Введение к работе
Актуальность темы.
Современными научными исследованиями установлено, что лизо-сомальные ферменты играют важнейшую роль в патогенезе воспалительных и деструктивных заболеваний глаз. Избыточная активность гидро-лаз оказывает прямое повреждающее действие на ткани глаза. Кроме того, лнзосомальные протеазы посредством реакций ограниченного про-теолиза осуществляют запуск функциональных биохимических систем, участвующих в развитии воспалительного процесса (В.Н. Орехович и др., 1984; О.А. Кот, В.А. Проценко, 1987; Н.Б. Чеснокова, 1991; В.Ф. Данили-чев, 1996 и др.).
Наиболее тяжёлыми заболеваниями глаз, в патогенезе которых ведущую роль играют гидролитические ферменты, являются химический ожог и гнойная язва роговицы. Установлено, что при ожогах глаз происходит значительное повышение активности ряда лизосомальных гидролитических ферментов: каллшсреина, эластазы, трипсиноподобных протеаз, р-глюкуронидазы, p-N-ацетилглюкозаминидазы (Р.А. Гундорова и др., 1987; Н.Б. Чеснокова, 1991; Т.П. Кузнецова и др., 1994; Е.В. Ченцова, 1996 и др.). Развитие язвенного процесса роговицы также связано с увеличением активности в воспалительном очаге протеолитических ферментов: коллагеназы, плазминоподобных и трипсиноподобных протеаз (В.Л. Осташевский, Т.У. Горгиладзе, 1984; Р.И. Нахикян и др., 1991; В.В. Корчагин и др., 1992; И.А. Макаров, 1993). В связи с этим одним из важнейшим направлений лечебных мероприятий при данных поражениях является снижение избыточной активности гидролитических ферментов.
Наряду с другими лизосомальными гидролазами важную роль в развитии воспалительных и деструктивных процессов играют катепсин D и р-галактозидаза. Катепсин D обладает широким спектром протеолити-ческого действия а также кининогеназной активностью. Фермент р-га-
ТТЯТГТГтИГЇЯ1Я V"tT3fmVf*T' в каТ*ЯЙОТТИТМ f* мНППТУ V5\ ТТЯКТГЛ*ЮґчОТТ(*ТТЖ'яттїих pvO~
стратов, в том числе, основного мукополисахарида роговицы - кератан-сульфата (А.А. Покровский, В.А. Тутельян, 1976; О.Г. Оглобина и др., 1980; А. Д. Баррет, М. Ф. Хит, 1980; Л.Е. Панин, Н.Н. Маянская, 1987). Однако, катепсин D и (3-галактозидаза при ожогах глаз и гнойной язве роговицы остаются неизученными, что определило целесообразность исследований в этом направлении.
Несмотря на многообразие предложенных средств лечения ожогов глаз и гнойных язв роговицы, эта проблема остаётся не до конца решённой, а изучение новых эффективных средств, обладающих комплексным терапевтическим действием, является актуальным.
В последние годы значительно повысился интерес к продуктам пчеловодства в связи с их многогранным и физиологичным действием, а также дешевизной и доступностью. Наиболее широким спектром биологической активности обладает прополис, однако, он практически не растворим в воде, что ограничивает его использование в офтальмологии. Выделенная из прополиса водорастворимая полифенольная фракция (А.И. Тихонов и др., 1974) отличается сложностью производства, в связи с чем глазные лекарственные формы на её основе не получили широкого распространения. Механизмы действия прополиса при глазных заболеваниях практически не изучались. Исходя из этого актуальным является углублённое и всестороннее изучение офтальмологических лекарственных форм прополиса, полученных простыми и доступными способами.
Цель исследования.
Цель настоящей работы состояла в установлении влияния экстрактов прополиса на свободную активность лизосомальных ферментов тканей глаза при тяжёлых экспериментальных поражениях роговицы, а также в оценке их эффективности при данной патологии.
Задачи исследования.
1. Изучить активность катепсина D и р-галактозидазы в тканях радужки, цилиарного тела и камерной влаге глаза при экспериментальном
з щелочном ожоге роговицы III степени и лечении его экстрактами прополиса.
-
Изучить активность катепсина D и р-галактозидазы в тканях радужки, цилиарного тела и камерной влаге глаза при экспериментальной стафилококковой гнойной язве роговицы и лечении её экстрактами прополиса.
-
Оценить влияние экстрактов прополиса на клиническое течение щелочного ожога роговицы III степени и стафилококковой гнойной язвы роговицы в эксперименте.
-
Исследовать состав, некоторые физико-химические свойства и антимикробную активность водного (1:5) и масляного (1:20) экстрактов прополиса.
-
Дать сравнительную оценку эффективности изучаемых экстрактов прополиса.
Научная иозизна.
Впервые изучена динамика свободной активности катепсина D и р-галактозидазы в тканях радужки, цилиарного тела и камерной влаге глаза при экспериментальном щелочном ожоге роговицы III степени и стафилококковой гнойной язве роговицы: выявлено значительное повышение активности данных ферментов во все сроки наблюдения, кроме 1-х суток при ожоге, когда она снижалась.
Раскрыт один из биохимических аспектов механизма действия прополиса при изученной глазной патологии: установлено его нормализующее влияние на свободную активность катепсина D и р-галактозидазы в исследованных тканях глаза.
Впервые изучен качественный состав водного (1:5) и масляного (1:20) экстрактов прополиса: выявлено наличие в них важнейших биологически активных компонентов, а также особой группы веществ - эк-дистероидов; определено количественное содержание полифенолов в водном экстракте прополиса и его осмотическое давление.
Установлена отчётливая антимикробная активность водного и мае. ляного экстрактов прополиса in vitro и in vivo.
Практическая значимость.
Установленное нормализующее влияние водного (1:5) и масляногс (1:20) экстрактов прополиса на свободную активность катепсина В и (3 галактозидазы в тканях радужки цилиарного тела и камерной влаге гла за при экспериментальном щелочном ожоге роговицы III степени и ста филококковой гнойной язве роговицы позволяет рассматривать лропо лис как средство патогенетически направленного действия в лечении за болеваний сопровождающихся повышением свободной активности ли зосомальных ферментов. Высокая эффективность экстрактов прополиса при изученной экспериментальной патологии, наличие в них важнеишю биологически активных веществ, а также отчётливая антимикробная ак тивность определяют перспективность их применения в клинике глазныз болезней.
Апробация работы.
Основные положения диссертации доложены и обсуждены на V i VI Российских научно - практических конференциях по апитерапш (Сочи, 1996; Рыбное, 1997), Российской научно - практической конферен ции "Ожоги глаз и их последствия" (Москва, 1997), Межрегионально! научно - практической конференции "Офтальмология Центральної! Черноземья и Среднего Поволжья в решении проблемы слепоты и слабо видения" (Тамбов, 1997), Российской научно - практической конферен ции "Юшнико-инструментальные и физические методы диагностики i лечения посправматических изменений органа зрения" (Москва, 1998] на клинических конференциях глазных отделений Рязанской клиническо; больницы им. Н.А. Семашко и кафедры глазных и ЛОР-болезней Разан ского государственного медицинского университета им акад. И.П. Паг лова (1997, 1998).
Публикации.
По теме диссертации опубликовано 9 работ.
Объем и структура диссертации.