Введение к работе
Актуальность темы. В настоящее время накоплен немалый объем сведений о структуре, Функциях и эволюции повторяющихся последовательностей (ПП) у растений. Однако эволюция ПП изучается часто в отрьгае от эволюции на уровне организма, от видообразования. Еще не ясны вопросы взаимосвязи мекду молекуляр-: ноя и хромосомной эволюцией, перестройками в геноме при гибри-гибридиэации и полиплоидии. Оункции значительной части ПП долгое время вызывают оживленные дискуссии. Среди прочих предложена гипотеза об участии ПП в работе хромосомного аппарата Если эти представления верны, то ПП должны играть важную роль в видообразовании растений, которое в значительной степени связано с изменением хромосом.
Вне поля зрения исследователей все еще остаются обширные .группы цветковых растений, имеющие валное значение для систематики. Примером этого молет служить семейство Rosace =te и, в частности, подсемейство Prunoideae. Это подсемейство является интересной экспериментальной моделью, так как представляет собой уникальный пример отдаленной гибридизации: описаны многочисленные гибридные формы между представителями различных видов и даже родов. Причем, гибридизация мояет происходить как на диплоидном уровне (рекомбинационное видообразование), так и путем аллополиплоидии. Сравнительная легкость отдаленной гибридизации в подсемействе Prunoideae ставит проблему о генетической и таксономической дистанции между его представителями. Связанный с этим вопрос о ранге таксонов, входящих в подсемейство, остается спорным со времен Ллннея.
Дяя решения упомянутых выше проблем мы использовали ряд методов молекулярной биологии и геносистематики.
Цель и задачи работы. Целью настоящей работы является
изучение характера эволюции Ш1 в подсемействе Prunoideae, отличий в ПП у представителей подсемейства, связалых разной степенью родства (в том числе т У гибридных форм), а также использование полученных данных в решении вопросов филогении и таксономии Prunoideae.
В связи с этим было запланировано: 1. Научить скорость дивергенции и характер эволюции Ш в подсемействе Prunoideae. 2. Изучить особенности организации, изменчивости и характера наследования рДНН у различных видав, сортов и гибридов; 3. Исходя из полученных данных, построить дендрограмму, отражающую филогенетические отношения в подсемействе Prunoideae; 4. Предложить молекулярно-геяетичекие критерии для определения систематической принадлежноси представителей в подсемействе Prunoideae. Научная новизна и практическое значение работы. Шервые исследована эволюция ПП в подсем. Prunoideae. Показано, что скорость дивергенции ПП в подсемействе сравнительно низка. Значительных перестроек генома посредством делеций-амплификз-ций не обнаружено.
Исследована организация генов рДНН. Различия наблюдались в больном мекгешгсм спейсере, который состоит из четырех областей. Области отличаются по длине и наличию сайтов узнавания для рестриктаз, а также по скорости эволюции. Изучение спонтанных аллоплоидных гибридов и их предковых форм показало, что гибриды наследуют рДНК либо обоих, либо одного из родителей.
Данные молекулярной гибридизации могут иметь значение для систематиков при определении филогенетической дистанции, а также использоваться для выработки оптимальной стратегии получения новых межвидовых гибридов. Наборы рестриктных фрагментов могут быть использованы в качестве молекулярных паспортов для идентификации видов и сортов.
Использованные методики успеїшю применяют.": при подготовке дипломных и курсовых работ, а тают - на практических эа-занятиях студентами кафедры биохимии Черновицкого университета.
Апробация работы. Основные результаты работы были пред-тавлены и дожданы на всесоюзных конференциях молодых ученых (Москва, 1990 г., Уфа, 1S89 г., 1991 г.). 1 Всесоюзной планово - отчетной конференции "Генная и карточная интенерия" (Москва, 1991 г.). Всесоюзной конференции "Достижения "Зиотех-нологии - агропромышленному комплексу" (Черновцы, 1991 г.), Украинских генетическом (Полтава, 1992 г.) и биохпмическон (Киев, 1992 г.) съездах.
Публикации. Результати опубликованы в в работах.
Структура и объем работы. Диссертация состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов исследований, изложения полученных результатов я их обсуждения, выводов и списка литературы, включавшего 213 источников, в том числе 133 иностранных. Материал изложен на 14? страницах машинописного текста, содержит 5 таблиц и 20 рисунков.