Введение к работе
Актуальность проблемы. -Инсулинозависимый сахарный диабет (ИЗСД) -одна из наиболее распространенных эндокринопатий, сосудистые осложнения которой нередко приводят больных к инвалидности в социально активном периоде их жизни. Сложившаяся в конце 80-х концепция аутоиммунного патогенеза этого заболевания дала основание предполагать, что продромальный период ИЗСД длится от нескольких месяцев до нескольких лет и может быть' обнаружен по наличию маркеров антиостровко-вого аутоиммунитета - анти-13-реактивных Т-лимфоцитов и/или аутоанти-тел (ауАТ). Это создает перспективы доклинической диагностики ИЗСД на основе надежных иммунных маркеров, поиск которых ведется в первую очередь среди ауАТ к антигенам 6-клеток. Решение этой задачи осложнено' тем, что популяции ауАТ у больных ИЗСД и лиц группы риска заболевания крайне гетерогенны и могут включать антитела как к тка-неспецифичным, так и к общетканевым аутоантигенам (ауАТ) В-клеток, причем любые из этих антигенов потенциально способны провоцировать развитие 'заболевания. Дополнительные трудности создает отсутствие адекватных стандартизованных и широкодоступных методов выявления большинства сопутствующих заболеванию типов ауАТ, что не позволяет вести широкие проспективные исследования, объединять и согласованно интерпретировать данные, полученные в разных лабораториях.
Наконец, появляется все больше наблюдений того, что ауАТ,являющиеся, скорее всего, вторичными в патогенезе ИЗСД, оказываются первичными в патогенезе его поздних осложнений* а значит могут служить иммунными маркерами последних.
Таким образом, создание адекватных и доступных методов выявления ауАТ и изучение спектра ауАТ, сопутствующих развитию ИЗСД, во всем его диапазоне является одной из наиболее актуальных проблем теоретической и практической диабетологи...
Дель и задачи исследования. Настоящее исследование преследовало целью изучение диагностического и прогностического значения состава популяций ауАТ, сопутствующих ИЗСД. В задачи исследования входило: 1) создание адекватных методов определения аутоантител на базе имму-ноферментного анализа (ИФА); 2) комплексное обследование состояния гуморального иммунитета у диабетических больных и лиц группы риска ИЗСД и сопоставление его с наблюдаемым у лиц общей популяции и при заболеваниях, неассоциированных с ИЗСД; 3) изучение динамики марке-
- 2 -ров гуморального аутоиммунитета, сопутствующих развитию диабета, индуцированного у крыс несколькими субдиабетогенными дозами стрептозо-тоцина.
Научная новизна работы Впервые показано, что в сыворотках крови людей всегда присутствуют естественные ауАТ, относящиеся к иммуноглобулинам класса Q, которые специфично взаимодействуют с антигенами микросом и поверхности разных типов клеток, в силу чего различия между позитивными и негативными по соответствующим типам ауАТ сыворотками определяются не по качественному, а по количественному признаку. Предложены универсальный критерий серопозитивности для ИФА ауАТ к антигенам микросом, поверхности клеток и ДНК, а также относительная единица измерения уровня естественных ауАТ в негативных сыворотках. . v Впервые обнаружена адаптивная реакция гуморального аутоиммунитета на хирургическое вмешательство по поводу раковых опухолей желудочно-кишечного тракта, описана ее динамика и показано, что она может быть использована в качестве своеобразной модели для изучения имму-нореактивности и оценки эффективности и адекватности методов выявления естественных ауАТ.
Впервые выявлены половые различия в частотах антиостровковых ауАТ и ауАТ к фибробластам человека и гипофизарным клеткам крысы, а также различия в составах ансамблей ауАТ, у разновозрастных групп больных ИЗСД. Поскольку подобного рода иммунологическая гетерогенность ИЗСД может являться следствием его этиопатогенетической гетерогенности, можно предполагать, что не только ауАТ к антигенам островковых клеток, но и ауАТ к некоторым антигенам фибробластов а гипофизарных клеток могут относиться к иммунным маркерам этого типа диабета.
Исследованы составы ансамблей ауАТ больных тиреоидитом Хашимото и 2-х разных клинических групп больных НИЗСД, впервые выявлены их характерные особенности.
Изучена динамика маркеров гуморального аутоиммунитета при стреп-тозотоциновом диабете крыс. Впервые показано, что антиостровковые ауАТ могут появляться в циркуляции дважды, причем ауАТ 1-ой генерации, появляющиеся на ранних сроках развития диабета, являются свидетелями уНИЧТОЖеНИЯ ОСТРОВКОВЫХ КЛеТОК ИММУННЫМИ. КЛеТКаМИ. АНТИОСТ'-
ровковые ауАТ 2-ой генерации (как и ауАТ к 5 типам клеток других тканей и ДНК) непосредственно с иммунопатологическим процессом, ведущим к развитию стрептозотоцинового диабета, не связаны.
Впервые обнаружено, что в'развитии почечной нефропатии при стреп-тозотоциновом диабете активно участвует гуморальный аутоиммунитет,
причем ауАТ к антигенам базальних мембран нефронов, появляющиеся в циркуляции одновременно с антиостровковыми ауАТ первой генерации, могут служить маркерами начала ее развития.
Научно-практическая ценность работы. На основе разработанного иммуноферментного метода определения антител к микросомам тиреоидной тісани человека создан диагностнкум, прошедший клинические испытания и разрешенный МЗМП РФ к производству, который несколько лет широко используется в клинической практике здравоохранения России.
Апробация работы. Материалы диссертации были доложены и обсуждены на симпозиуме Латвийского научного общества эндокринологоа .Рига,1988), на 3-м Всесоюзном съезде эндокринологов (Ташкент,1989), на 4-м Всесоюзном съезде патофизиологов (Кишинев, 1989), на 8-ой конференции Эстонского научного общества эндокринологов (Таллин,1990), на 26.-м съезде Европейской ассоциации по изучению диабета (Дублин, 1991), на 14-м съезде Международной федерации диабетологов (Вашингтон,1991), на 9-м Международном конгрессе по эндокринологии (Ницца,1992).
Публикации. По материалам диссертации опубликовано 18 работ.
Структура и объем диссертации. Диссертация изложена на 180 страницах машинописного текста; состоит из введения, обзора литературы, экспериментальной части, включающей материалы и методы исследования, результаты исследования и их обсуждение, и выводов. Работа иллюстрирована 13 таблицами ч 13 рисунками; библиографический указатель включает 336 публикаций, в том числе - 284 зарубежных авторов.