Содержание к диссертации
Введение
Глава 1. Современные представления о биологических эффектах ультразвука 11
1.1 Влияние на организм ультразвука в режиме диагностических процедур 11
1.2. Влияние на организм ультразвука большой мощности 18
1.3. Противозачаточный эффект ультразвука 26
Собственные исследования
Глава 2. Материал и методы исследования 30
2.1 Группы животных и сроки забора материала 30
2.2 Объекты исследования, подготовка материала к изучению, морфологические методы исследования, морфометрия и статистическая обработка полученных данных 30
Глава 3. Изменения жировой ткани крыс после однократного ультразвукового воздействия 34
Глава 4. Структура подколенных лимфатических узлов крыс при однократном воздействии ультразвуком 36
4.1 Нарушения строения лимфатических узлов 36
4.2 Цитоархитектоника межузелковой зоны 41
4.3 Цитоархитектоника паракортекса 42
4.4 Цитоархитектоника первичных лимфоидных узелков 44
4.5 Цитоархитектоника мантия вторичных лимфоидных узелков 45
4.6 Цитоархитектоника светлых центров вторичных лимфоидных узелков 46
4.7 Цитоархитектоника мозговых тяжей 51
4.8 Цитограмма клеток в просвете синусной системы
мозгового вещества 52
Глава 5. Обсуждение полученных результатов 65
Заключение 79
Выводы 83
Практические рекомендации 85
Список использованных источников
- Влияние на организм ультразвука большой мощности
- Объекты исследования, подготовка материала к изучению, морфологические методы исследования, морфометрия и статистическая обработка полученных данных
- Цитоархитектоника межузелковой зоны
- Цитоархитектоника мозговых тяжей
Введение к работе
Актуальность темы. Ультразвуковое исследование (УЗИ) обычно считается безопасным методом визуализации. Диагностические ультразвуковые сканирования плода, как правило, считаются безопасными во время беременности , 1998). Вместе с тем в последнее время стали появляться сообщения об изменениях тканей и органов млекопитающих после воздействия ультразвуком в медицинском исследовательском режиме. Постоянно высказываются сомнения в безопасности ультразвука в применяемых для диагностики мощностях (Fowlkes J.B., Holland C.K., 2000; Miller D.L. et al., 2012).
Все чаще признается, что ультразвук, даже на применяемых диагностических мощностях, способен повышать температуру тканей и таким образом их повреждать (Bacon D.R., Shaw A., 1993; Shaw A., 1994; Horder M.M. et al., 1998; Jago J.R. et al., 1999; Kim Y.T. et al., 2009). Особенно это важно для эмбриональных тканей (Horder M.M. et al., 1998), тканей головного мозга (Horder M.M. et al., 1998; Ang E.S. et al., 2006), глаза (Herman B.A., Harris G.R., 1999; Steinert R.F., Schafer M.E., 2006).
В 2008 г. The American Institute of Ultrasound in Medicine (Laurel, Мэриленд) опубликовал 130-страничный доклад под названием «О потенциальных биоэффектах диагностического ультразвука», в котором сообщается о том, что действительно есть некоторые потенциальные риски при проведении УЗИ, которые включают в себя «… тепловые эффекты, механические воздействия и биоэффекты от применения контрастных средств». Долгосрочные эффекты, связанные с ультразвуковым воздействием диагностической интенсивности, пока неизвестны. Несмотря на то, что существует вероятность выявления в будущем значительного биологического воздействия на человека, в настоящее время большинство врачей считают, что на основе имеющейся информации польза для пациентов перевешивает риски (Fowlkes J.B., 2008).
В то же время показано, что после воздействия ультразвуком в общей сложности в течение 30 мин на плоды мышей статистически значимое количество нейронов коры головного мозга не приобретает надлежащего положения и остается рассеянным в пределах несоответствующих им корковых слоев и/или даже в расположенном ниже белом веществе. Величина дисперсии таких нейронов была переменной, но систематически увеличивалась с продолжительностью ультразвукового воздействия . На модели тканей третьего триместра беременности (стенки брюшной полости и матки, слой жидкости и слой эмбриональной кости) при B-способе УЗИ установлено повышение температуры на 1,4С, при цветовой демонстрации тока жидкости – на 1,8С, при допплеров-ском исследовании – на 5,8С. Эти результаты показывают, что при облучении костных тканей через слой жидкости возможна существенная недооценка максимального повышения температуры (Jago J.R. et al., 1999).
Степень разработанности темы исследования. В литературе приводится достаточно много результатов исследований нормальных лимфатических узлов человека и животных с применением ультразвука. Описаны размеры и варианты расположения этих органов. Очень много сведений об изменениях лимфатических узлов при различной патологии, особенно при злокачественных процессах. Есть данные о многократном и длительном ультразвуковом облучении жировой ткани (подкожно-жировой клетчатки) с расположенными там лимфатическими узлами (Майбородин И.И. и др., 2014). Однако полностью отсутствуют данные о влиянии на эти органы ультразвука в режиме исследовательских и диагностических процедур.
Цель исследования – установить особенности патоморфологических изменений подколенных лимфатических узлов и жировой ткани подколенной ямки после однократного ультразвукового воздействия в режиме диагностической процедуры в эксперименте.
Задачи исследования:
1. Методами световой микроскопии исследовать патоморфологические реакции жиро-
вой ткани подколенной ямки крыс после однократного воздействия ультразвуком различной длительности в режиме диагностического исследования.
-
Изучить основные патологические изменения в структурной организации и цитоар-хитектонике подколенных лимфатических узлов после ультразвукового воздействия.
-
Выявить зависимость структурных перестроек жировой ткани и лимфатических узлов от длительности воздействия ультразвука.
Научная новизна: Впервые проведено патоморфологическое исследование структурных изменений лимфатических узлов вместе с окружающей жировой тканью и сосудами после однократного воздействия ультразвуком различной длительности в диагностическом режиме. Впервые показано, что однократное ультразвуковое воздействие на жировую ткань в области коленного сустава вызывает нарушения микроциркуляции, заключающиеся в гиперемии, лимфостазе и увеличении сосудистой проницаемости.
Впервые установлено, что приносящие и выносящие лимфатические сосуды, проходящие в паранодулярной жировой ткани и капсуле подколенных лимфатических узлов крыс, расширяются через 1 сут после ультразвукового воздействия. Дилатация сосудов в пара-нодулярных зонах более выражена, чем в жировой ткани, что связано с размерами сосудов, объемом содержащейся в них жидкости и препятствием лимфотоку со стороны самих лимфатических узлов.
Впервые показано, что однократное ультразвуковое воздействие в диагностическом режиме длительностью до 20 мин на область коленного сустава крыс приводит к отеку подколенных лимфатических узлов вследствие повышенного транспорта лимфы из региона лимфосбора и ее депонирования в данных органах. Это служит основной причиной увеличения на срезе лимфатических узлов относительной площади паракортикальной зоны, краевого и мозговых синусов.
Впервые доказано, что ультразвуковое облучение лимфатических узлов способствует повышению проницаемости сосудов как в регионе лимфосбора, так и в самих органах, что приводит к появлению в цитограмме герминативных центров лимфоидных фолликулов и мякотных тяжей эритроцитов и достоверному увеличению их численности в просвете мозговых синусов. Впервые установлено, что воздействие ультразвуком диагностической мощности вызывает повреждения клеток облученных лимфатических узлов, в результате чего возрастает процентное содержание клеток с признаками кариопикноза во всех зонах данных органов.
Впервые установлено, что ультразвуковое воздействие в течение 20 мин вызывает более выраженные и длительные патологические реакции жировой ткани, нарушения структуры и цитоархитектоники лимфатических узлов, по сравнению с 5- или 10-минутным облучением. Все обнаруженные изменения являются обратимыми и большинство из них возвращается к исходному уровню в течение 1 – 2 сут.
Теоретическое и практическое значение работы. Получены новые знания об особенностях изменений жировой ткани вместе с расположенными в ней лимфатическими узлами крыс после однократного воздействия ультразвуком при диагностической мощности. В связи с тем, что ультразвуковое облучение вызывает изменения жировой ткани и подколенных лимфатических узлов, в практической деятельности следует учитывать возможность развития повреждений клеток и тканей при проведении УЗИ. Так как ультразвуковое воздействие на ткани приводит к микроциркуляторным нарушениям, заключающимся в гиперемии, лимфостазе и увеличении сосудистой проницаемости, целесообразны разработка и применение мероприятий, направленных на снижение отека и стабилизацию сосудистой стенки как во время самой процедуры УЗИ, так и сразу после нее.
УЗИ должно быть выполнено только при наличии действительных медицинских показаний, а для получения необходимой диагностической информации должна быть использована самая низкая из возможных экспозиция ультразвуковой установки. Необходимо следить за безопасностью и сохранением здоровья не только обследуемых пациентов, но
также и персонала, осуществляющего применение ультразвука.
Методология и методы исследования. Методология исследования основана на применении принципов и методов морфологического анализа патологических процессов, использования теоретических разработок и обобщений о типовых патологических процессах. В работе использованы современные методы морфологического анализа и обработки полученных данных. Объект исследования – жировая ткань и подколенные лимфатические узлы крыс. Предмет исследования – морфофункциональные изменения тканей после однократного ультразвукового воздействия диагностической мощности различной продолжительности.
На защиту выносятся следующие основные положения:
-
Однократное ультразвуковое воздействие в диагностическом режиме длительностью до 20 мин приводит к кратковременным и обратимым изменениям – гиперемии, лимфос-тазу и увеличению сосудистой проницаемости в облученных тканях.
-
Воздействие ультразвуком при диагностической мощности может повреждать клетки центров размножения лимфоидных узелков лимфатических узлов.
-
Изменения тканей прогрессируют по мере увеличения времени ультразвукового воздействия.
Степень достоверности результатов диссертации. Использованные современные методы морфологического и морфометрического исследования, способы статистической обработки соответствуют поставленным цели и задачам и позволяют получить достоверные результаты. Диссертация выполнена на достаточном экспериментальном материале (96 крыс-самцов инбредной линии Wag) с применением сертифицированного оборудования. Сформулированные научные положения, выводы и практические рекомендации основаны на результатах собственных исследований, не носят характера умозрительных заключений и вытекают из результатов работы.
Апробация результатов диссертации. Основные положения диссертации доложены на 7-й межрегиональной конференции, посвященной памяти акад. РАМН проф. Л.В. По-луэктова (Омск, 2013); международной научно-практической конференции «Фундаментальные проблемы науки» (Уфа, 2013); XII Евразийском симпозиуме «Проблемы саноген-ного и патогенного эффектов эндо- и экзоэкологического воздействия на внутреннюю среду организма» (Чолпон-Ата, 2014) и на заседании научных сотрудников лабораторий стволовой клетки, инвазивных медицинских технологий и персонализованной медицины ФГБУН Института химической биологии и фундаментальной медицины СО РАН (Новосибирск, 2015).
Публикации. По теме диссертации опубликованы 7 печатных работ, из них 3 – в ведущих научных изданиях, рекомендованных ВАК для публикации результатов диссертационных исследований.
Структура и объем диссертации. Диссертация состоит из введения, обзора литературы, материалов и методов исследования, собственных результатов, обсуждения полученных результатов, заключения, выводов, практических рекомендаций, списка использованных источников и 4 приложений. Работа изложена на 145 страницах компьютерного текста, содержит 25 таблиц, иллюстрирована 27 многокомпонентными комбинированными рисунками. Библиография включает 169 источников (57 отечественных и 112 иностранных). Весь материал, представленный в диссертации, получен, обработан и проанализирован лично автором.
Влияние на организм ультразвука большой мощности
Научно-технический прогресс можно считать важным признаком современности. Примером этому служит пополнение научных данных в области УЗИ, приборов и методов, направленных на применение ультразвука в медицине. Исследования ультразвуковых колебаний начались около 50 лет назад, а в настоящее время уже существует множество высокоэффективных технологий применения ультразвука. Наверное, сейчас нет возможности сообщить обо всех методах и системах диагностики, основанных на использовании ультразвуковых колебаний. В США сегодня около 100 фирм делают и внедряют оборудование для ультразвуковой диагностики (Хмелв В.Н., Попова О.В., 1997).
Первым шагом к развитию диагностических методов исследования, основанных на ультразвуковых колебаниях, была разработка импульсных электронных приборов для обработки данных радиолокационной разведки. Эти системы были созданы для обнаружения авиационных аппаратов и начали широко внедряться во время второй мировой войны 1939-1945 гг. Вместе с этим, большинство попыток использования ультразвука для диагностики носит, главным образом, эмпирический характер. Только в последние десятилетия область применения УЗИ признана как самостоятельный раздел прикладной физики. Но, как средство для проведения медицинской диагностики, область ультразвуковых колебаний приобрела в настоящее время очень прочное положение. Общепризнано, что последние годы ежегодное исследование с применением ультразвука проходят во всем мире приблизительно 30 12
50 млн. больных и их количество возрастает ежегодно примерно на 20%. Подобные статистические данные указывают на то, что по частоте своего применения в качестве диагностического физического метода ультразвук используется чаще средств рентгенологии (Миллер Э. и др., 1989).
Весь путь УЗИ, как метода диагностики, отмечен примечательной серией технологических скачков. Вместе с этим имеется необходимость и исследования клинических эффектов самого УЗИ. При оценке большинства патологий такие результаты воздействия УЗИ еще более расширят ее значимость для пациентов и скрининговых медицинских обследований условно здорового населения. Уже с 90-х годов ХХ-го столетия были высказаны сомнения о потенциальной опасности проведения УЗИ. Опубликованы работы о том, что ультразвуковая диагностика находится на своем максимуме: дальнейший успех уже маловероятен, а будущее - неуверенное (Merritt C.R. et al., 1992; Merritt C.R., 2000; 2001).
В 2008 г. The American Institute of Ultrasound in Medicine (Laurel, Мэриленд) опубликовал 130-страничный доклад под названием «О потенциальных биоэффектах диагностического ультразвука», в котором сообщается о том, что имеются некоторый реальный возможный риск при проведении УЗИ, этим могут являться «… нагрев тканей, механическое повреждение и влияние препаратов для контрастирования». Долгосрочные эффекты, связанные с УЗИ-воздействием на диагностической мощности, остаются неизученными. Хотя есть возможность обнаружения в дальнейшем сильного эффекта, в настоящее время общепринято, что польза для больных важнее неизвестного риска (Fowlkes J.B., 2008).
По своей физической основе распространение ультразвуковых колебаний представляет типичный механический процесс распространения волн в среде. При определенных, но не невозможных условиях ультразвуковые колебания могут привести к повреждению тех клеток и тканей, через которые эти волны проходят (Миллер Э. и др., 1989).
Рутинное УЗИ, как правило, считают вполне безопасным средством. УЗИ с целью изучения развития плода обычно предполагают безопасными при всех сроках беременности. Вместе с этим, такая процедура диагностики должна применяться только когда есть существенные медицинские показания, а для получения требуемых диагностических данных целесообразно применять, возможно, самую минимальную экспозицию и мощность ультразвукового аппарата (Merritt C.R., 1998).
Всемирная организация здравоохранения (ВОЗ) придерживается мнения, что УЗИ безопасно. Но, при том, что доказательства вреда ультразвука для плода отсутствуют, Food and Drug Administration (США) все-таки ограничила свободную аренду и продажу ультразвуковой аппаратуры для исключения применения в домашних условиях неквалифицированным персоналом, например, в таких примерах, как распространенное изготовление "видео плода на память" (Training in diagnostic ultrasound: essentials, principles and standards. Report of a WHO Study Group, 1998).
Вместе с тем в последнее время стали появляться сообщения об изменениях тканей и органов млекопитающих после воздействия ультразвуком в режиме, применяемом в медицине. Имеются сомнения в безопасности ультразвука в мощностях, используемых для постановки или уточнения диагноза Fowlkes J.B., Holland C.K., 2000; Miller D.L. et al., 2012). Не решена проблема неполной изученности влияния ультразвуковых колебаний, существующая точность измерения выраженности воздействия не может быть использована во всех возможных случаях (Lewin P.A. et al., 1987).
Объекты исследования, подготовка материала к изучению, морфологические методы исследования, морфометрия и статистическая обработка полученных данных
Фрагменты жировой ткани из области подколенных лимфатических узлов и сами лимфатические узлы фиксировали в 4% растворе параформальде-гида на фосфатном буфере (рН 7,4) не менее 24 часов, обезвоживали в серии этанола возрастающей концентрации, просветляли в ксилоле и заключали в парафин, из каждого органа готовили не менее 3 срезов. Срезы толщиной 5-7 мкм окрашивали гематоксилином Гарриса или Карацци и эозином (Пирс Э., 1964; Елисеев В.Г. и др., 1967; Лилли P., 1969; Саркисов Д.С., Перов Ю.Л., 1996), срезы изучали на световом микроскопе Axioimager M1 (Zeiss, Германия) при увеличении до 1200 раз.
Морфометрическое исследование строения исследуемых органов проводили в соответствии с рекомендациями, изложенными в многочисленных работах, посвященных теоретическому обоснованию и конкретным примерам применения этих методов (Глаголев А.А., 1941; Шахламов В.А., 1967; Катинас Г.С., Полонский Ю.З., 1970; Плохинский Н.А., 1970; Вейбель Э.P., 1970; Автандилов Г.Г., 1973, 1980, 2002; Христолюбова Н.Б., Шилов А.Г., 1974; Weibel E.R., 1979; Автандилов Г.Г. и др., 1981, 1984; Непомнящих Л.М. и др., 1986; Горчаков В.Н., 1997). Обозначение и размерность стереологиче-ских параметров, использованных в работе, приведены согласно рекомендациям Международного стереологического общества (Weibel E.R., 1979).
Для исследования структурной организации подколенных лимфатических узлов и клеточных элементов в их зонах проводили измерения изображений, полученных при помощи цифровой видеокамеры микроскопа с использованием программного обеспечения морфологического модуля Axio-vision (Zeiss, Германия). При использовании объектива с увеличением х5 конечная площадь тестового прямоугольника была равна 5 600 000 мкм2 (стороны 2800х2000 мкм), при объективе х10 – 1 400 000 мкм2 (стороны 1400х1000 мкм), при объективе х20 – 350 000 мкм2 (стороны 700х500 мкм), при подсчете цитограммы клеток (применение объектива с увеличением х40) – 87 500 мкм2 (стороны 350х250 мкм). С каждого среза проводили по 3 – 5 измерений, в связи с рекомендациями, согласно которым для рандомизированного исследования достаточно 3 срезов (Head J.R., Seeling L.L., 1984).
В процессе морфометрических исследований на срезе лимфатических узлов изучали относительную площадь капсулы, соединительнотканных прослоек отдельно в корковом и мозговом веществе, краевого синуса, коркового плато, паракортекса, лимфоидных фолликулов без центров и с центрами размножения, мякотных тяжей и мозговых синусов.
Измерения абсолютных параметров данных органов и их структур не проводили, так как встречался магистральный и рассыпной тип прохождения лимфатических сосудов, последний характеризовался наличием не одного, а нескольких (до 5) подколенных лимфатических узлов. Такие различия в строении лимфатического русла приводили к очень большим разбросам значений вариационных рядов и большому значению ошибки средних величин. В связи с этим остановились на измерении только процентного соотношения различных структур в указанных лимфатических узлах.
Дифференцирование кровеносных и лимфатических сосудов в клетчатке проводили в соответствии с рекомендациями J. Casley-Smith (1983, 1987), J.R. Head, L.L. Seeling (1984) и В.И. Козлова с соавт. (1994).
Для изучения цитограммы клеток (лимфоцитов, иммуно- и плазмобла-стов, нейтрофилов, эозинофилов, эритроцитов, моноцитов, макрофагов, тканевых базофилов (тучных клеток), плазматических, делящихся клеток, клеток Мотта и клеток с пикнотическим ядром) определяли от 500 до 1000 клеточных элементов в различных местах препарата, в зависимости от однородности клеточного состава. Приняв общее количество клеток за 100%, определяли относительное содержание каждого типа, типы клеточных элементов верифицировали в соответствии с рекомендациями М.Г. Абрамова (1985).
Статистическую обработку результатов проводили на прикладной статистической программе MS Excel 7.0 (Microsoft, USA), определяли среднее арифметическое и ошибку среднего арифметического (стандартное отклоне 33 ние). Достоверность различий сравниваемых средних величин определяли на основании критерия Стьюдента для заданного порога (p) вероятности безошибочных прогнозов (Плохинский Н.А., 1970). Достоверным считали различие между сравниваемыми рядами с уровнем доверительной вероятности 95% и выше. Если p 0,05, то это означало, что ряды совпадают на 95% на уровне доверительной вероятности. При расчетах учитывали, что распределение исследуемых признаков было близким к нормальному.
Цитоархитектоника межузелковой зоны
Спустя один день после 10-минутной экспозиции ультразвуковыми колебаниями паракортекс стал шире на 23,6%, относительно состояния на третий день (Приложение В, табл. 3).
Площадь паракортикальной зоны через один день на фоне экспозиции продолжительностью двадцать минут была выше на 23,6 и 31,9%, соответственно, по сравнению с нормой и четвертым днем. Паракортекс ко второму дню стал объемнее на 34,6%, относительно четырех дней (Приложение В, табл. 4).
Относительная площадь первичных лимфоидных узелков спустя один день на фоне экспозиции ультразвуковыми колебаниями длительностью пять минут стала меньше на 70,9 и 75,1%, соответственно, по сравнению с нормой и спустя пять дней (Приложение В, табл. 2).
Такие узелки ко второму дню на фоне двадцатиминутной экспозиции ультразвуковыми колебаниями стала ниже на 81,6, 90,1 и 87,9%, соответственно, по сравнению нормой и спустя четыре и пять дней (Приложение В, табл. 4).
Объем вторичных лимфоидных фолликулов лимфоидных узелков спустя один день на фоне экспозиции ультразвуковыми колебаниями продолжительностью пять минут стал ниже на 50,4, 50,4, 66,7, 63,7 и 53,4%, соответственно, чем в норме и спустя два, три, четыре и пять дней (Приложение В, табл. 2).
Относительная площадь лимфоидных фолликулов с центрами размножения спустя один день на фоне десятиминутной экспозиции ультразвуковыми стала ниже на 50,4, 65,2, 66,7 и 63,7%, соответственно, чем в норме и спустя трое, четверо и пятеро дней (Приложение В, табл. 3).
Объемная плотность таких узелков спустя один день на фоне экспозиции ультразвуковыми колебаниями длительностью двадцать минут стала ниже на 68,3, 55,8, 84,8 и 79,9%, соответственно, чем в норме и спустя три, четыре и пять суток. Значение показателя ко второму дню снизилось на 55,1 и 51%, соответственно, относительно уровня на четвертые и пятые сутки (Приложение В табл. 4).
Через один день на фоне экспозиции ультразвуковыми колебаниями длительностью пять минут площадь самих светлых центров уменьшилась на 56,8, 70,3 и 67%, соответственно, относительно вторых, третьих и четвертых суток (Приложение В, табл. 2).
Площадь светлых центров спустя один день на фоне десятиминутной экспозиции ультразвуковыми колебаниями сократилась на 66,3, 59,9 и 56,7%, соответственно, относительно третьих, четвертых и пятых суток (Приложение В, табл. 3).
Через один день на фоне экспозиции ультразвуковыми колебаниями продолжительностью 20 мин объем центров снизился на 82,7 и 98,2%, соответственно, по сравнению с нормой и спустя пять дней (Приложение В, табл. 4).
Относительная площадь мантия в узелках спустя один день после экспозиции ультразвуковыми колебаниями длительностью 5 минут стала меньше на 64,8 и 59,9%, соответственно, по сравнению с третьими и четвертыми сутками (Приложение В, табл. 2).
Процент мантия спустя один день на фоне десятиминутной экспозиции ультразвуковыми колебаниями стала ниже, соответственно, на 63,4, 75,1 и 71,8% по сравнению с третьими, четвертыми и пятыми сутками (Приложение В, табл. 3).
Объем мозговых тяжей спустя один день на фоне экспозиции ультразвуковыми колебаниями длительностью пять минут стала меньше на 27, 24,3, 27,8 и 28,7%, соответственно, чем в норме и на третьи, четвертые и пятые сутки (Приложение В, табл. 2) (Приложение Г, рис. 10, 11). Объемная плотность мозговых тяжей спустя один день после десятиминутной экспозиции ультразвуковыми колебаниями стала ниже на 31,5, 24,3, 28,8, 29,7 и 34,2%, соответственно, чем в норме и на вторые, третьи, четвертые и пятые сутки (Приложение В, табл. 3) (Приложение Г, рис. 10, 11).
Процент мякотных тяжей спустя один день на фоне экспозиции ультразвуковыми колебаниями длительностью двадцать мин уменьшился на 36,4, 31,8, 35,5 и 39,3%, соответственно, чем в норме и на третьи, четвертые и пятые сутки. Значение показателя ко второму дню сократилось на 25,9, 21,6, 25 и 28,4%, соответственно, по сравнению с нормой и третьими, четвертыми и пятыми сутками (Приложение В, табл. 4) (Приложение Г, рис. 10, 11).
Через один день на фоне экспозиции ультразвуковыми колебаниями воздействия ультразвуком длительностью пять минут объемная плотность синусов мозгового вещества возросла на 31,4, 26,6, 33,5, 34,3 и 42,1%, соответственно, относительно нормы и вторыми, третьими, четвертыми и пятыми сутками (Приложение В, табл. 2) (Приложение Г, рис. 10, 11).
Объем синусов мозгового вещества увеличился через один день на фоне десятиминутной экспозиции ультразвуковыми колебаниями на 28,6, 29,3, 34,5 и 28%, соответственно, относительно нормы и на третьи, четвертые и пятые сутки (Приложение В, табл. 3) (Приложение Г, рис. 10, 11).
Спустя один день на фоне экспозиции ультразвуковыми колебаниями длительностью двадцать минут процент синусов мозгового вещества возрос на 33,5, 29,3, 34,2 и 42%, соответственно, чем в норме и на третьи, четвертые и пятые сутки. Спустя один день синусы оставались шире на 20,5 и 28,2%, соответственно, по сравнению с нормой и на пятые сутки (Приложение В, табл. 4) (Приложение Г, рис. 10, 11).
Из отличий в патоморфологии исследуемых лимфатических узлов на фоне двадцатиминутной экспозиции ультразвуковыми колебаниями, относительно более короткого воздействия длительностью пять или десять минут, можно отметить расширение подкапсульного синуса и отсутствие изменений мантия вокруг центров узелков (Приложение В, табл. 2-4). Динамика относительной площади межфолликулярной зоны, первичных узелков, мозговых тяжей и синусов оставались измененными на первый и второй день на фоне экспозиции ультразвуковыми колебаниями длительностью двадцать минут, а на фоне более короткого воздействия величины значений указанных показателей нормализовались уже ко второму дню (Приложение В, табл. 2-4).
Объемная плотность первичных узелков через двое суток на фоне двадцатиминутной экспозиции ультразвуковыми колебаниями уменьшилась на 77,6%, чем на фоне экспозиции продолжительностью десять минут (Приложение В, табл. 3, 4).
Относительная площадь мозговых тяжей на фоне экспозиции ультразвуковыми колебаниями длительностью двадцать минут ко второму дню статистически достоверно сократился ниже соответствующего значения после 10-тиминутного облучения на 19% (Приложение В, табл. 3, 4).
Цитоархитектоника мозговых тяжей
Численная плотность моноцитов ко второму дню на фоне экспозиции ультразвуковыми колебаниями длительностью пять минут увеличилась в 5,5; 4,6; 6 и 6 раз, соответственно, относительно нормы и спустя один, четыре и пять суток (Приложение В, табл. 23).
Количество данных форм лейкоцитов на срезе ко второму дню на фоне экспозиции ультразвуковыми колебаниями продолжительностью двадцать минут выросло в 5,7; 5,6; 5,7 и 5,4 раз, соответственно, относительно нормы и спустя один, четыре и пять суток (Приложение В, табл. 24).
Процентное содержание макрофагов спустя один день на фоне экспозиции ультразвуковыми колебаниями длительностью пять минут выросло в 2,4; 2 раза, на 84,5% и в 2,2 раза, соответственно, чем в норме и спустя трое, четверо и пятеро суток. Значение показателя ко второму дню увеличилось в 2.2 раза, на 81,7%, 66,2% и в 2 раза, соответственно, относительно нормы и спустя трое, четверо и пятеро суток (Приложение В, табл. 23) (Приложение Г, рис. 24, 25). Процентная численность подобных фагоцитов спустя один день на фоне десятиминутной экспозиции ультразвуковыми колебаниями возросла в 2,5 раза, на 90,4%, в 2,1 и 2,3 раза, соответственно, чем в норме и спустя трое, четверо и пятеро суток. Значение показателя ко второму дню выросло в 2,3 раза, на 75,4, 89,6% и в 2,2 раза, соответственно относительно нормы и спустя трое, четверо и пятеро суток (Приложение В, табл. 24) (Приложение Г, рис. 24, 26).
Спустя один день на фоне экспозиции ультразвуковыми колебаниями длительностью двадцать минут процентная численность макрофагов выросла в 2,6 раза, на 66,3%, 99,4% и в 2,3 раза, соответственно, чем в норме и спустя трое, четверо и пятеро суток. Значение показателя ко второму дню возросло в 2.3 раза, на 72,6 и 99% раза, соответственно, относительно нормы и спустя четверо и пятеро суток (Приложение В, табл. 25) (Приложение Г, рис. 24, 27). Содержание макрофагов на срезе ко второму дню на фоне экспозиции ультразвуковыми колебаниями длительностью пять минут выросло в 4,4; 4,2; 4,6 и 5,7 раза, соответственно, чем в норме и спустя одни, четверо и пятеро суток. Значение показателя на третий день увеличилось в 2,5 и 3 раза, соответственно, чем на четвертый и пятый дни (Приложение В, табл. 23) (Приложение Г, рис. 24, 25).
Абсолютное количество подобных фагоцитов ко второму дню на фоне десятиминутной экспозиции ультразвуковыми колебаниями выросло в 4,8; 5,3; 5,9 и 6,8 раза, соответственно, чем в норме и спустя одни, четверо и пятеро суток. Значение показателя к третьему дню возросло в 3,4 и 3,8 раза, соответственно, чем на четвертый и пятый дни (Приложение В, табл. 24) (Приложение Г, рис. 24, 26).
Плотность макрофагов на срезе спустя третьи и четвертые сутки на фоне экспозиции ультразвуковыми колебаниями длительностью двадцать минут увеличилась в 3,3 и 2,9 раза, соответственно, чем в норме (Приложение В, табл. 25) (Приложение Г, рис. 24, 27).
Процентное содержание нейтрофилов спустя один день на фоне экспозиции ультразвуковыми колебаниями длительностью двадцать минут возросло в 9 раз, по сравнению с нормой (Приложение В, табл. 25).
Процент эритроцитов спустя один день на фоне экспозиции ультразвуковыми колебаниями длительностью пять минут вырос в 6,3 и 5,5 раза, соответственно, по сравнению с нормой и третьим днем (Приложение В, табл. 23).
Процентное содержание эритроцитов спустя один день на фоне десятиминутной экспозиции ультразвуковыми колебаниями увеличилось в 7 раз, по сравнению с нормой (Приложение В, табл. 24).
Через один и два дня на фоне экспозиции ультразвуковыми колебаниями длительностью двадцать минут процентное число эритроцитов возросло в 6,4 и 6,1 раза, соответственно, относительно нормы (Приложение В, табл. 25).
Процентное количество клеточных форм с кариопикнозом спустя один день на фоне экспозиции ультразвуковыми колебаниями длительностью пять минут выросло в 2,5 раза, чем в норме (Приложение В, табл. 23).
Процентное число клеточных форм с пикнотическими ядрами спустя один день на фоне десятиминутной экспозиции ультразвуковыми колебаниями увеличилось в 2,5 раза, чем в норме (Приложение В, табл. 24).
Через один и два дня на фоне экспозиции ультразвуковыми колебаниями длительностью двадцать минут процентная численность клеточных форм с кариопикнозом возросла в 2,8 и 2,9 раза, соответственно, чем в норме (Приложение В, табл. 25).
В синусной системе мозгового вещества исследуемых лимфатических узлов на фоне экспозиции ультразвуковыми колебаниями длительностью двадцать минут возрастание численности всех клеточных форм и лимфоцитов началось через три дня и не вернулось к норме до конца эксперимента (Приложение В, табл. 23-25).
Процент плазматических и ретикулярных клеточных элементов на фоне экспозиции ультразвуковыми колебаниями длительностью двадцать минут был изменен в продолжении трех дней, а не двух суток, как на фоне экспозиции пять или десять. Процентное содержание эритроцитов и клеточных форм с пикнотическим ядром возрастало в течение двух дней, а не одни сутки. Кроме того, спустя один день был возрос процент нейтрофилов, чего не нашли при более короткой экспозиции (Приложение В, табл. 23-25).
Плотность всех клеточных форм ко второму дню на фоне экспозиции ультразвуковыми колебаниями длительностью двадцать минут сократилась в 4,6 и 4,7 раза, соответственно, чем на фоне экспозиции продолжительностью пять или десять минут. Значение показателя на четвертый день уже возросло в 2,9 и 3,2 раза, соответственно, по сравнению с данной точкой на фоне экспозиции длительностью пять или десять минут. Через пять суток всех клеточных форм стало больше в 2,8 и 3 раза, соответственно, относительно данной точки на фоне экспозиции длительностью пять или десять минут (Приложение В, табл. 23-25).