Введение к работе
Актуальность темы. Обеспечение животноводства и ветеринарии эффективными и качественными препаратами - одна из главных задач ветеринарной службы России. Огромная роль в решении этих задач отводится биотехнологии - управляемому получению целевых продуктов полезных для народного хозяйства, в том числе и для ветеринарии с помощью биологических агентов: микроорганизмов, клеток животных и растений, вирусов, ферментов и антител.
Тейлериоз - остро и подостропротекающее протозойное заболевание крупного рогатого скота, буйволов, зебу и др. диких животных. Возбудители заболевания относятся к семейству Theileriidae, которые имеют овальную, кольцевидную и др. формы, локализуются внутри эритроцитов, а размножаются множественным делением или шизогонией в ретикулоэндотелиальной системе с образованием внеклеточных или внутриклеточных скоплений. Наиболее часто встречаются виды Th.annulata, Th. parva, Th sergenti, Th. mutans. При тейлериозе повышается температура тела, наблюдается увеличение лимфатических узлов, расстройство сердечнососудистой и пищеварительной систем, отмечают паразитемию лимфатических узлов, паренхиматозных органов и крови. Возбудители передаются от больных или переболевших животных к здоровым пастбищными клещами сем. Ixodidae. (DolanT.T., 1989).
Тейлериоз - это наиболее опасная из протозойних болезней крупного рогатого скота. Она наносит большой экономический ущерб животноводству республик Средней Азии, Закавказья, юга Казахстана и РФ (Нораев Р.Х., 1983; Кущенко З.В., Яременко Т.Г., Досжанов Д.Г., 1989; Тяженов А.А., 1989; .Бадалов Э.Т., Нораев Р.Х., 1981; Тяженов А.А., 1989; Нораев Р.Х., 1996).
За пределами нашей страны тейлериоз зарегистрирован в Африке (Алжир, Египет, Тунис, Марокко, Судан, Ливия, Кения, Танзания, Уганда и
др.), в Центральной и Юго-Восточной Азии (Турция, Иран, Афганистан, Ирак, Сирия, Израиль, Индия, Китай, КНДР и др.) и, наконец, в Европе (Болгария, Румыния, Югославия, Греция, Испания, Италия, Кипр, Франция и др. Т.Т. Dolan, 1989; Е. Pipano, 1989; Hashemi-Fesharki R., 1986; .Uilenberg G., 1990; Uilenberg G., Sahrender В., Silayo R., 1990).
В связи с этим в течение 60 лет ведутся интенсивные исследования в области разработки более эффективной вакцины против данной^ инвазии (Morzaria S.P. et al., 1988; Нораев Р.Х.,1987; Нораев Р.Х., 1988; Сахимов М.Р., Нораев Р.Х., Бадалов Э.Т., 1991; Dolan Т.Т., 1987).
Учеными Всероссийского научно-исследовательского института экспериментальной ветеринарии им Я. Р. Коваленко создана культуральная высокоэффективная вакцина против тейлериоза крупного рогатого скота, профилактическая эффективность которой при производственном применении достигает 98-100%. Существующая промышленная технология изготовления вакцины против тейлериоза включает роллерное культивирование инвазированных тейлериями лимфоидных клеток теленка. Данный метод культивирования является технологически устаревшим, требует больших затрат труда, большого количества стеклянной посуды, не дает возможности поддерживать оптимальные значения параметров культивирования. Был использован метод глубинного культивирования лимфоидных клеток теленка, инвазированных Th. annulata. Метод глубинного культивирования клеток для приготовления вакцины является перспективным, снижает себестоимость вакцины, повышает гарантию надежности и экологическую безопасность.
Многие вопросы данного направления не решены и нуждаются в теоретическом обосновании, дальнейшей разработке и внедрении в практику .Работа выполнена в связи с программой Государственного комитета по науке и технике по решению научно-технической проблемы «Разработать и внедрить новые методы и средства, обеспечивающие стойкое ветеринарное благополучие сельскохозяйственных животных».
Цель и задачи исследований. Целью наших исследований явилась разработка современной промышленной технологии производства вакцины против теилериоза с использованием метода глубинного периодического суспензионного культивирования лимфоидных клеток теленка, инвазированных Th. armulata.
Для достижения этой цели необходимо было решить следующие задачи: -проанализировать существующую промышленную технологию производства вакцины против теилериоза;
- научно обосновать методы глубинного культивирования лимфоидных клеток теленка, инвазированных Th. annulata;
-разработать современную промышленную технологию производства вакцины против теилериоза с использованием метода глубинного периодического суспензионного культивирования лимфоидных клеток теленка, инвазированных Th. annulata.
Научная новизна. Научно обоснован, разработан и внедрен в
промышленное производство метод глубинного культивирования
лимфоидных клеток теленка, инвазированных тейлериями. Разработан алгоритм оптимального управления параметрами процесса глубинного культивирования лимфоидных клеток теленка, инвазированных тейлериями. Разработана современная промышленная технология производства вакцины против теилериоза крупного рогатого скота с использованием метода глубинного периодического суспензионного культивирования лимфоидных клеток теленка, инвазированных Th. annulata.
Практическая значимость. На основе проведенных исследований и практики разработана современная оптимизированная промышленная технология производства вакцины против теилериоза с использованием метода
глубинного периодического суспензионного культивирования лимфоидных клеток теленка, инвазировашшх Th. annulata. Разработаны изменения и дополнения к действующей инструкции по изготовлению вакцины против тейлериоза, утверждены директором ВНИТИБП 25 ноября 1991 года. Получен патент на изобретение №:1838915 «Способ изготовления вакцины против тейлериоза» от ІЗоктября 1992 г.
Апробация работы. Материалы диссертации доложены: на Всесоюзной конференции "Научные основы технологии промышленного производства ветеринарных биологических препаратов", г. Москва, 1991г.,
-на конференции "Производство и контроль медицинских, ветеринарных препаратов, опыт применения и реализации их в странах СНР', посвященной 30- летаю Покровского завода биопрепаратов, 27-28 мая 1999 г.;
-на международной научно-практической конференции , посвященной 80-летию МАВМ и Б им. К.Й. Скрябина - «Проблемы инфекционных и инвазионных болезней в животноводстве на современном этапе» - Москва, июнь, 1999 г.
-Получен патент на изобретение №: 183 8915 «Способ изготовления вакцины против тейлериоза» от ІЗоктября 1992 г.
По материалам диссертации опубликовано 3 печатных работы, получен патент на изобретение №:1838915 «Способ изготовления вакцины против тейлериоза» от 13 октября 1992 г.
Основные положения, выносимые на защиту:
1. Теоретическое обоснование и практическое использование метода глубинного периодического суспензионного культивирования лимфоидных клеток теленка, инвазированных тейлериями в биореакторах;
-
Разработка алгоритма управления параметрами процесса глубинного периодического суспензионного культивирования лимфоидных клеток теленка, инвазированных теилериями;
-
Разработка современной промышленной технологии глубинного периодического суспензионного культивирования лимфоидных клеток теленка, инвазированных Th. annulata при производстве вакцины против тейлериоза;
4.Результаты сравнительных испытаний ранее существующей и предлагаемой промышленной технологии производства вакцины;
5. Практические предложения по разработанной оптимизированной современной технологии.
Диссертация изложена на 120 страницах машинописного текста и содержит введение, обзор литературы, материалы и методы, собственные исследования, обсуждение результатов, практические предложения, список литературы, включающий 237 источников, приложения. Работа иллюстрирована 12 таблицами, 16 рисунками.