Введение к работе
Актуальность тем;. Нєйтрофшш занимают одну'из наиболее активных позиций в системе гуыоральцо-клеточкой кооперации крови и соединительной ткани. Они являются универсальной шшекьи и соответственно индикатором различных нарушений гомвостаза и гомеоктюзи.
Основной функцией нейтрофилов является уничтожение живпх объ
ектов или'завершенный фагоцитоз. Завершенный фагоцитоз включает
многие звенья эффекторного- потенциала клетки: рецепция, поглоще
ние, активация метаболизма, секреторная деграыуляцпя, образованно
пищеварительных вакуолей - фагосом. -
Процесс поглощения во многом определяется структурним состоянием 'мембран нейтрофилов.
Ыикробицидальная активность нейтрофилов в существенной степени обусловлена наличием НАДФН оксидазной ферментной системой, которая локализована в плазматической мембране и в последующем в фагоцитарних .везикулах. Активация этой системы в стимулированных нейтрофилах сопрововдается образованием летальных окисдантов, предшественником которых является супороксид анион радикал (0~) (г^акі-no ot ol., 1986).
Известно, что кратковременная обработка клеток и организмов
г>ри сверхоптимальной температуро вызывает синтез малого набора
полипептидов, называемых белками теплового шока (Lamarc&c et nl.,
1985). Белки теплового шока, индуцированные во время сублетальшгх
нарушений, вызванных теплом, включаются в гокеостагические функции
клетки. В этой связи представляет интерес изучение механизмов от
ветственных за изменение функциональной активности нейтрофилов при
тепловой обработке. .
Цель и задачи исследования. Целью настоящей работы являлось исследование влияния сублетальных высоких температур на функциональную активность нейтрофилов, а также установление связи- меяду структурними и функциональными характеристиками фагоцитирующих клеток.
Были поставлены следующие задачи:
I. Изучить .способность нейтрофилов генерировать 0J при действии сгимулпрущгос агентов. .
2,- Исследовать в кон А стимулированных нейтрофилах зависимость образования 0 от температуры инкубации-клеток в темпера-
туряок интервале 35-43С {близком к физиологическому и шоковому порогам).
-
Определить моханизш, ответственнее за изменения фугасцио-нальяой активности яейтрофшюя при тепловой обработке.
-
Исследовать образование белков теплового шока в нейтрофілах в условиях тепловой обработки.
-
Исследовать структурное состоите мембран нойтрофилов при фагоцитозе.
G.. Показать взаимосвязь медду фагоцитарной активностью нейт-рофилов п структурам состоянием мембран фагоцитов.
Научная попаяна и практическая ценность работы. Изучеїш механизм) пктивздии койтрофилов при действии стимулирующих агентов в условиях теплообработки. В интервале температур от 37С до 39С яабладаетсл дпухкратное увеличение генерации Og.
Установлено, что тепловая обработка нейтрофялов приводит к увеличению потока момбраноассоцировапного Са во внутрь клетки. Такжо показано участие фосфолипазы. С и активЕрованнрй протеинки-назцС(ПКС) в температура-зависимой генерации OJ.
Впорвно' установлено образование протеинов теплового шока в стимулировонт» нейгрофалах в условиях тепловой обработки, с молекулярним весок 27, 66, 94,7кЛд. . .
Изучена взаимосвязь между структурной организацией мембран иейтро'гллов и их функциональной активностью. Показано, что способ ность нейтрофилов поглощать чужеродные частицн в существенно^ сте пени определяется состоянием их липидов.
Показано, что в условиях генерации Og имеет место интенсифи
кация перекисиого окисления липидов, что в свою очередь благопри
ятствует повышенно фагоцитарной активности путем увеличения кон-1
денсированной фаз» в липидах клеточных мембран. I
Проведенные исследования расширяют представления о механизма]
активации фагоцитов и генерации летальных оксидантов стимулиро- J
ваншлм нейтрофілами и позволяют наметить пути коррекции активно!
сти фагоцптируюхдах клеток. I
Апробация'диссергацті. Результаты работы докладывались на м« факультетской конференции по естественным наукам (Тбилиси, І982І на П республиканской конференции "Проблемы экологической биофизи ки" (Тбилиси, 1986), на У всесоюзной межуниверситетской конферсЯ цкп ".Биология клетки" (Тбилиси, 1987), на республиканской научнИ конференция биологов, посяященной 70-летик основания Тбилисской
.5
государственного уштворситета (Тбилиси, I9Q0) и на УІ межуниверситетской конференции "Биологические мембран» 'в нормо и патологии" (Тбилиси, 1939). По материалам диссертации опубликован'6 научиш: работ.
Объем и структура работы. Диссертация излокона па НО страницах глапяшопксного текста, включая 16 рисунков, 3 таблшш к список диторатурц(185 источников). Работа состоит из введения, обзора литературы, материалов и методов, результатов и обсуждения, заключения и выводов.