Введение к работе
Актуальность проблемы. Витамин В-І2 нашел большое применение в медицинской практике и животноводстве для лечения различных заболеваний. Это единственный из витаминов, который синтезируется только бактериями. Промышленное производство в нашей стране основано на культивировании пропионовокислых бактерий. Необходимым условием современной микробиологической промышленности является использование высокопродуктивных штаммов. Получение штаммов возможно двумя способами: с помощью методов генной и клеточной инженерии; путем мутагенеза и последующего отбора.
Методы генной и клеточной инженерии значительно расширяют возможности селекции микроорганизмов, но не исключают уже существующие методы традиционной селекции.
Биосинтез витамина В-І2 связан с работой большого числа генов, многие из которых в последние годы удалось трансформировать. Однако клонирование генов пока не осуществлено, поэтому главным способом повышения содержания корриноидов в клетках пропионовых бактерий является индуцированный мутагенез.
Цель диссертационной работы: интенсификация промышленного получения витамина В-І2 путем селекционирования высокопродуктивного штамма - продуцента витамина В-І2; оптимизация условий его культивирования и внедрение этого штамма в производство. Для этого предстояло решить следующие задачи:
изучить спонтанную изменчивость штамма М-82 P. suermanii используемого в производстве;
изучить индуцированную изменчивость этой культуры под действием различных мутагенов;
получить высокопродуктивный штамм пропионовокислых бактерий с помощью мутагенеза;
изучить физиолого-биохимические особенности высокопродуктивного штамма;
осуществить поиск путей интенсификации процесса ферментации при промышленном получении витамина B-I2.
Научная новизна работы заключается в следующем: I. Впервые в качестве мутагенных факторов в селекции пропионовых бактерий использованы производные дигидроимидазотиазолов, изучены особенности их мутагенного действия.
-
Путем сравнительного анализа различных физиологических свойств мутантного штамма 1-63 выявлен комплекс отличительных признаков в сравнении с исходным штаммом, что позволило отработать оптимальные параметры культивирования нового штамма.
-
Выявлено стабилизирующее действие клеточного экстракта
пропионовых бактерий на индуцированную изменчивость культур p#sher manii, Pen.chrysogenum, Act#kanamyceticus.
Практическая значимость работы. Получен оригинальный штамм 1-63, превышающий исходный штамм М-82 по влтаминообразованию в лабораторных условиях на 36$, в производственных - на 20.
Публикации. По материалам диссертации опубликовано 3 работы в периодических журналах и сборниках. Подана заявка на изобретение. Получено положительное решение от 25 декабря 1990 г.
Структура и объем работы. Диссертационная работа состоит из введения, обзора литературы, трех глав с изложением полученных экспериментальных данных и их обсуждения, выводов и списка литературы. Диссертация изложена на 125 страницах машинописного текста, включает 32 таблицы и 22 рисунка. В список литературы входит 72 работы отечественных авторов и 63 - зарубежных.