Введение к работе
Актуальность темы.
Инфекционный ринотрахеит - одно из самых, распространенных вирусных заболеваний крупного рогатого скота.
Экономический ущерб, приносимый сельскохозяйственному производству инфекционным ринотрахеитом /ИРТ/ складывается из снижения продуктивности, гибели молодняка, нарушения функции воспроизводства, а также затрат на ветеринарно - санитарные мероприятия.
Интенсивное изучение этого заболевания в нашей стране и за рубежом проводится с 50-х годов. Спектр научных исследований охватывает эпизоотологическую характеристику различных регионов, анализ клинических форм заболевания, выделение полевых изолятов вируса и определение штаммовых различий, изучение структуры виригана, биологических свойств вируса и механизмов иммунной защиты организма, разработку лабораторной диагностики и средств специфической профилактики.
В настоящее время борьба с инфекционным ринотрахеитом основывается на вакцинопрофшіалсгаке. На вооружении ветеринарной практики существует ряд эффективных, и безопасных вакцин против ИРТ: живых и инактивированных, в моно- и ассоциированной форме, которые несмотря на создание субъединичных и рекомбинантных вакцин, продолжают оставаться превалирующими типами профилактических препаратов для ИРТ.
Технико-экономические показатели вакцин во многом зависят от выбора клеточного субстрата и метода культивирования вируса.
В нашей стране в производстве вакцин против ИРТ применяют технологию, основанную на репродукции вируса в монослое, главным образом, первично-трипсинизировашшх клеток, выращенных на поверхности стеклянных
фЛ2КС"02. -~Ї2".Т ПрО«ЗПСДЇГТСЛ1*ІІОСТЬ У*. ТруДОСпїКОСТЬ пСийлоЗ^смим
технологии является сдерживающим фактором для производства
инактивированных вакцин, изготовление которых требует значительно большего количества вирусного сырья, чем для живых препаратов.
Одним из перспективных направлений решения проблемы изготовления инактивированных противовирусных вакцин является использование в технологии производства методов крупномасштабного культивирования клеток и вирусов, среди которых наиболее распространенными и экономически выгодными являются методы размножения вируса в суспензии клеток и на поверхности микроносителей.
В связи с этим, при разработке технологии изготовления инактивированных вакцин против ИРТ приобретают актуальное значение вопросы изучения и совершенствования клеточных систем и методов для крупномасштабного культивирования вируса.
Цель и задачи исследований.
Целью исследований являлось изыскание наиболее технологичного способа культивирования вируса ИРТ для производства инактивированной вакцины.
Исходя из поставленной цели, необходимо было решить следующие задачи:
1. Провести сравнительный анализ чувствительности к вирусу ИРТ
различных культур клеток, перспективных для крупномасштабного
выращивания.
2. Изучить методы крупномасштабного культивирования вируса ИРТ в
суспензии клеток и на микроносителях.
3.Изыскать высокотехнологичный метод культивирования вакцинного штамма вируса ИРТ "ТК-А ВИЭВ ", приемлемый для изготовления инактивированной вакцины.
4.0пределить условия хранения вакцинного вируса.
5.Испытать иммуногенную активность опытной серии инактивированной вакцины.
Научная новизна исследования.
1 .Изучены условия культивирования вируса ИРТ в различных клеточных системах. Установлены пермессивные условия для репродукции возбудителя в зависимости от вида клеточных культур, индивидуальных особенностей животных-доноров ( для первичных культур ), способа культивирования ( в монослое, суспензии и на микроносителях).
2. Показана принципиальная возможность репродукции вируса ИРТ в
суспензии клеток и применения этой системы в биотехнологии.
3. Разработана технология культивирования вируса ИРТ на основе
отечественного микроносителя, обеспечивающая получение высокоактивного
материала, пригодного для изготовления инактивированной вакцины.
4. Установлены оптимальные параметры хранения вируса ИРТ шт."ТК-А ВИЭВ", позволяющие сохранить его биологическую активность.
Практическая значимость исследований.
Предложен способ культивирования вируса инфекционного ринотрахеита крупного рогатого скота в перевиваемых линиях клеток ПТ-80 и МДВК с использованием микроносителей, который обеспечивает высокий выход вирусного сырья для производства инактивированной вакцины против ИРТ. Материалы диссертации включены в нормативно - техническую документацию по производству инактивированной вакцины против ИРТ и ПГ-3.
Апробация работы.
Материалы диссертации доложены и обсуждены на Всесоюзной конференции *" Научные основы технологии промышленного производства ветеринарных биологических препаратов ", 1987 г. и одобрены Государственной межведомственной комиссией МСХ РФ по испытшппо 2етер::::ар:іі:х 5::слсг;псск;;х препарате (iipur.jiai от 26 января 1993г.,ВГНКИ).
Публикации научных исследований.
Результатні, представленные в диссертации опубликованы в 6 работах, 2 работы находятся в печати.
Структура и объем работы.