Введение к работе
Актуальность иеслмовашт.
В литературе феномену дискоиитоэа эритроцитов как и вопросу, под действием каких факторов и причин эти клетки меняют -твою форму, удаляется большое внимание (Маркий В.С.19В0. Fun? V.C.Taong W.C.O..19&1>. Примечательно, что яискоаиткая форма эритроцитов при теоретических построениях получаете»! даже тогда, когда о их основу положены отличные друг от друга исуод-гые посылки (Bull В. 3. . 1972, Canhara V. В.. 1970).
По-еидииоиу. понятие дискоцптоз, которым интегрально определяют наблюдаемую форму нативных эритооцитов. не является достаточно конкретный и точный, чтобы быть критерием при изучении факторов и пр.ічи»,, имекгонх значение о формообразовании этих клеток. В связи с этик, пол» їтси актуальным выяснение структуры геометрического профиля эритроии-.'ог, для указанных целей.
Это актуально и для формирования параметров, полученных из данных геометрического профиля эритроцитов, ПО КОТОРЫМ МО.-ШО 6JJ50 бы объективно оиенивать и аналигкроватъ состояние эритроцитов в клинических целях.
Цель и эпдаал-лесдедозадда.,^
Целью данной работы пелиятся построэкие геометрического профиля эритроцитов на основе разроїотаннок теории и метода се реализации, использующих данные по интенсивности вторичных элоктроиоа, эмиттмруегоых с ' поверхности клотхи, пр>і сканировании по neft электронного зонда в растровом глектронасм микроскопе, йлп достлуенпп поставленной цели необходимо решить следукьие задачи.
1 .Разработать теорию построения геометрического протжля для осесиммчтричных клеток по данным зкисгсии яторичних электронов, возбуждаемой электронным зондом, лри чго сканировании по поверхности клетки, обладателей свойством эмулировать вторичны? электроны. Это
соотстстпует условиям, имеющим место при исследовании объектов ь 1><|*№а У-поду/mumt в растровой алчктронноп микроскопе (РЗК) .
Л.Ьродемонгтріїровйть рлйотосиособиосгь теории на примерах по_1»рхио;тей, вмкмщих пналитичесхое выгаженче их геометрического профиля. Провости "мисленкли пксперимент" по формированию электронного сигнал». э.свизалентьнй случаю сканирования электронного зонда по поверхности клеток в Г-ЭМ с последующим использованием этого скгніла лля реконструкции геометрического профиля и сравнения его с исходным.
3.Определить и минимизировать ьлиявив факторов, искажающих форму клеток » процессе их подготовки к исслелоаанига с помощью РЭМ и спетопиго микроскопироиания.
! .Кс-следовать вопрос о том как ионяьтся Форма эритроцитов в :»аииснмости от услоьий окружающей ср^ды при отсутствии влияния побочных модифицирующих форму Факте ров.
5.Пялучанио элактроногралм (электрического сигнала) нри мїиттироюашш поверхностью^ ьторичных алектронов и их регистрацию с помснью серийного РЭК г. чежиг'е У-лодуляции (применительно к условиям минимизации побочных транерормирукщих форму эритроцитои Факторов, в процесса подготовки эрг.троцктоо к дакким. исследованиям) .
6.Построение геометрического профиля эритроцитов но экспериментально полученным гілектюдограмман при исследовании эритроцитов с погтощьи РЭМ.
7. Сравнение результатов по геометрическому профилю эритроцитов, полученных на основе разработанных подходов, и рлечитонных иа него морї'окетрических параматрой характеризующих чю^му эритроцитов, как теоретических. " ок и экспериментальных, с двннъкда литературы.
Разработана теория построения геометрического профиля '' ососиикэтричких клеток по про
полученного при электронном микроскопироваїшк .! ДОК4ПЛНЛ по пригодность длг! реконструкции, геометрического пробили таких КЛЄЧОК.
Установлены побочные модифииирукідие форму факторы, яска.каїпщио результаты о общепринятых методиках приготовлении эритроцитов для мнкроскоаирования (как оптического,.тек и электронного).
Определен геометрический профиль эритрош-iTOE . иив.ащих иид дискоцита и проБедвн сраонмтелъный анализ полученных результатов с данными литературы.
1ізхаиіі:ЛЕйвхіи;К.'ш_ан йнйкосхь__па 5олм_-.
Настоящая работа может бить отнесена к области фундаментальних исследований. Теория построении геометрического профиля ооесикиэтричных клеток, разработанная и ойосиовлннал е данной работе, могкет быть применена как в клучігьік исследованиях, касательно определения истинной Формії эритроцитов и тех факторов которыми она обусловлена так и ь клинике, для определения физиологически гажных морфомотрич»чжих парапетров эритроцитов.
В работе критически проанализированы методы исследования форми эритроцитов оптическими методами, ъ которых кроме собственных погревшостеи метода, (дифракция и др.) в определении геометрических параметров, возникают ошибки и ив-за аппроксимации профиля эритроцитов кривой, описываемой некоторой аналитической функцией (эллипсом, овалом Кассини и т.д), на основе которых, некоторые из параметров получают расчетным путем. ' Предложено ка основе представленных в работе подходов, использовать метод электродной кикросксга.и при исследования Формы эригроиита. дл;г получения его истинного профиля, а следовательно, и точних морчюметричеекпх параметров. Предложена методика приготовления эритроцитов для оптического и .-чдектроьиого текроскопирования. обеспечивающая пинигм льнут трансформацию их ісходвой формы.
Результати работы были .доложены и обсуждьны на соом«стної конФиренции клф«лры биофизики медико-биологического фекультета РПІУ и отдела биотизлки НИИЇХМ 30 сентября 1991г.
Метог расчета геометрического профиля эритроцитов по данным pocTFceoa электронной микроскопии обсуждался на заседании кафедры математики РГМУ 30 сентября 1997.Г.
Публчклцци.
Основное содержание диссертации изложено в 3 печатных работах,
Диссертпция состоит из введения, обаора литературы. описания кптериалов и методов исследования, собственных результатов и обсуждения, выводов, слиске цитируемой литературы, и приложения, пакет программ для ПЭВМ на иэшикном языке srwSASIC.
Обьем работы составляет страниц машинописного текста. Список цитируемых работ включает 26 отечественных и 94 иностранные авторов.