Введение к работе
АКТУАЛЬНОСТЬ ПРОБЛЕМЫ Целью применения липосом в биологии и
медицине является использование возможности целенаправленного воз
действия на клеточные мечбраяы Известно, что фосфолипиды
входят в состав мэибраносвязанных ферментов и влияют на их актив
ность (Бергельсон Л. Д. , Дятдовицкая Э. В.. 1981; Бурлакова Е. В.,
1977), определяют чувствительность клеток к действию гормонов и
различных биологически активных веществ ( Таракулов Я.Х с
соавт. ,1931), участвуют з процессах знергообраговакия (Крепе Е. Ы.,
1981) и синтеза белков ( Pignatti С. et al. ,1981). Эти и другие
исследования поаеолилм применить липосомы как средство для регуля
ции функциональной активности ряда органов и систем. Наиболее пока
зательными эти исследования выглядят при воздействии липосом на
сердечно-сосудистую и дыхательную системы (Бергельсон Д. и
др. ,1981; KailyQ. , 1983; Булгаков R Г. с соавт. ,1987). Кроме того,
липосомы могут проявлять сорбционную активность по отношению к эк-
80- и эндотоксинам ( Bangha-n A. D. et. al. ,1965; Стефанов A. R с
соавт,, 1985). На основании вышеизложенных данных, использование
"пустых" липосом как лекарственного средства имеет несомненную ак
туальность и преляе всего для воздействия на поврежденные тканевые
и клеточные структуры. Однако для эффективного использования ли
посом имеются ограничения, связгшные с их фармакокинетикой. Введен-
ные внутривенно липосомы быстро выводятся из кровотока (Julіало
R L. , Stamp 0. ,1975; НлПКІе G.H. et al. ,1978) И ИХ основная масса
обнаруживается в печени, селезенке, легких ( Бекаї А. Ч ot al.,
1974; Бґппогача S. et al., I960). Бее попытки изменить распределе
ние внутривенно ьведен - ных липосом по органам путем изменения
состава, варяда и размеров липосом привели лишь к незначительным успехам ( Tanaka Т. otal.,1975).
Принципиально новое распределение липосом в организме было подучено при их локальном введении ( Dingle J.Т. et al., 1978; lvey H. et al., 1977). Однако ыногич вопросы, связанные с возможностью местного применения лилосом ( степень окисиенности липосомадьных липидов, биологическая эффективность и токсичность) до настояиего времени окончательно не решены. Известно, что даже "пустые" липосомы вызывают реакции при введении в организм: повышение уровня глюкозы в крови и мозге ( Вівоп Е. et al.,1979), нарушение свертываемости крови ( Black CD. V., Greeonadis а ,1977), уменьшение содержания пролаїстина в сыворотке ( Nicco М.С. et al. ,1678). В доступной нам литературе мы не встретили сиетемати&ированных данных б механизмах побочных изменения, которые называют липосомы. Вместе с тем это имеет не только теоретическое, но и практическое значение, так как ананиэ механизмов побочных эффектов и ряд методических приемов позволят успешно применить липосомы в различных областях биологии и медицина
ДВДЬ И ЗАДАЧИ ИССЛЕДОВАНИЯ. Установить изменение биологических свойств липосом в зависимости от степени их окисленности, кратности введения в организм в Норме и э условиях зндогешшой интоксикации. Соответственно этому в работе были поставлены следующие задачи:
-
Выбрать состав и методы получения липосом разной степени окисленности.
-
Изучить некоторые эффекты действия липосом разной степени окисленности на клетки ' и гомогеиаты тканей.
-
Исследовать динамику функционального состояния печени у ин-тактных животных после двукратного и длительного парентерального введения липосом с заданной степенью окисленности липидов.
-
Оценить состояние печени у животных с эндогенной интокоика-
- з -шей.
5. Установить выраженность поареладения печени у животных с эндогенной интоксикацией пасха двукратного и длительного парентерального введения яипоеоы с заданной степенью окисденностн липидов.
новизна ішученйд результатом
Разработан спосов получения липосоы, позволявший приготовить препарат с варанее ааданнын содержанием продуктов ШЛ. Изучены некоторые эффекты липосом разной степени окисленности на клети" и гоиогеваты тканей. In vitro показано, что дипосомы разной степени окисдешюсти окаэызаир различное влияние на клетки и субклеточные фракций печени. Степень инаправленность влияния липосом на резистентность эритроцитов, бластогекеа Т- и й- лимфоцитов, пере- ; кмсное окисление лішидов печени и бактерицидное действие находится в прямой зависимости от степени окисленности липосомадьнызс липидов.
Впервые проведено комплексное исследование Функционального состояния печени после двукратного и длительного подкоаного введе-кия дипосои у интактных аивотных к аівотнвх с эндогенной интоксикацией, вызванной локальным гнойно- воспалительным процессом. Показа- *' но, что длительное введение дипосои вызывает повреждение печеночных клеток, определяемое по изменению активности органоспецифичиых фер-донтоа (гистидазы и уроканинааы) и ыожет приводить к «вменению ые- ' таоолической активности печени в белковом и днпидном обмене. Подобные ае изменения при двукратном введении липосом менее ' выражены и носят транзйторныя характер. Установлена возможность исподьвования двукратного введения "средне окисленных*' лилосом при зндогенной ин- '* токсикации.
НАУЧНО- ПРАКТИЧЕСКАЯ ЗНАЧИМОСТЬ РАБОТЫ Результаты исследования имеют как< теоретическое, так и практическое значение, поскольку раскрывают новые аспекты в проявлении токсичности липосом при их использовании для лечения патологических . процессов. Существенную
- 4 -роль при использовании липосоы имеет оценка функционального состояния гачеки, так как длительное применение лецитин-холестериновых липосом на фоне ааболеваний, сопровождающихся нарушением фумкцио-нального состояния печени, может уоишть проявление печеночной недостаточности. Показано, что биологическое действие липосом на клетки про- и эукариот может быть обусловлено степенью их окислеи-ности, что должно учитываться при воздействии на различные патологические процессы.
АПРОБАЦИЯ РАБОТЫ. Штерналы диссертации доложены и обсуадоны:
па совместной научно-методической конференции экспериментальной лаборатории медико-биологических проблем при. Кемеровском Государственном медицинском институте и кафедры биохимии ШЩ 14 сентября 1990 г.;
на Международном симпозиуме "Лнпосома в биологии и медицине" в г. Ташенте 12-16 ноября 1990 г.;
на Всесоюзной конференции "Огнестрельная рана и раневая инфекция" в г.Ленинграде 19-21 февраля 1991 г.;
на заседании областного хирургического общества в г. Кемерове 17-18 марта 1991 г.
ПУБЛИКАЦИИ. По теме диссертации опубликовано 5 научных работ.
ОБЪЕМ РАБОТЫ. Диссертация излоягвз на 132 страницах машно-писного текста, состоит из введения, обзора литературы, 4 глав собственных дачных, заключения, выводов и указателя литературы, включающего 68 работ огечесгвонных авторов и 116 работ зарубежное авторов. Рабоїа иллюстрирована цифровыми таблицами (3) и рисунками (29).