Введение к работе
Актуальность проблены. Нейтрофильные гранулоцити являются вижущей силой воспаления как острого так и хронического, а в олее общем плане они - ключевые эффекторы гомеостаза. Нейтрофилы оставляют первую линию защиты организма, мигрируя первыми из ровяного русла в очаг воспаления. Обладая значительным итотоксическим потенциалом, нейтрофилы разрушают в очаге оспаления как патогенные микроорганизмы так и собственные ткани, роме того, продуцируя ряд факторов и медиаторов, нейтрофилы егулируют уровень развития воспалительных реакций. Степень овлечения нейтрофилов отражает глубину патологического процесса, ак дозируя количество вводимых подкожно стимуляторов, ейтрофилов можно получить весь спектр интенсивности оспалительного процесса, от заметного лишь на гистологическом ровне до значительного некроза тканей. Воспалительные реакции рганизма, несмотря на большой интерес к данной проблеме со ремен древней Греции, остаются по сих пор одной из острейших роблем современной медицины. Так по признанию американских рачей только респираторный дистресс-синдром ( воспалительная еакция, вызванная внутрисосудистой активацией нейтрофилов, ледствием чего является повреждение легочного эндотелия и отек егких) ежегодно уносит около 80000 жизней.
Цель работы. Работа является частью комплексного исследования роводимого в НПП " Биоцентр " ФИБХ РАН по влиянию факторов икроокружения на функциональную активность клеток иммунной истемы в норме и патологии. Цель настоящей работы заключалась: в азработке модели воспалительной реакции для изучения итотоксической активности нейтрофилов in vivo в очаге зспаления; в непосредственном изучении цитотоксической ктивности нейтрофилов in vivo; в изучении предпологаемых эханизмов ингибирования и инволюции воспалительных реакций на ровне нейтрофилов. Для этого планировалось разработать эдификацию воспалительной реакции, индуцированной инъекцией ямозана в перитонеальную полость, позволяющей оценивать уровень ітотоксичности нейтрофилов в очаге воспаления. Изучить: -ітотоксическую активность нейтрофилов in vivo; влияние" известных теивоспалительных препаратов на цитотоксическую активность гйтрофилов; влияние факторов сыворотки крови на функциональную
активность неитрофилов; влияние температуры как наиболее характерного симптома воспалительных реакций на функциональную активность неитрофилов из очага воспаления; процессы нормальной гибели неитрофилов в очаге воспаления.
Научная новизна и практическая значимость работы. Разработанная модификация воспалительной реакции позволила впервые измерить цитотоксичєскую активность неитрофилов in vivo. На данной модели были изучены некоторые параметры цитотоксической активности: кинетика лизиса клеток, возникновение цитотоксической активности при индукции воспалительной реакции и др. Данная модель может использо-ваться для скрининга антивоспалительных препаратов, позволяет оценить влияние препарата на цитотоксичєскую активность неитрофилов in vivo. Показано, что факторы сыворотки крови и сывороточный альбумин ингибирует функциональную активность неитрофилов, предложен возможный механизм. Показано, что в очаге воспаления in vivo и in vitro при инкубации клеток при повышенной температуре у неитрофилов развивается тепловой шок, который значительно ингибирует функциональную активность клеток. Обнаружено, что при миграции в очаг воспаления у неитрофилов активируется программа клеточной гибели, приводящая к разрушению ДНК и затем к гибели клеток.
Апробация работы. Основные материалы диссертации доложены и обсуждены: на научных семинарах Филиала Института биоорганической химии им. М.М. Шемякина и отдела Иммунологии ИБХ РАН; на I-Всесоюзном иммунологическом съезде (Сочи, 1989); Международном симпозиуме "Теоретические и прикладные аспекты биотехнологии лабораторных животных" ( Пущино 1990); международном семинаре по прикладной биотехнологии( Пущино 1993). По материалам работы опубликовано 4 печатных работы, в настоящее время две работы готовятся к печати.
Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 115 страницах и состоит из следующих разделов: введение, литературный обзор, экспериментальная часть, обсуждение результатов, выводы и список цитированной литературы, включающий 204 работ. Диссертация содержит 2 таблицы и 14 рисунков.