Введение к работе
Актуальность темы. Известно, что внутриутробное развитие будущего ребенка определяется двумя основными системами. Во-первых, это геном, в котором "записана" информация о первичной структуре всех белков будущего организма. Однако, генетический аппарат - это весьма устойчи-. вая и инертная система. Поэтому, нарушения развития, обусловленные дефектами на уровне отдельных генов и хромосом, составляют не более 2-3% от общего числа врожденных уродств. Вторая, важнейшая система регуляции эмбрио/фетогенеза - это иммунная система, реализующая свое влияние через продукцию молекул-регуляторов развития, так называемых факторов дифференцировки и морфогенеза. Именно от этих регупяторных молекул во многом зависит экспрессия генов раннего развития, формирование нервной трубки, функциональное и морфологическое созревание клеток разных органов и тканей. Посредством органо-специфических иммунных реакций (гуморального и клеточного типа) иммунная система принимает непосредственное участие в процессах органогенеза на этапах раннего эмбрионального развития.
Признавая важную роль иммунной системы в раннем онтогенетическом развитии, многие исследователи ограничиваются лишь констатацией зависимости эмбриогенеза от некоторых (неидентифицированных) материнских антител, без детального анализа самого феномена, что, в частности, не позволяет использовать соответствующие эмпирические находки для разработки новых методов акушерской диагностики и прогноза. Следует подчеркнуть, что если участие иммунной системы и, в частности, регуля-торных эмбриотропных антител в механизмах внутриутробного развития не вызывает сомнений, то механизмы этого участия остаются пока мало изученными и далекими от понимания. В этой связи исследования, направленные на идентификацию эмбриотропных антител, их антигенов-мишеней и систематическое изучение зависимости нормального эмбриогенеза от содержания в кровотоке матери определенных видов антител представляются весьма актуальными.
Цель и задачи работы. Цель настоящей работы - разработка, клиническая апробация и внедрение в практику здравоохранения нового яабора-торно-диагностического метода прогноза развития беременности, основанного на оценке содержания ряда естественных эмбриотропных антител в сыворотке крови женщины.
Для достижения поставленной цели были сформулированы следующие основные задачи:
-
Выявить и выделить основные белковые антигены клеток человека, изменения содержания естественных (физиологических) антител к которым, наиболее часто сопровождают неблагоприятные исходы беременности.
-
Разработать эффективные методы хроматографической очистки указанных антигенов.
-
Изучить особенности развития беременности у экспериментальных животных с индуцированными изменениями в содержании эмбриотропных антител к одному из таких антигенов - белку S100.
-
Оценить содержание циркулирующих антител к выделенным антигенам у женщин фертильного возраста при различных (благоприятных и неблагоприятных) исходах их беременности.
-
Собрать и проанализировать репрезентативные банки данных, отражающие исходы беременности у женщин, имевших разной степени отклонения в содержании определяемых эмбриотропных антител.
-
Изучить популяционные особенности показателей содержания эмбриотропных антител у женщин, проживающих в экологически благоприятных и неблагоприятных регионах.
Научная новизна.
-
Впервые установлено, что поддержание определенной концентрации в крови матери естественных, эмбриотропных антител класса IgG к белкам ОБМ, S100, АСВР14/18 и МР-65 является важным моментом в обеспечении нормального развития эмбриона и плода.
-
Впервые выделены и охарактеризованы новые, ранее не описанные белки АСВР 14/18 (анионный белок ядерного хроматина) и МР-65
(поверхностный мембранных белок из семейства интегринов), являющиеся эндогенными мишенями физиологических эмбриотропных антител.
-
В модельных экспериментах впервые показано, что за счет дозированного изменения содержания антител к белку S100 в кровотоке беременных животных, можно влиять на количество приносимого приплода и повышать жизнестойкость детенышей, либо напротив, препятствовать развитию беременности.
-
Впервые проведена оценка содержания антител к вышеназванным белкам в крови женщин в условиях нормального развития беременности и при разных формах патологии развития эмбриона и плода. Созданы банки данных о содержании естественных эмбриотропных антител к белкам ОБМ, S-100, АСВР14/18 и МР-65 в крови женщин детородного возраста, необходимые для прогноза вероятности патологии развития эмбриона и плода при обследовании женщины уже в первые недели беременности.
Практическая значимость работы. На основании результатов выполненных исследований, разработан и адаптирован к условиям широкого практического применения новый лабораторно-диагностический метод прогноза аномалий развития эмбриона/плода, получивший наименование ELI-P-TEST (от ELISA-detected Probability of Pathology in Pregnancy). Данные, полученные в ходе научно-клинического использования разработанного метода, свидетельствуют о его эффективности в качестве способа прогноза нормального развития эмбриона и плода.
Внедрение результатов работы в практику. Разработанный метод и необходимые для его выполнения тест-наборы реагентов прошли испытания на клинических базах, рекомендованных Минздравом РФ (1994-1996). По результатам испытаний Комиссия по ИФ А и РИА наборам Комитета по новой технике МЗ РФ приняла решение о возможности практического применения набора ELI-P-Test (Приказ Минздрава РФ № 219 от 20 июля 1998 г.).
Апробация работы. Основные материалы диссертации опубликованы в работах [1-12], докладывались на IV Всероссийском Конгрессе «Экология
5'
и здоровье детей» (СПб, 1998), а также на научных семинарах ОКЭИ ГКБ
№29. ' '
' Структура и объем диссертации. Диссертация состоит из введения, четырех глав., заключения, в котором сформулированы основные выводы, списка цитируемой литературы из 111 наименований. Содержание работы изложено на 91 странице основного текста, проиллюстрировано 10 таблицами, 4 рисунками и б схемами. Общий объем диссертации составляет 107 листов.