Введение к работе
Актуальность проблемы Успешное применение лекарств для лечения или
предотвращения заболеваний во многом зависит от их селективности. Вопрос доставки лекарственного препарата в место его действия без побочных эффектов на остальные органы до сих пор остается открытым. В настоящее время признано, что одним из универс&тьных носителей, увеличивающих эффективность лекарственных средств, снижающих их токсичность и системное действие, являются липосомы.
Исследования последних лет открывают перспективу использования липосомных аэрозолей для лечения болезней органов дыхания. Эпидемиологические сведения во многих странах об увеличении летальных исходов бронхиальной астмы в результате использования агонистов (Ь-алренорецепторов вызвали широкую дискуссию по поводу эффективности и безопасности антиастматических лекарственных средств. Использование липосомной формы ингаляционных В2-агонистов, возможно, окажется новым направлением совершенствования препаратов данного класса.
Создание наиболее оптимальной и стабильной липосомной формы препарата обеспечивает широкая возможность выбора величины, структуры и липидной композиции везикул. Специфичность лишщного состава липосом в значительной степени определяет механизм и степень их связывания с клетками. В ряде работ отмечалось, что наибольший контакт липосом с клетками достигается при формировании липосом из фосфолипидов тканей-мишеней [Саатов 1990, Розенберг, 1993]. В связи с этим становится очевидной высокая аффинность липосом, полученных на основе фосфолипидов легкого теплокровных к клеткам бронхиального дерева, что позволит использовать их в качестве носителя бронхолитических препаратов.
Стратегия направленного транспорта липосом заставляет обратить внимание на типы соединений, способных служить векторами в доставке везикул к клеткам-мишеням. Одна из морфофункциоиачьных особенностей респираторного тракта - наличие сурфактанта легких, главной белковой составляющей которого является сурфактантный белок A (SP-A), относящийся к семейству коллагеновых лектинов. Уникальные свойства эюй молекулы привлекаю!" к ней большой иш«рес исследователей в последние годы. SP-А участвует в процессах организации сурфакгангных мембранных структур, обладая свойствами для связывания, транспорта и даже "сортировки" легочных фосфолипидов [Johansson, 1997]. В то же время, SP-A взаимодействует через специфические рецепторы с макрофагами и vno.mmume.r их фагоцитарную яктинность [Gaypor^ 1995., WeKshaclr 1994] При таком сочетании функций, вероятно, существует потенциальная возможность активного участия эндогенного SP-A в доставке липосом к клеткам-мишеням
дыхательных путей. Этот вопрос в настоящее время не изучен. Однако исследования в этом направлении могут оказаться полезными в понимании механизма взаимодействия липосом с клетками респираторного тракта, что в свою очередь укажет пути повышения эффективности липосомных лекарственных форм в терапии заболеваний органов дыхания.
Цель и задачи исследования. Работа выполнена с целью получения наиболее эффективной липосомной формы агониста р2-адренорецепторов - фенотерола и уточнения механизма ее действия в дыхательных путях. Для достижения цели бьши поставлены следующие задачи:
-
Получить различные липосомные формы фенотерола, варьирующие по микровязкости бислоя и заряду.
-
Оценить эффективность действия полученных липосомных препаратов в сравнительном плане на различных моделях для выявления наиболее оптимальной формы.
-
Изучить биофизические свойства липидного бислоя полученных липосом (фазовое состояние, поверхностный заряд) и оценить их влияние на лечебное действие липосомного фенотерола.
4. Выяснить роль SP-A в доставке липосомных препаратов к клеткам-мишеням.
Научная новизна работы
Получена новая лекарственная форма р2-агониста - фенотерола, широко используемого для лечения острых проявлений бронхиальной астмы, в виде липосомного препарата. Исследована ее эффективность на экспериментальной модели бронхообструкции у крыс и на культурах клеток, установлена острая токсичность липосомного фенотерола.
Исследовано биофизическое состояние липидного бислоя различных липосомных форм фенотерола. Определены оптимальные параметры микровязкости и поверхностного заряда мембраны липосом для достижения наибольшей эффективности фенотерола.
Впервые выявлено активное участие эндогенного SP-A в целенаправленной доставке липосом из фосфолипидов легкого теплокровных к клеткам дыхательных путей - тучным клеткам и моноцитам.
Практическая значимость работы: __^
Созданы наиболее оптимальные липосомные формы фенотерола из суммарных (ЬпгЪпгтмгтмrcQg легкого свиньи и на основе яичног^ де"нтш'3 с добавлением холестерина и дицетил фосфата.
Количественное определение параметров состояния липидного бислоя липосом из суммарных фосфолипидов легкого свиньи, влияющих на их эффективность, расширяет возможность получения лилосомлых препаратов с таким же лечебным действием на основе других липидных композиций, более доступных и удобных.
Изучение некоторых механизмов взаимодействия липосом с клетками дыхательных путей, возможно, окажется полезным в решении проблемы целенаправленного транспорта липосомкых препаратов для лечения ЗЗиОЛЄБшШИ органов дыхания.
Апробация работы и публикации
Основные положения диссертации доложены на 3-ем Национальном конгрессе
"Человек и лекарство" (Москва, 1996), 6-ом Национальном конгрессе по болезням органов
дыхания (Новосибирск, 1996), XV Word Congress of Asthmology (Montpellier, France,
1996), II Дальневосточной региональной конференции с всероссийским участием "Новые
медицинские технологии на Дальнем Востоке" (Владивосток, 1998), II съезде биофизиков т>—,.,... дллп.— (г\ао\
По материалам исследования опубликовано 13 работ, 1 находится в печати.
Объем и структура диссертации.