Содержание к диссертации
Введение
Глава 1. Обзор литературы 13
1.1. Анатомо-функциональная характеристика лимфатического русла бедра 13
1.2. Лимфатические узлы в условиях воспаления 18
1.3. Сорбционная терапия при гнойно-воспалительных заболеваниях 25
1.4. Влияние низкоэнергетического лазерного излучения на биологические объекты 28
Глава 2. Материалы и методы исследования 37
2.1. Объект исследования 37
2.2. Моделирование раневого воспалительного процесса мягких тканей бедра. Способы коррекции воспалительного процесса бедра с помощью гелий-неонового лазерного излучения и аппликации сорбента СИАЛ 40
2.3. Методы морфофункциональных исследований 44
2.3.1. Морфологические исследования 44
2.3.2.Флоуметрические исследования 46
Глава 3. Морфофункциональное исследование паховых, подвздошных лимфатических узлов и кожно-мышечного лоскута в нормальных условиях жизнедеятельности организма и при воздействии низкоэнергетическим гелий-неоновым лазерным излучением в нормальных условиях жизнедеятельности организма 48
3.1. Морфофункциональное исследование паховых, подвздошных лимфатических узлов и кожно-мышечного лоскута в нормальных условиях жизнедеятельности организма 48
3.1.1. Паховый лимфатический узел 48
3.1.2. Подвздошный лимфатический узел 49
3.1.3. Кожно-мышечный лоскут 51
3.1.4. Лазерная доплеровская флоуметрия 53
Резюме 53
3.2. Морфофункциональное исследование паховых, подвздошных лимфатических узлов и кожно-мышечного лоскута при воздействии низкоэнергетическим гелий-неоновым лазерным излучением в нормальных условиях жизнедеятельности организма 54
3.2.1. Паховый лимфатический узел 54
3.2.2. Подвздошный лимфатический узел 55
3.2.3. Кожно-мышечный лоскут 57
3.2.4. Лазерная доплеровская флоуметрия 58
Резюме 58
Глава 4. Морфофункциональное исследование паховых, подвздошных лимфатических узлов и кожно-мышечного лоскута в динамике (8 и 14 сутки) экспериментального раневого воспалительного процесса 61
4.1. Морфофункциональное исследование паховых, подвздошных лимфатических узлов и кожно-мышечного лоскута на 8 сутки экспериментального раневого воспалительного процесса 61
4.1.1. Паховый лимфатический узел 61
4.1.2. Подвздошный лимфатический узел 64
4.1.3. Кожно-мышечный лоскут 66
4.1.4. Лазерная доплеровская флоуметрия 66
Резюме 67
4.2, Морфофункциональное исследование паховых, подвздошных лимфатических узлов и кожно-мышечного лоскута на 14 сутки экспериментального раневого воспалительного процесса 70
4.2.1. Паховый лимфатический узел 70
4.2.2. Подвздошный лимфатический узел 72
4.2.3. Кожно-мышечный лоскут 73
4.2.4. Лазерная доплеровская флоуметрия 73
Резюме 75
Глава 5. Морфофункциональное исследование паховых, подвздошных лимфатических узлов и кожно-мышечного лоскута при воздействии низкоэнергетическим гелий-неоновым лазерным излучением в условиях экспериментального раневого воспалительного процесса (14 суток) 90
5.1. Паховый лимфатический узел 90
5.2. Подвздошный лимфатический узел 92
5.3. Кожно-мышечный лоскут 93
5.4. Лазерная доплеровская флоуметрия 96
Резюме 97
Глава 6. Морфофункциональное исследование паховых, подвздошных лимфатических узлов и кожно-мышечного лоскута при аппликационном воздействии сорбентом СИАЛ в условиях экспериментального раневого воспалительного процесса (14 суток) 100
6.1. Паховый лимфатический узел 100
6.2. Подвздошный лимфатический узел 103
6.3. Кожно-мышечный лоскут 105
6.4. Лазерная доплеровская флоуметрия 106
Резюме 106
Глава 7. Морфофункциональное исследование паховых, подвздошных лимфатических узлов и кожно-мышечного лоскута при сочетанном воздействии сорбентом СИАЛ и низкоэнергетическим гелий-неоновым лазерным излучением в условиях экспериментального раневого воспалительного процесса (14 суток) 109
7.1. Паховый лимфатический узел 109
7.2. Подвздошный лимфатический узел 111
7.3. Кожно-мышечный лоскут 115
7.4. Лазерная доплеровская флоуметрия 115
Резюме 116
Обсуждение результатов 134
Выводы 158
Список литературы 161
- Сорбционная терапия при гнойно-воспалительных заболеваниях
- Моделирование раневого воспалительного процесса мягких тканей бедра. Способы коррекции воспалительного процесса бедра с помощью гелий-неонового лазерного излучения и аппликации сорбента СИАЛ
- Морфофункциональное исследование паховых, подвздошных лимфатических узлов и кожно-мышечного лоскута при воздействии низкоэнергетическим гелий-неоновым лазерным излучением в нормальных условиях жизнедеятельности организма
- Морфофункциональное исследование паховых, подвздошных лимфатических узлов и кожно-мышечного лоскута на 14 сутки экспериментального раневого воспалительного процесса
Введение к работе
Актуальность исследования.
Более 20% всех гнойных заболеваний составляют тяжелые гнойно-септические поражения конечностей, при этом в 2-3% случаев на фоне лечения происходит генерализация процесса, а в структуре хирургической патологии они достигают от 30 до 35%, из них 23% - гнойные хирургические заболевания, 16,4% - гнойные осложнения случайных ран (Девятов В.В. с соавт., 1992; Французов В.Н. с соавт., 1999). В этой связи особую актуальность приобретают исследования, расширяющие представления о патоморфологии данного заболевания для современной медицины.
Лимфатическая система, обеспечивая дренаж тканей и осуществляя иммунную и барьерную функции, оказывается вовлеченной во все патологические процессы, протекающие в организме человека. Осуществляя лимфатический дренаж тканей, лимфатический узлы регулируют регионарную гемо- и лимфодинамику, поддерживают жидкостный гомеостаз в дренируемых органах и тканях. Дренажная функция лимфатической системы сопряжена с лимфодетоксикацией, которая представляет собой биофизическую, биохимическую (ферментативную) и биологическую (иммунную) обработку лимфы в лимфатических узлах (Бородин Ю.И., 1996).
Для нижней конечности лимфатическими узлами первого порядка являются паховые, подвздошные лимфатические узлы являются регионарными лимфатическими узлами второго порядка (Привес М.Г., 1978; Севрюкова Н.Ф., Драгун Н.Г., 1981; Белова Н.В., 2004; Ноздрачев А.Д., Поляков Е.Л., 2001). Эти группы лимфатических узлов объективно отражают изменения со стороны лимфатической системы мягких тканей бедра. Транспорт микробных токсинов и метаболитов из токсического очага через дренирующие лимфатические сосуды осуществляется непосредственно в регионарные лимфатические узлы и развитие воспаления в лимфатических узлах может стать новым источником дальнейшего распространения инфекции. Поиск способов параллельного замещения и восстановления нарушенных функций лимфатической системы (сорбционной, иммунной, транспортной, детоксикационной) при гнойно-воспалительных заболеваниях является актуальным для современной восстановительной медицины.
Раневой воспалительный процесс представляет собой сложный комплекс биологических реакций, последовательно развивающихся в тканях раны в ответ на повреждение. Основными задачами лечения первой стадии раневого процесса являются подавление инфекции, нормализация местного гомеостаза, активация отторжения некротических тканей, адсорбция токсического отделяемого раны, дегидратация и купирование болевого синдрома (Кузин М.И. и др., 1985; Гончар A.M. и др., 1986; Светухин A.M. и др., 1990; Арутюнян Б.Н., 1991). В последние годы методы аппликационной терапии с использованием разного рода сорбентов все чаще применяются в лечении раневой инфекции. Сорбент, будучи введенным в очаг поражения, дренирует ткань, связывая на своей поверхности микробы и токсические продукты, защищает лимфатические узлы от токсического действия, уменьшая всасывание токсических продуктов в лимфатические пути (Плешаков В.П., 1995; Ищенко И.Ю., Мичурина СВ., 1996; Бгатова Н.П., 1999, 2000), выполняя "протезирующую" функцию по отношению к регионарному лимфатическому аппарату. (Григорьев В.Н., Любарский М.С., 1993., Бородин Ю.И., 1994, 1995).
Пудра-сорбент СИАЛ (минеральная матрица - оксид алюминия с заданной текстурой и гидрофобизирующим кремнийорганическим покрытием) характеризуется (размер частицы 10-30 микрон) высокой бактерицидной и противоаллергической активностью. Сорбент СИАЛ сорбирует на своей поверхность патогенные микробные клетки, отмершие клетки, токсические продукты метаболизма бактериальных клеток, способствуя быстрому очищению и восстановлению поверхности кожи. Достоинством сорбента СИАЛ является его дегидратирующий эффект, позволяющий быстро подсушивать проблемную поверхность кожи, подавлять рост патогенной микрофлоры и тем самым предотвращать развитие гнойной инфекции (Бородин Ю.И., Асташов В.В., Горчаков В.Н. и др., 1998,2004).
В комплексе лечебных мероприятий, направленных на стимуляцию дренажно-детоксикационной и иммунной функции лимфатической системы, важное место занимает лазерная терапия (Бородин Ю.И. с соавт., 1988; Байбеков И.М. с соавт., 1991; Козлов В.И. с соавт., 1993; Бородин Ю.И., Любарский М.С. и др., 1999). Низкоэнергетическое гелий-неоновое лазерное излучение обладает лимфокоррегирующим и лимфостимулирующим действием в условиях развития патологического процесса (Асташов В.В., 1998, Шкурат Г.А., 2001, Казаков О.В., 2001, Юрова Е.Г., 2004).
Морфологическое исследование воздействия лазерного излучения и аппликационной терапии, с использованием сорбента, на лимфатический регион нижних конечностей в условиях воспаления, как возможных факторов преодоления эндотоксикоза, на наш взгляд, является актуальной задачей с научной и практической точек зрения. Полученные сведения могут быть использованы в программах эндоэкологической реабилитации и восстановительного лечения с использованием методов лимфосанации и детоксикации организма.
Цель исследования
Выявить особенности морфофункциональной организации регионарных лимфатических узлов (паховый и подвздошный) конечности в нормальных условиях жизнедеятельности, при локальном раневом воспалении конечности, в условиях аппликационной коррекции сорбентом СИАЛ и воздействии низкоэнергетическим гелий-неоновым лазерным излучением.
Задачи исследования 1. Исследовать морфофункциональное состояние паховых и подвздошных лимфатических узлов в нормальных условиях жизнедеятельности и в динамике экспериментального раневого воспаления конечности (8 и 14 сутки).
Изучить морфофункциональную организацию паховых и подвздошных лимфатических узлов, и прилегающих тканей кожно-мышечного лоскута при чрезкожном гелий-неоновом лазерном воздействии в нормальных условиях жизнедеятельности и при раневом воспалении конечности (14 суток).
Выявить морфофункциональные особенности организации паховых и подвздошных лимфатических узлов, прилегающих тканей кожно-мышечного лоскута при аппликационном воздействии сорбентом СИАЛ в условиях раневого воспаления конечности (14 суток).
Изучить морфофункциональную организацию паховых и подвздошных лимфатических узлов, прилегающих тканей кожно-мышечного лоскута в условиях сочетанной коррекции сорбентом СИАЛ и низкоэнергетическим гелий-неоновым лазерным излучением при раневом воспалении конечности (14 суток).
Научная новизна исследования
Результаты проведенных исследований расширяют представления о структурных преобразованиях в регионарных лимфатических узлах (паховый и подвздошный) задней конечности крыс в динамике раневого воспаления её мягких тканей. Показано, что в условиях воспалительного процесса мягких тканей бедра выраженность изменений в структурно-функциональной специализации лимфатического узла зависит от их анатомической локализации (узлы 1-го (паховый) или П-го (подвздошный) порядка для задних конечностей), сроков развития патологического процесса.
Проведены сравнительные количественные структурные исследования соматических (паховых) и висцерально-соматических (подвздошных) лимфатических узлов, кожно-мышечного фрагмента после чрезкожного низкоэнергетического гелий-неонового лазерного облучения конечности в условиях нормальной жизнедеятельности. Показано, что при лазерном воздействии на конечность выраженность структурно-функциональной специализации её регионарных лимфатических узлов зависит от их анатомического расположения. Выявлено, что лазерное излучение активирует лимфопролиферативную и дренажную функцию лимфатических узлов, микроциркуляцию в коже на периферии раны.
Впервые изучены лимфокоррегирующие свойства сорбента СИАЛ и возможность коррекции им раневого воспалительного процесса. Показано, что аппликационное использование сорбента СИАЛ позволяет в значительной степени снизить нагрузку на дренажно-детоксикационную функцию регионарного лимфатического аппарата конечности.
Выявление морфофункциональных основ действия лазерного излучения и сорбента при данной постановке задач позволяет, по нашему мнению, оценить эффективность сочетанного воздействия рассматриваемых лечебных факторов на лимфатическую систему в условиях раневого воспалительного процесса конечности. Впервые показано на морфологическом уровне, что низкоэнергетическое гелий-неоновое лазерное облучение раны и прилегающих к ней тканей способствует повышению эффекта действия аппликационно нанесенного сорбента при раневом воспалительном процессе.
Теоретическая и практическая значимость.
Сведения о структурно-функциональной специализации регионарных лимфатических узлов (I и II порядка) конечности при раневом воспалительном процессе помогут оценить барьерно-детоксикационную и иммунопоэтическую функции регионарных лимфатических узлов в динамике патологического процесса и расширить имеющиеся представления о морфо-и патогенезе данного патологического состояния. Полученные сведения о различной степени структурных преобразований в регионарных, по отношению к раневому воспалительному процессу, лимфатических узлах могут быть использованы для оценки оптимальности выбранного метода лечения.
На основании полученных данных мы полагаем, что применение лазерного излучения и сорбента СИАЛ оказывает лимфокоррегирующее действие, обеспечивая саногенный эффект при эндотоксикозе, моделируемом
11 в экспериментальных условиях. Это дает основание утверждать, что сочетанная лимфокоррекция физическим фактором низкоэнергетического лазерного излучения и новым синтетическим сорбентом СИАЛ снижает степень развития эндогенной интоксикации в организме при раневом воспалении конечности.
Результаты исследования структуры регионарных лимфатических узлов конечности при различных способах коррекции (лазерное облучение и сорбционная терапия) раневого воспаления бедра и сравнительная оценка их эффективности позволяет рекомендовать их к применению в клинической медицине в качестве вспомогательного средства, обладающего лимфокоррегирующим и лимфопротективным действиями.
Внедрение результатов работы в практику.
Результаты исследования внедрены в комплекс лечебно-реабилитационных мероприятий в здравницах ЗАО "Курорт Белокуриха", ООО Санаторий "Здравница" и ОАО "Санаторий "Россия" (г. Белокуриха). Результаты исследования регионарных лимфатических узлов конечности в норме, при раневом воспалении и в условиях коррекции сорбентом СИАЛ и лазерным излучением внедрены в практику научно-исследовательской работы лаборатории ультраструктурных исследований НИИКиЭЛ СО РАМН (г. Новосибирск). Данные об особенностях структурной организации регионарных лимфатических узлов конечности в норме, при раневом воспалении и в условиях коррекции сорбентом и лазерным излучением используются в учебном процессе на кафедре фундаментальной медицины медицинского факультета НГУ (г. Новосибирск) по курсу топографической анатомии и оперативной хирургии, а также в учебном процессе кафедры восстановительной медицины ГОУ ВПО АГМУ Росздрава (г. Барнаул). Положения, выносимые на защиту
1. Раневое воспаление мягких тканей бедра на ранней стадии процесса (8 сутки) приводит к одновременной активации дренажно- детоксикационной функции и изменению функциональной специализации регионарных лимфатических узлов первого и второго порядка (паховые и подвздошные), а на более поздней стадии раневого процесса (14 сутки) наиболее выраженные структурные преобразования (зональность, клеточный состав) выявлены в регионарных лимфатических узлах первого порядка (паховые).
Выявлено, что чрезкожное гелий-неоновое лазерное облучение бедра в физиологических условиях вызывает структурные преобразования (отек капсулы, зональность, клеточный состав) в регионарных лимфатических узлах (паховые и подвздошные), зависящие от их анатомической локализации; а при раневом воспалении бедра (14 суток), приводит к лимфонаполнению лимфатических узлов, характерным изменениям структуры их коркового вещества, в ране активирует рост грануляционной ткани и дилятацию сосудов.
Аппликационное применение сорбента СИАЛ при раневом воспалении бедра (14 суток) вызывает увеличение размеров В-зависимой зоны паховых и подвздошных лимфатических узлов, количества зрелых и незрелых лимфоидных клеток, макрофагов в ней, в ране уменьшает отек и гиперемию, активирует рост грануляционной ткани.
Сочетанное применение аппликации сорбента СИАЛ и облучения низкоэнергетическим гелий-неоновым лазером области раневого воспаления бедра (14 суток) оказывает лимфокоррегирующее действие (восстановление корково-мозгового соотношения в паховых и подвздошных лимфатических узлах, увеличение числа незрелых и зрелых лимфоидных клеток), способствует активации местного кровотока, восстановлению структуры кожи и подлежащих тканей.
Сорбционная терапия при гнойно-воспалительных заболеваниях
При различных гнойно-воспалительных заболеваниях наблюдается развитие эндотоксикоза, сопровождающегося накоплением в интерстициальном пространстве продуктов нарушенного метаболизма. Поэтому широко разрабатываются различные методы, направленные на санацию тканевого интерстиция, на восстановление адекватного и более раннего лимфатического дренажа (Григорьев В.Н., Любарский М.С., 1993; Сысолятина Н.И. и др., 1994; Ефремов А.В., Мизулин Ф.Ф., 1995).
В последнее время, в связи с этим, получили распространение методы сорбционной терапии (Усов В.В., 1988; Любарский М.С. и др., 1992, 1994, 1995, 1997; Маринкин И.О., 1995; Нимаев В.В., Поспелов В.П., 1993; Рачковская Л.Н., 1996, Рачковская Л.Н. и др., 1994; Сысолятина Н.И. и др., 1994; Чикова Е.Д., Асташов В.В., 2000; Чикова Е.Д., 2005; Гармаева Д.К. и др., 1994). По данным Бородина Ю.И. (1994), Ефремова А.В. с соавторами
(1993), Плешакова В.П. с соавторами (1993, 1995); Сысолятиной Н.И. с соавторами (1994) принципы сорбентной терапии и естественного лимфодренажа тканей во многом сходны. В обоих случаях действуют механизмы разгрузки и детоксикации патологического очага. Углеродминеральный сорбент, будучи введенным в очаг поражения, дренирует ткань, связывая на своей поверхности микробы и токсические продукты, тем самым дублируя функции регионарного лимфатического узла. При контакте гранул углеродминерального сорбента с живой биологической тканью возникает принципиально новая биоминеральная среда со своей архитектоникой, где минеральные гранулы и "живые" клетки формируют некое новое структурно-функциональное единство: клетки лимфоидного ряда группируются в ассоциации, напоминающие фолликулы лимфатических узлов. Сорбентно-клеточный конгломерат принимает на себя функции регионарного лимфатического узла - барьерно-фильтрационную, транспортно-дренажную, защитную, формируя биологическую модель лимфатического узла, "искусственный" лимфатический узел, вынесенный в зону агрессии (Бородин Ю.И., 1993; Любарский М.С., Плешаков В.П. и др., 1993). Сорбент, в данном случае выполняет "протезирующую" функцию по отношению к регионарному лимфатическому аппарату (Бородин Ю.И., 1994, 1995; Григорьев В.Н., Любарский М.С., 1993). Правомерность такого вывода косвенно подкрепляется тем, что регионарный лимфатический узел в условиях сорбентной терапии обнаруживает признаки значительно меньшей нагрузки со стороны бассейна лимфосбора, дренаж и санация бассейна такого комбинированного лимфосбора протекает быстрее и эффективнее (Бородин Ю.И., 1993; Гармаева Д.К. и др., 1995; Любарский М.С., Плешаков В.П. и др., 1993; Григорьев В.Н., Любарский М.С., 1993).
Поскольку патогенез раневого процесса определяется, главным образом, бактериальной инвазией и состоянием первичного очага инфекции, основные задачи лечения раневого воспаления определяются необходимостью воздействия на факторы, имеющие ведущее значение в патогенезе местной или генерализованной раневой инфекции (Гончар A.M. и др., 1986; Светухин A.M. и др., 1990; Арутюнян Б.Н. и др., 1991; Любарский М.С. и др., 1995; Беляков Н.А., 1996; Беляков Н.А. и др., 1997). В настоящее время разрабатываются различные методы, направленные на санацию тканевого интерстиция, на восстановление адекватного и более раннего лимфатического дренажа (Григорьев В.Н., Любарский М.С, 1993; Сысолятина Н.И. и др., 1994). Так как резорбция токсинов с раневой поверхности осуществляется по лимфатической системе, поэтому особое место в терапии воспалительных заболеваний должно быть отведено методам, позволяющим воздействовать на состояние регионарного лимфатического русла, направленным на раннее восстановление адекватного лимфатического дренажа тканей и целенаправленную санацию регионарного лимфатического русла (Белужников А.В. и др., 1992). Правомерность такого вывода косвенно подкрепляется тем, что регионарный лимфатический узел в условиях сорбентной терапии обнаруживает признаки значительно меньшей нагрузки со стороны бассейна лимфосбора, дренаж и санация бассейна такого комбинированного лимфосбора протекает быстрее и эффективнее (Любарский М.С, Плешаков В.П. и др., 1993; Нимаев В.В., Поспелов В.П., 1993; Бородин Ю.И., 1993; Любарский М.С, Летягин А.Ю. и др., 1994; Нимаев В.В. и др., 1994; Гармаева Д.К. и др., 1995; Плешаков В.П., 1995; Маринкин И.О., 1995). Реабилитация поврежденного органа совершается полнее и быстрее, если оставался сохранным обслуживающий этот орган лимфатический аппарат (Григорьев В.Н., Любарский М.С, 1993). Сорбент в данном случае выполняет "протезирующую" функцию по отношению к регионарному лимфатическому аппарату. (Григорьев В.Н., Любарский М.С, 1993., Бородин Ю.И., 1994, 1995).
Моделирование раневого воспалительного процесса мягких тканей бедра. Способы коррекции воспалительного процесса бедра с помощью гелий-неонового лазерного излучения и аппликации сорбента СИАЛ
Раневой процесс моделировали по методике Е.М. Данилиной и др. (1983), Н.В. Беловой (2004). Данная модель легко воспроизводима вследствие самопроизвольности развития клинического проявления инфекции в ране и наиболее адекватна аналогичной патологии у человека. На ранних сроках, до 12-х суток, в ране преобладает грамположительная кокковая микрофлора с некрозом и яркими клиническими проявлениями. Известно, что для развития гнойного процесса в ране необходимо, чтобы общее количество микробных тел в 1 г ткани раны превысило некоторый критический уровень, который зависит от общего состояния макроорганизма и состояния тканей раны. Наличие же некротических масс является необходимым и достаточным условием для клинического проявления инфекции в ране крыс и не зависит от заражающей дозы микроорганизма, присутствия инородного тела и природы некротизирующего агента (Данилина Е.М. и др., 1983). Моделирование раневого воспалительного процесса выполняли следующим образом: на боковой поверхности бедра животного наносилась кожная рана размером 1,5 х 1,5 см, мышечный массив некротизировался введением 0,5 мл 10% раствора хлористого кальция. В связи с тем, что ряд обезболивающих средств (барбитураты, тиопентал, кетамин и фторотан) блокируют выход малых лимфоцитов и бластов в эфферентную лимфу (Moore Т.С., 1984), в качестве обезболивания мы применяли ингаляцию диэтиловым эфиром.
Уже на 3-е сутки после нанесения раны формировался очаг экссудативного воспаления с фибринозным экссудатом и некротизированными участками кожи, подкожной клетчатки, мышечной ткани. С этого момента мы вели отсчет времени и начинали лечение. Как показала Е.М. Данилина (1983), с 3 по 5-е сутки после нанесения раны до 15 х суток в ране визуально отмечалось наличие гноя желто-зеленого цвета, она представляла собой полость, заполненную гнойно-некротическими массами. Начало роста островков грануляций был отмечен на 9-е сутки, массивное разрастание грануляций происходило к 13-м суткам. Поэтому, с учетом стадийности воспалительного процесса (Серов В.В., Пауков B.C., 1995; Ефремов А.В., Мизулин Ф.Ф., 1995; Чернух A.M., 1979; Курбангалеев СМ., 1985; Гончар A.M. с соавт., 1986; Светухин A.M. и др., 1990), нами были избраны следующие сроки забора материала: 8-е сутки воспалительного процесса в ране, соответствующие окончанию экссудативной фазы, и 14-е сутки, соответствующие пролиферативной фазе воспаления. Животным с экспериментальным раневым воспалением мягких тканей конечности ежедневно в течение 8 суток проводилось обтирание поверхности и краев раны тампоном, смоченным стерильным физиологическим раствором, на рану накладывалась стерильная марлевая повязка.
Экспериментальная коррекция раневого воспалительного процесса мягких тканей бедра с помощью лазерного излучения выполнялась следующим образом: ежедневно (начиная с 3 суток) в течение 10 дней производилось чрезкожное гелий-неоновое лазерное воздействие на области пограничного участка кожи и самой раны на латеральной поверхности бедра животного. В работе использовали гелий-неоновый лазер ЛГН-111, с длинной волны 632,8 нм. Гелий-неоновое лазерное воздействие проводилось под эфирным наркозом. Выходная мощность лазерного излучения 25 мВт, диаметр светового пятна - около 1,5 см. Это позволило охватить часть области расположения пограничного участка кожи и саму рану. Плотность потока мощности лазерного излучения 15 мВт/см , время одного сеанса - 10 минут. Перед сеансом лазерного облучения рану предварительно очищали марлевыми тампонами, смоченными физиологическим раствором, а после облучения на рану накладывали стерильную марлевую повязку. Облучение интактных животных (под наркозом) проводилось ежедневно в течение дней: облучалась латеральная поверхность бедра животного, выходная мощность лазерного излучения 25 мВт, диаметр светового пятна - около 1,5 см, плотность потока мощности лазерного излучения 15 мВт/см2, время одного сеанса - 10 минут.
Экспериментальная коррекция раневого воспалительного процесса мягких тканей бедра с помощью метода аппликационной сорбционной терапии выполнялась, используя новый неспецифический синтетический сорбент СИАЛ (патент РФ №2094116 от 18.06.96г.) на основе оксида алюминия, разработанный в ГУ НИИКиЭЛ СО РАМН. Сорбент СИАЛ представляет собой тонкодисперсный порошок белого цвета с размером гранул 5-30 мкм, с нейтральной гидрофильно-гидрофобной химической природой поверхности. Структура и химическая природа поверхности сорбента СИАЛ обусловлены сочетанием свойств минеральной матрицы у-АЬОз и гидрофобизующего кремнийорганического покрытия, равномерно распределенного по ее поверхности. Использование для изготовления сорбента СИАЛ заранее приготовленной матрицы обусловливает заданную текстуру поверхности сорбента. Сорбент СИАЛ является механически прочным, легко стерилизующимся, не обладающим собственной токсичностью материалом (Асташова Т.А. и др., 1996 - 1998). К неоспоримым достоинствам сорбента «СИАЛ» относят следующие: - это экологически чистый медицинский сорбент, не содержит загрязняющих продуктов (в отличие от сорбентов, изготавливаемых из природных экологически загрязненных минералов, которые нельзя полностью очистить); - он обладает высокой сорбционной способностью в отношении широкого спектра токсинов и микробов; - он связывает на своей поверхности свободные радикалы, другие токсичные продукты метаболизма клеток и микробов, очищает и восстанавливает поврежденную поверхность кожи; -обладает стабилизирующим, подсушивающим и маскирующим эффектами; -способствуют быстрому заживлению кожных потертостей, опрелостей, ожогов, ранок. Оценка свойств пудры - сорбента «СИАЛ» проведена в ГУ НИИ Клинической и экспериментальной лимфологии СО РАМН, г. Новосибирск, в НИИ органической химии СО РАН, г. Новосибирск (Сан. эпид. заключение № 54.НЖ.09.915.П.000223.04.04). Показана клиническая эффективность - сокращение сроков лечения при применении сорбента «СИАЛ» для местной терапии больных с атопическими дерматитами, нейродермитом, псориазом (экссудативные формы), ожогами 1-, 2-ой степени, пиодермиями. Оценка клинической эффективности проведена в ОАО «Санаторий «Россия» (г. Белокуриха, Алтайский край), в Новосибирской городской клинической больнице скорой медицинской помощи №1, в детском санатории «Белокуриха» МЗ России (г. Белокуриха) (Савельев И.С. и др., 1998, 1999), в центре реабилитации пострадавших в результате ядерных испытаний на Семипалатинском полигоне (г. Рубцовск), в санатории «Барнаульский» (г. Барнаул, Алтайский край). По результатам работы были созданы методические рекомендации, вошедшие в Программу оздоровительных мероприятий по лимфосанации и детоксикации организма в ГУ НИИ клинической и экспериментальной лимфологии СО РАМН (Бородин Ю.И., Асташов В.В., Горчаков В.Н. и др., 1998, 2004). Сорбент СИАЛ наносили непосредственно на рану боковой поверхности бедра животного. Периодичность нанесения 1 раз в день, тонким слоем ежедневно (начиная с 3 суток) в течение 10 дней. Перед нанесением сорбента рану предварительно очищали марлевыми тампонами, смоченными физиологическим раствором. Избыток пудры-сорбента удаляли сухой салфеткой, на рану накладывали стерильную марлевую повязку.
Морфофункциональное исследование паховых, подвздошных лимфатических узлов и кожно-мышечного лоскута при воздействии низкоэнергетическим гелий-неоновым лазерным излучением в нормальных условиях жизнедеятельности организма
Ниже приведены результаты исследований, которые получены при облучении бедра крыс низкоэнергетическим гелий-неоновым лазерным излучением в физиологических условиях жизнедеятельности организма (таблица 6. стр. 119). Площадь коркового и мозгового вещества паховых лимфатических узлов достоверно не отличается от показателей интактной группы. В структуре коркового вещества отмечается уменьшение площади первичных лимфоидных узелков на 80,3%. Увеличение площади вторичных лимфоидных узелков на 14,8% происходит преимущественно за счет увеличения мантийной зоны (на 23,2%). Размеры коркового плато возрастают на 67,8%о, а паракортикальной зоны достоверно не изменяются. Размеры мозговых тяжей уменьшаются на 30,8%. Мозговые синусы лимфатических узлов увеличиваются на 36% по сравнению с контролем. Корково-мозговой индекс составляет - 1,37. Такая структура лимфатического узла, как и в интактной группе, соответствует промежуточному типу (рис. 4. стр. 56). Капсула увеличилась по сравнению с контролем на 33,1%. Краевой синус расширен на всем протяжении, размер его площади увеличивается на 60,2% в сравнении с группой интактных животных.
Цитоархитектоника зон пахового лимфатического узла представлена в таблице 7. стр. 121. В цитоархитектонике герминативных центров вторичных лимфоидных узелков в группе с воздействием низкоэнергетическим гелий-неоновым лазерным излучением в условиях нормы отмечается увеличение числа лимфобластов на 43,7% и средних лимфоцитов — на 33,4%. Уменьшается митотическая активность клеток: уменьшается число клеток на стадии митоза на 24,3%.
В паракортикальной зоне увеличивается число средних лимфоцитов - на 41,6%, макрофагов - на 49%, ретикулярных клеток - на 44,1%.
В мозговых тяжах отмечается увеличение числа незрелых плазматических клеток - на 21,2%, макрофагов - на 52,5%, ретикулярных клеток - на 55,2%. Уменьшается количество плазмобластов на 31,8%. Возрастает митотическая активность клеток: увеличивается число клеток на стадии митоза на 68,7%.
В мозговых синусах отмечается увеличение числа зрелых плазматических клеток - на 34,9%, макрофагов - на 34,2%. Отмечается уменьшение численности малых лимфоцитов на 34,2% и ретикулярных клеток - на 37,5%.
Площадь коркового и мозгового вещества подвздошных лимфатических узлов достоверно не отличается от показателей интактной группы (таблица 8. стр. 125). В структуре коркового вещества отмечается уменьшение относительных размеров первичных лимфоидных узелков на 41,5%. Размеры вторичных лимфоидных узелков возрастают на 49,3% (за счет увеличения площади мантийной зоны - на 95,3%). Относительная площадь паракортикальной зоны уменьшается на 14,4%. Корково-мозговой индекс составляет 1,01. Такая структура лимфатического узла соответствует промежуточному типу (рис. 5. стр. 57). Размеры капсулы лимфатических узлов увеличены в 2,2 раза.
Цитоархитектоника зон подвздошных лимфатических узлов представлена в таблице 9. стр. 127. В цитоархитектонике герминативных центров вторичных лимфоидных узелков в группе с воздействием низкоэнергетическим гелий-неоновым лазерным излучением в условиях нормы отмечается увеличение числа макрофагов - на 33,3%. Уменьшается число лимфобластов - на 16,8% и ретикулярных клеток - на 45,7%.
В паракортикальной зоне увеличивается число макрофагов - на 52,7%. Отмечается уменьшение числа лимфобластов - на 42,9% и ретикулярных клеток - на 43,3%. В мозговых тяжах отмечается увеличение числа плазмобластов - на 36,3%, макрофагов - в 2,2 раза.
В мозговых синусах отмечается увеличение числа макрофагов - на 42,2%. Отмечается уменьшение численности ретикулярных (на 52,3%) и тучных (на 38,2%) клеток.
При гистологическом изучении кожно-мышечного лоскута при облучении низкоэнергетическим гелий-неоновым лазерным излучением бедра крыс в условиях нормы обнаружено, что, как и у интактных животных, эпидермис представлен многослойным плоским ороговевающим эпителием и состоит из нескольких рядов базофильных эпителиальных клеток, образующих слои. Эпителиальные клетки сохраняют свое обычное строение, ядра их округло-овальной формы. Эпителиальный покров разграничивается с мышечным массивом дермой, представленной слоем волокнистой соединительной ткани. Здесь залегают потовые и сальные железы, волосяные фолликулы, кровеносные и лимфатические сосуды мелкого калибра. Просвет кровеносных сосудов увеличен, но при этом не имеет достоверных отличий от показателей интактной группы. Прелимфатические пути (интерстициальные пространства поперечно-полосатой мышечной ткани) расширены. Наблюдается незначительное увеличение (в пределах ошибки) клеточных элементов: гистиоцитов, фибробластов, фиброцитов.
Морфофункциональное исследование паховых, подвздошных лимфатических узлов и кожно-мышечного лоскута на 14 сутки экспериментального раневого воспалительного процесса
На 14 сутки экспериментального раневого воспалительного процесса, как и на 8 сутки эксперимента, в структуре паховых лимфатических узлов отмечается, но в меньшей степени выраженное, уменьшение площади коркового вещества (на 21,1%) и увеличение мозгового - на 37,5% (таблица 2. стр. 78). В отличие от предыдущего срока эксперимента уменьшение площади коркового вещества происходит за счет первичных лимфоидных узелков (уменьшается на 67,1%) и паракортикальной зоны (уменьшается на 27,5%). Площадь мозговых тяжей сохраняется увеличенной - на 30%). Увеличена площадь мозговых (49,7%) и краевого (на 41,3%) синусов. Корково-мозговой индекс, сохраняется уменьшенным, по сравнению с интактной группой, но увеличенным по сравнению с 8 сутками эксперимента и составляет - 0,68. Такая структура лимфатического узла также соответствует фрагментированному типу (рис. 11. стр. 71).
Цитоархитектоника паховых лимфатических узлов на 14 сутки эксперимента представлена в таблице 3. стр. 79. В герминативных центрах вторичных лимфоидных узелков отмечается, как и на 8 сутки эксперимента, увеличение (рис. 22. стр. 89) числа лимфобластов в 2,4 раза, макрофагов - на 82,3%, ретикулярных клеток - на 72,4%. При этом увеличение численности макрофагов и ретикулярных клеток выражено в большей степени, чем на 8 сутки воспаления. Сохраняется увеличение числа клеток на стадии митоза (на 68,2%)) и уменьшение малых лимфоцитов - на 19% .
В паракортикальной зоне увеличивается число средних лимфоцитов - на 55,4%, макрофагов - на 68,9%, ретикулярных клеток - в 2,7 раза.
В мозговых тяжах (рис. 12. стр. 71) отмечается увеличение числа плазмобластов на 29,2% , средних лимфоцитов - на 99%) (рис. 24. стр. 89), ретикулярных клеток - в 2,2 раза. Отмечается уменьшение численности незрелых плазматических клеток - на 65%, макрофагов - на 30,5%. Возрастает митотическая активность клеток: увеличивается число клеток на стадии митоза на 68,2%.
В мозговых синусах отмечается увеличение числа средних лимфоцитов в 2,5 раза, незрелых плазматических клеток - на 83%, ретикулярных клеток - в 2 раза. Отмечается уменьшение численности малых лимфоцитов на 21,8%, макрофагов - на 45%.
На 14 сутки экспериментального раневого воспалительного процесса, как и на 8 сутки эксперимента, в структуре подвздошных лимфатических узлов отмечается, но в меньшей степени уменьшение площади коркового вещества (на 25,6%) и увеличение мозгового - на 27,2% (таблица 4. стр. 85). Уменьшение площади коркового вещества происходит за счет уменьшения площади вторичных (на 38,1%) и первичных лимфоидных узелков (на 74,2%о), коркового плато (на 38%). Площадь тимусзависимой зоны, по сравнению с 8 сутками эксперимента, увеличивается, достигая значений интактной группы. Площадь мозговых тяжей сохраняется увеличенной (на 37%), но в меньшей степени чем через 8 суток экспериментального раневого воспалительного процесса. Восстанавливается транспорт лимфы через лимфатический узел. Корково-мозговой индекс, сохраняясь уменьшенным, по сравнению с интактной группой, увеличивается по сравнению с 8 сутками эксперимента (на 37%) составляет - 0,63. Такая структура лимфатического узла также соответствует фрагментированному типу (рис. 13. стр. 74).
Цитоархитектоника подвздошных лимфатических узлов на 14 сутки экспериментального раневого воспалительного процесса представлена в таблице 5. стр. 86. В цитоархитектонике герминативных центров вторичных лимфоидных узелков отмечается, как и на 8 сутки воспаления, уменьшение числа средних - на 24,2% и малых (на 9,8%) лимфоцитов. Повышается число макрофагов — в 2,2 раза и ретикулярных клеток — в 5,1 раза. Возрастает митотическая активность клеток: увеличивается число клеток на стадии митоза на 89,2%).
В паракортикальной зоне происходят более выраженные изменения, чем в группе с 8 сутками воспаления: увеличивается число средних лимфоцитов — в 2,2 раза, макрофагов - в 3,6 раза, ретикулярных клеток - в 5 раз. Уменьшено количество малых лимфоцитов — на 10,5%.
В мозговых тяжах отмечается увеличение числа плазмобластов - в 2,1 раза, средних лимфоцитов — на 57,3%), макрофагов — в 2,7 раза, ретикулярных клеток - в 3 раза, клеток на стадии митоза - на 61,3% . Отмечается уменьшение числа зрелых плазматических клеток на 34,4%).
В мозговых синусах отмечается увеличение числа плазмобластов - в 2,5 раза, средних лимфоцитов на 75,2% , незрелых (на 34,2%) плазматических клеток, ретикулярных клеток - в 3,2 раза. Уменьшается число малых лимфоцитов - на 28%.
На 14 сутки в ране (рис. 14. стр. 74), по сравнению с 8 сутками визуально отмечается уменьшение отека и количества отделяемого. При гистологическом изучении выявлено, что края и дно раны диффузно инфильтрированы клеточными элементами, преимущественно лимфоцитами и плазмоцитами. Отек подлежащих тканей сохраняется, но выражен в меньшей степени, чем через 8 суток эксперимента. Просвет кровеносных сосудов практически не изменен (не имеет достоверных отличий от показателей интактной группы), хотя некоторые из сосудов остаются расширенными. Наблюдается рост единичных островков грануляций, в грануляционной ткани обнаруживается большое количество фибробластов.
