионов,АТФ,сукцината,малага и нитрогуминового стимулятора (НГС),которые оказывают существенное влияние на липидный компонент биологических мембран.
2.Исследовать спектральные характеристики водно-лецити-новых систем с использованием специально разработанной аппаратно-программной системы.
3.Установить параметры динамики количественного содержания ФХ в образцах цельной крови здоровых людей и лиц с заболеваниями сердечно-сосудистой системы (инфаркт миокарда).
4.Провести сравнительный анализ методов ТСХ и ИКС при определении количественного содержания ФХ в стандартных препаратах, а также модельных системах,содержащих смеси липидов.
НАУЧНАЯ НОВИЗНА РАБОТЫ.В результате проведенных исследований впервые обнаружены быстрые обратимые изменения уровня содержания ФХ в ткани печени и крови,возникающие под влиянием исследуемых факторов.Выделены параметры,характеризующие данные изменения:амплитуда колебания уровня содержания ФХ и его продолжительность,время появления максимальных и минимальных отклонений,период стабилизации уровня анализируемых веществ.
ПРАКТИЧЕСКАЯ ЗНАЧИМОСТЬ РАБОТЫ.Разработана методика, позволяющая быстро и эффективно определять количество ФХ в"крови здоровых и больных людей,что может быть использовано для прогнозирования и диагностики заболеваний.
1.Результаты анализа параметров быстрых изменений свидетельствующие о том,что в гомогенатах печени при воздействии экзогенных факторов возникают быстрые обратимые изменения уровня содержания ФХ и ФИ,продолжающиеся через каждые 30 секунд,в течение 3-х минутного интервала.
2.Данные,показывающие,что из исследуемых факторов (ионы кальция,фосфата,АТФ,гипотония,сукцинат,малат,НГС) наиболее выраженный эффект влияния на динамику быстрых изменений ФХ оказывают фосфат-ионы,АТФ и ионы кальция.
3.Результаты анализа параметров быстрых изменений ФХ в
крови здоровых и больных людей.
АПРОБАЦИЯ РАБОТЫ И ПУБЛИКАЦИИ.Результаты исследований рассмотрены на межкафедральном заседании с участием сотрудников кафедр общей и биоорганической химии,биологической химии, медицинской биологии и генетики,фармакологии и научно- исследователь кого центра Тверской государственной медицинской академии (1998).По теме диссертации опубликовано 7 научных работ,получено авторское свидетельство за N1802341, внедрено 2 рацпредложения.
ОБЪЕМ И СТРУКТУРА РАБОТЫ.Диссертация изложена на 13? страницах машинописного текста и состоит из введения,обзора литературы, материалов и методов исследования,результа- . тов собственных исследований,обсуждения результатов и списка литературы, включающего 244 источника.Работа иллюстрирована 9 таблицами,34 рисунками и графиками.