Введение к работе
Актуальность тема.Интенсификация развития животноводства зависит от внедрения в производство нових технологических приемов и от использования новейших данных в области биохимии,физиологии, генетики.позволящих в ранней возрасте распознать потенциальные возможности организма дивотных. йассичесхая биохимия,в центре внимания которой находятся разнообразные системи обменных процессов и активность ферлентоз, катализирующих отдельные обменные реакции, сохранила свое знгяение для ветеринарии.В классической биохимии происходят сущестзенше изменения, связанные с созданием многочисленных принципи&тьно новых методов исследования,таких как имыуно-электрофореэ.энзимэлектрофореэ в крахмальном и поли акрил амид ном геле,разнообразных форм хроматографии.что приводит к более углубленной детализации напих знаний в области нормальной биохимии и патобисхпмии мшотных.Использование методов "с высокой разреаав-цей способностьо позволило показать м ноле ств енно сть ряда ферментов, з анимавцих ключевые позиции в обмене веществ,в частности ХДГ. Лактатдегідрогеназа /ЛДГ/ - фермент, катализируюций одно из узловых звеньев процесса гликолиза - обратимое превращение пирувата в лактат.На этом этапе пересекается несколько метаболических путей.3 большинстве тканей нивотных ХДГ существует в виде пяти молекулярных форы,которые различаются по химической структуре,кинетическим параметрам. Известно.что ЛДГ претерпевает знгпительные изменения в ходе дифференцировки клеток и тканей,однако,исследований, где бы изучались изменения изоферментного спектра ХДГ в биологических жидкостях и тканях сельскохозяйственных лизотных в онтогенезе,при различных физиологических состояниях и патологических процессах,очень мало.Данные по изменении изоферментного спектра ЛДГ при различных физиологических состояниях и патологических процессах мояно использовать при раннем прогнозирозапгаї хозяйственно-полезных признаков,а такае как биохимические индикаторы контроля за изменением обменных процессов в тканях п органах сельскохозяйственных еивотных.Однако,многие вопросы,связанные с влиянием стадии л актации,породы,возраста нивотных, сезона отела и продуктивности на активность ХДГ.ее изоферментов и активность фрук-тозобисфосфат-альдолази /ОБОА/.изучены еще недостатенно.Остается неизученным вопрос о взаимосвязи меяду активность» ЛДГ и ее субстратами - пирузатом и лактатом.Практически отсутстзувт данные по изменен активности ЛДГ.ее изоферментов,ОБЭА, содернанни ппрузата
1-8у
і
и лактата в молоке коров черно-tie отрой и айрширской пород и по взаимосвязи между этими прказателяыи в крови и молоке.
Цель и задачи исследований. Мы поставили своей целью охарактеризовать динамику активности ферментов и содержания метаболитов углеводного обмена в крови и молоке у коров черно-лестрой и айрширской пород в зависимости от стадии лактации,породы,возраста, сезона отела и продуктивности.В этой связи задачами исследований явилось определение в крови,молозиве и молоке здоровых и больных ранней формой мастита коров следующих показателей: содержание глюкози, лактози,пирувата и лактата,активность ФЭДА.ЛДГ и ее изофер-ментов.
Научная новизна состоит в том.что предложена модификация метода определения изоферментного спектра ЛДГ в сыворотке крови и способа выявления изоферментов ЛДГ в молоке.Впервые было проведено комплексное изучение как субстратов /пирувата и лактата/,так и катализирующего их фермента /ЛДГ/. Получены данные по содержанию показателей метаболизма углеводов и активности ОБФА.ЛДГ и ее изоферментов в крови,молозиве и молоке коров в динамике лактации, в зависимости от породы,возраста,сезона отела,продуктивности,а также в молоке коров1,больных ранней формой мастита. Установлена коррелятивная зависимость между изученными показателями в крови и молоке.
Практическая ценность работы.Результат проведенных исследований могут быть использованы как справся Half материал по возрастной биохимии крупного рогатого ш>та,при контроле за качеством молока,при изучении патогенеза и диагностики мастита.Были модифи-. цироваш методы:'!. Фособ выявления изоферментов ЛДГ молока и 2. Модификация окраски ЛДГ.Ыодифицированный метод по определению изоферментов ЛДГ в сыворотке крови вошел в Методические указания к лабораторному практикуму для студентов ветеринарио-биологичео-кого факультета "Энзкмология" и в Методические указания по спецкурсу "Методы современной биохимии". Шособ выявления изоферментов ЛДГ в молоке вошел в Методические указания для слушателей факультета повышения квалификации преподавателей сельскохозяйственных вузов "Злектрофоретическое разделение белков молока".Все методические указания утверждены учебно-методическим советом ве-теринарно-биологкческого факультета.
Агїробация работы. Основные положения работы доложены на заседании Московского отделения Всесоюзного биохимического общест-
ва при АН СССР /Москва,МВА,январь 198бг./;на отчетных научных конференциях Московской ветеринарной академии /Москва.МВА,февраль 1986,январь 1987г./;на десятой научной конференции молодых ученых /Москва, МВА, апрель 1987г./
Публикации результатов исследований.По теме диссертации опубликовано две научных работы.
Структура и объем работы.Работа состоит из введения, обзора литература,экспериментальной части.заключения.выводов, списка ли-тературы.Диссертация содержит 206 страниц машинописного текста, включая 46 таблиц и 41 рисунок.В библиографический список входит 235 работ /142 отечественных и 93 зарубежных авторов/.