Введение к работе
Актуальность_темьід Анализ научной литературы по распространению ФГК-недосгаточности в ряде зарубежных стран отмечает, что частота встречаемости дефекта выше ч зонах с высоким коэффициентом инбридинга.
Б силу этнических особенностей Азербайджана, результирующих высокий коэффициент инбридинга, а такке с учетом эндемичности некоторых наследственных нарушений, в частности, энзимо- (Мов-суи-заде К.М. и др., 1984; Лысенко Л.Я. и др., 1973) и гемоглобинопатии (Мовсум-заде К.М. и др., 1985), г "сдставляется актуальным исследование распределения среди населения республики мутантних форм эритроцитарной ЙГК. Актуальность изучения ФГК-дефи-цита возрастает с учетом отсутствия как в Азербайджане, так и в других регионах страны работ по данному вопросу.
Л22ь_и_задачКд Целью настоящего исследования является анализ частоты и биохимических особенностей аномального фермента $ГК среди лиц азербайджанской популяции.
Для выполнения поставленной цели выдвинуты следующие задачи:
-
разработка и внедрение метода идентификации мутантной эритроцитарной ФГК, приемлемого для клинических и популяционных исследований;
-
проведение популяционных и клинико-гематологических исследований среди населения города Баку, а также Шекинского и Ахсу-инского районов республики;
-
осуществление клинико-гематологического и генеалогического анализа в семьях пробандов с дефицитом фермента 2ГК;
'4) выделение, частичная очистка и изучение физико-химических и кинетических свойств различных форм фермента эритроцитарной ФГК из крови доноров и пробандов,
Научная_новизна1_ Разработан прлуколичественный. скринирующий
метод флюоресцирующих пятен для идентификации эритроцитарного ЙГК-дефицига при массовых обо; 'дованиях.
Внедрение метода осуществлено в детской неврологической клинике и на кафедре невропатологии и медицинской генетики Азербайджанского ордена Трудового Красного Энамени государственного медицинского университета им. Н.Нариманова.
Впервые в Азербайджане проведено массовое обследование жителей на выявление ФГК-недостаточности, изучена и установлена час-
тота встречаемости ЗГК-дефицита в 2-х районах (Шеки и Ахсу) рес
публики, а такне в г. Баку на фактическом материале около 4000
образцах крови. >
Модифицированным нами методом очищены, выделены и охарактері. зованы по физическим, химическим и кинетическим параметрам нормальные и мутантные молекулярные варианты $ГК.
^сновные_пможения^_вшоси№е_на_защту_. Гетерогенные \вари анты -5ГК эритроцитов человека дифференцировались на основании изучения уровня активности, сродстза к суСстратам З-ff и АТФ, злектрофоретической подвижности, рН-оптимума среды определения, термостабильности, нуклеотидной специфичности ферментного препарата, выделенного и очищенного разработанным нами методом. Указанный комплекс методических приемов позволил выявить 4 типа мутантних вариантов. Для облегчения и ускорения обнаружения -мугантных вариантов б клинических и популяциош'ък исследованиях предлагается модифицированный метод идентификации ЗГК-недоста-точности эритроцитов,по степени дефлюоресценции НАД»Н.
ШГК-энзимопатия эритроцитов в Азербайджане распространена с частотой 0,0292 -0,0,505, имеет наследственный характер, что подтверждается сопоставлением числа ожидаемых и наблюдаемых носителей мутантного аллеля в ядерных семьязс и-соответствует гипотезе сцепленного с Х-хромосомой наследования. Клиническое проявление ІЕГК-недостаточности отличается полиморфизмом, наиболее характерны гемолитическая анемия и нервно-психические нарушения.
^1р^ктическая_ценность._ Разработанный нами метод флюоресцирующих пятен для идентификации эритроцитарной STK можно использовать в клиниках как диагностический тест.
Доступность пересылки образцов крови по почте, не оказывающая значительное влияние на ее качество, а также возможность исследования более 100 проб в день позволяет использовать указанный метод для массовых популяционных работ по выявлению и изучению распространения ФГК-недостаточности.
Своевременная диагностика аномальных ферментов способствует проведению эффективных мероприятий по коррекции обменного нарушения, с целью предотвращения клинических осложнений и нервно-психических отклонений. С другой стороны, предлагаемый метод
5.
позволяет выделять группу гетерозиготных носителей мутантного гена, что может быть использована при медико-гензтлческом консультировании.
Идентифицированные молекулярные варианты 0ҐК позволяй! установить характер мутации белка, свойственной популяции Азербайджана.
-ОубликациИд По материалам диссертации опубликовано 9 научных работ, из которых: 5 - в центральной и 4 - в республиканской печати.
_Апробацкя_рабогы_. Материалы диссертации доложены и обсуждены на П-ом Всесоюзном съезде медицинских генетиков ( г.Алма-Ата,
-
г.); на Всесоюзном гаколе-семинаре "Молекулярная биология и медицина" ( г.Ленинград, 1990 г.); 11-ом съезде гематологов и трансфузиологов Азербайджана (г.Баку,1990 г.): республиканской конференции аспирантов (г.Баку, 1984 и 1986 г.г.); научных се-М"нарах Института молекулярной биологии и биотехнологии НПО "Био-тех" АН Азерб. Республики (г.Баку, 1990,1991 г.г.); заседании проблемной комиссии "Патология эригрона" ВГНЦ МЗ СССР (г.Москва,
-
г.); Всесоюзной научной конференции молодых ученых и специалистов, где выступление на тему:"Случаи сочетаниях форм дефицитов ферментов фосфоглицераткиназы с глюкозо-6-фосфатдегид-рогеназой" отмечено дипломом (г.Баку, 1991 г.).
^бъем_и_сг2уктура_работыл Диссертация изложена на 122 страницах машине мси; состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и использованных методов исследований, собственных результатов исследований и их обсуждения, заключения, выводов и библиографического указателя, содержащего 171 источников, из коих 16 отечественных и Еозарубежных авторов, содержит is таблиц и 14 рисунков.