Введение к работе
.Актуальность темы. Одішм.лз основных направлений современной эндокринологии является биохимия белковых гормонов -важнейших биорегуляторов всех видов обмена в организме. Уже выделено большинство белково-пептидных гормонов человека, изучена их химическая структура, исследуется взаимосвязь их структуры и специфической физиологической функции. .
Многие белковые гормоны характеризуются полифункциональ-ностью. Предполагают, что она связана .с отдельными пептидными участками их молекул. Другой причиной.полифункциональности белковых гормонов может быть молекулярный полиморфизм, который привлекает все более пристальное внимание исследователей.
Одним из наиболее интенсивно изучаемых в настоящее время белковых гормонов, вырабатываемых в организме человека и тавотных специализированными клетками передней дола гипофиза /лактотрофами/, является пролактин. Необходимо ответить, что он был одним из последних выделенных и охарактеризованных ги-пофизарннх гормонов человека. Причиной этого является низкая концентрация пролактина в гипофизе человека и трудность его выделения в чистом виде. Однако интерес к нему велик из за широкого спектра его биологических эффектов /порявда 85 функций/. Наиболее важной стороной его физиологического действия у млекопитающих считают непосредственное вовлечение в регуляцию процессов репродукции.
Как установлено, для пролактина, выделяемого из гипофиза, свойственна не только полифункциональность, но. а природный молекулярный полиморфизм. При этом изофоркы гормона могут различаться не только по физико-химическим, но я по иммунологическим и биологическим свойствам. Они могут изменяться под влиянием различных физиологических воздействий.
Работами ряда исследователей показано, что у женщин при беременности происходит значительное накопление иммунореак-тивного пролактина в амниотической жидкости, причем в количестве, значительно перевышающем его уровень в крови. Предполагается, что основным источником амниотического пролактина является децидуальная ткань. Физиологическая роль амниотического пролактина пока остается неясной. Мало исследованы
его физико-химические, иммунохимические и биологические свойства, молекулярные формы и шс соотношение. Вместе с тем вопрос о свойствах амниотического пролактина, его роли при беременности и взаимоотношениях с гипофизарным пролактином представляет значительный интерес как для эндокринологии, так и для акушерства.
Цель и задачи исследования. Целью настоящей работы явилось изучение пролактина амниотической жидкости женщин, его содержания и качественного состава в различные сроки беременности, физико-химических, иммунохимических и биологических свойств этого гормона в сравнении со свойствами гипофизарного пролактина. Для осуществления намеченной цели были поставлены следующие конкретные задачи:
-
Выделение и очистка амниотического пролактина человека.
-
Сравнительная физико-химическая характеристика амниотического и гипофизарного пролактина.
-
Исследование биологических свойств высокоочищенного амниотического пролактина.
-
Изучение иммунохимических свойств амниотического пролактина человека в сравнении с гипофизарным.
-
Изучение динамики содержания пролактина и отдельных его молекулярных форм .в амниотической жидкости в процессе развития беременности.
Научная новизна работыt Проведено исследование физико-химических, иммунохимических и биологических свойств пролактина, выделенного в высокоочищенном виде из амниотической жидкости беременных женщин. Установлено их совпадение с аналогичными свойствами доминирующей формы гипофизарного гормона с молекулярной массой 23 кДа.
С помощью иммунохимических методов установлено, что амнио-тический пролактин, а также пролактин децидуальной ткани проявляет молекулярный полиморфизм, характерный и для гипофизарного гормона. Впервые изучена динамика изоформ амниотического пролактина в ходе беременности. Во все сроки в амниотической жидкости обнаружены три формы гормона - с молекулярной массой 23 и 25 кДа /примерно в постоянном соотношении/ и особая высокомолекулярная форма, количество которой резко возрастает в 22.-29 недель беременности. Причем пик высокомолекулярной формы про-
- з - Sl
лактина совпадает с максимумом общего содержания иммунореак-тивного гормона, что ставит вопрос о специфической физиологической роли высокомолекулярной формы.
Теоретическая и практическая значимость работы» Результаты настоящих исследований расширяют современные представления о свойствах пролактина. Идентичность свойств преобладающей формы амниотического и гипофизарного пролактина указывает на то, что при определенных физиологических состояниях организма экспрессия гена пролактина возможна не только в таком высоко-спеииализированном органе, каким является гипофиз, но и других тканях, обеспечивающих репродуктивные процессы.
Полученные данные представляют теоретическую и практическую ценность, для специалистов-биохимиков, занимающихся изучением свойств, физиологической функции и полиморфизма пролактина.
Представляется перспективным использование в акушерстве данных о полиморфизме амниотического пролактина и резком нарастании как общего содержания, так и высокомолекулярной формы гормона в ашшотической жидкости в середине беременности. Выявленный характер динамики данного пула гормона может иметь специфическое значение для нормального протекания беременности ' и обеспечения необходимых условий для внутриутробного развития плода.
Полученные в работе сведения могут быть включены в обзоры и курсы лекций по биохимии, эндокринологии и акушерству в разделах, посвященных структуре и физиологической роли белково-пептидных гормонов.
Апробация работы. Материалы диссертации доложены и обсуж-цены на III Всесоюзном съезде эндокринологов Аашкент, 1989г./» т XI научной конференции болгарских аспирантов с международным участием /Москва, 1989 г./ и на межлабораторной конференции Института экспериментальной эндокринологии ВЭНЦ АМН СССР.
Публикации: По материалам диссертации опубликованы 2 тези-;ов докладов и 2 статьи приняты в печать»
Объем и структура диссертации. Диссертационная работа состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов исследования, изложения результатов собственных исследо-)аний и их обсуждения, выводов и списка литературы /%6Ь ссылок/.
Работа изложена на /Л7 страницах машинописного текста, иллюстрирована & рисунками и Я> таблицами.