Введение к работе
Актуальность темы. По современным представлениям, важное место в развитии патологии, в том числе инфекционной, отводится активным метаболитам кислорода (АМК) (В. А. Барабой, 1989; Fukuzzumi Kazuo, 1986; С.С. Boster ,1989). Считается, что АМК проявляют цитотоксическое действие через инициацию свободнорадикального окисления фосфолипидов мембран, приводящего к развитию окислительного повреждения липидов, биополимеров и надмолекулярных структур клеток (О. Н. Воскресенский, А. П-Левицкий, 1970; А. И. Арчаков, И. М. Махосоев, 1989; О. Yubwa, 1988).
Нарушение структуры клеточных мембран и выход в кровеносное русло продуктов повышенного метаболизма клеток приводит к развитию метаболической иммуносупрессии и может быть одной из причин изменения чувствительности клеток к различным химическим агентам, в том числе к лекарственным препаратам (Е.Г. Кирдей и др., 1992; Л.Г.Прокопенко и др. ,1995).
При инфекционной патологии широко используются аминог-ликозидные антибиотики, обладающие мощным бактерицидным действием и широким антимикробным спектром (А. В. Ухин, 1991). Наряду с этим, этиотропная антибиотикотерапия, безусловно необходимая при активном течении инфекционного процесса, может усугублять нарушения, вызванные инфицированием (В.П. Сильвестров и др., 1990). В последнее время обнаружено, что антибиотики, в том числе аминогликозиды, активно вовлекаются в процессы свободнорадикального окисления (СРО), что может лежать в основе как их токсичности, так и антивоспалительного действия, обусловленного влиянием не только на микробный агент, но и на кислородзависимое повреждение тканей фагоцитами (Н.Ф. Абдрашитова и др., 1996; P.P. Фар-хутдинов и др., 1996). Перспективным направлением в химиотерапии является использование систем целенаправленной и контролируемой доставки в организм различных лекарственных средств, позволяющих значительно снизить их системную токсичность и удлинить время полувыведения препаратов из организма (А.Е. Гуляев и др., 1994; А.И. Перепелкин и др., 1996). Наиболее выгодными с точки зрения биологической совместимости считаются системы доставки, в которых используются собственные клетки организма, в частности эритроциты. В литературе описаны лишь единичные экспериментальные и клинические исследования по введению в организм антибиотиков в
в эритроцитарных носителях (Т.П. Генинг и др., 1988; Ж.Ш. Жу-мадилов и др.,1990;Т.П. Генинг, К. К. Мануйлов, 1991). Практически не изучено их влияние на процессы СРО и иммунологическую реактивность организма.
Цель работы - изучение влияния некоторых аминоглико-зидных антибиотиков, введенных в эритроцитарных носителях, на интенсивность свободнорадикальных процессов и иммунологическую реактивность организма при инфекционной патологии.
Задачи:
-
Разработать чувствительную, точную и экспрессную методику определения концентрации гентамицина и амикацнна в биожидкостях.
-
Изучить кинетику свободных и включенных в тени эритроцитов (ТЭ) антибиотиков в биожидкостях.
-
Изучить влияние свободных и включенных в ТЭ антибиотиков на активность ферментов антиоксидантной системы (АОС) эритроцитов и содержание продуктов перекисного окисления ли-пидов (ПОЛ) в сыворотке крови.
-
Изучить влияние свободных и включенных в ТЭ антибиотиков на выраженность процессов цитолиза и холестаза.
-
Изучить влияние свободных и включенных в ТЭ антибиотиков на иммуномодулирующую активность эритроцитов и имму-ноцитов.
-
Выяснить роль гуморальных факторов клеток селезенки в реализации про- или антиоксидантного и иммуномодулирущего эффектов свободных и введенных в ТЭ антибиотиков.
Новые научные положения, выносимые на защиту:
-
Инфицирование и введение аминогликозидных антибиотиков в высоких дозах снижает активность ферментов АОС, усиливает ПОЛ, процессы цитолиза и холестаза, супрессирует развитие гуморального иммунного ответа (ГИО) на эритроциты барана (ЭБ).
-
Введение антибиотиков в эритроцитарных носителях нормализует показатели ПОЛ, АОС, цитолиза и холестаза, стимулирует иммунологическую реактивность у инфицированных животных.
3. Эссенциале, поливинилпирролидон (ПВП) и лизоцим в
разной степени корригируют прооксидантное и иммуносупрессор-
ное действие свободных антибиотиков. Дополнительная обработка
ТЭ с включенными антибиотиками эссенциале повышает их дефективность.
-
Антибиотики, введенные в свободном состоянии, появляются в кровеносном русле в высоких пиковых концентрациях. Введение антибиотиков в эритроцитарных носителях обеспечивает плавное нарастание их концентрации в крови.
-
Свободные антибиотики аминогликозиды индуцируют выделение цитокинов неприлипающей к стеклу фракцией спленоци-тов, обладающих прооксидантной и иммуносупрессирующей активностью. ТЭ с включенными антибиотиками индуцируют выделение цитокинов прилипающей к стеклу фракцией спленоцитов, проявляющих антиоксидантную и иммуностимулирующую активность.
Научно - практическая значимость результатов исследований. Разработана чувствительная, точная, экспрессная методика спектрофотометрического определения гентамицина и амикацина в субстанции (р.п. №№ 1277-97, 1278-97 от 8.04.97) и биожидкостях. С применением этой методики изучено включение гентамицина и амикацина в эритроцитарные носители, исследована их кинетика в биожидкостях инфицированных стафилококком животных, отработаны оптимальные дозы и схемы введения. Установлено антиоксидантное, мембраностабилизирующее и иммуномодулирующее действие введенных в эритроцитарных носителях аминогликозидных антибиотиков в условиях стафилококковой инфекции. Выявлена роль гуморальных факторов клеток селезенки в реализации антиоксидантного и иммуностимулирующего эффектов эритроцитарных носителей с включенными антибиотиками-аминогликозидами. Экспериментально обоснована перспективность клинических испытаний эффективности эритроцитарных носителей с включенными антибиотиками при инфекционной и других видах патологии .характеризующихся развитием окислительного стресса и снижением иммунологической реактивности организма.
Апробация работы. Основные положения диссертации были обсуждены на научных конференциях молодых ученых Курского государственного медицинского университета (1996,1997,1998); III и IV Российском национальном конгрессе "Человек и лекарство" (Москва 1996, 1997).
Объем и структура работы. Диссертация состоит из введения, обзора литературы (глава 1), описания материалов и методов исследований (глава 2), изложения результатов собст-
венных исследований (главы 3 - 7), заключения и выводов. Работа изложена на 181 странице машинописи и включает 49 таблиц, 9 рисунков, указатель литературы, содержащий 177 источников отечественной и ИЗ зарубежной литературы